【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于寄生虫培养，具体涉及一种盾纤毛虫的纯化培养方法。
技术介绍
1、盾纤毛虫是纤毛虫的一类，隶属于纤毛门ciliophora、寡膜纲oligohymenophorea、盾纤目scuticociliatida、嗜污科philasteridae。该类寄生虫对寄生宿主无专一性，可感染绝大多数水产养殖动物，不仅对养殖动物生长安全具有危害性，且种类繁杂。盾纤毛虫可侵入鱼类皮肤、鳃和肌肉，还的腹腔、甚至肾脏、胰腺，大脑。病鱼鳍条红肿、病灶周围组织肿胀，体表出现白斑，黏液增多，引起继发性细菌感染，对多种养殖水生动物造成巨大的经济损失。
2、随着盾纤毛虫病的频繁发生，针对该病的防治工作在各个领域取得了显著成果。然而，在前期准备阶段，如何获取纯净且种群密度较高的盾纤毛虫培养液一直是制约后续防治研究的主要难题。解决这一问题对于开展有效的防治研究至关重要，因为高质量的盾纤毛虫培养液可以提供研究工作所需的可靠数据基础，为后续的防治策略设计和实施提供科学依据。
技术实现思路
1、本专利技术就是开发了一种盾纤毛虫的纯化培养方法，该纯化培养方法可以获得纯净且种群密度较高的盾纤毛虫。
2、为了达到上述目的，本专利技术可以采用以下技术方案：
3、本专利技术一方面提供一种盾纤毛虫的纯化培养方法，包括：使用第一培养液接种盾纤毛虫进行培养得第二培养液；第一培养液的制备方法包括：(1)将鱼肉进行破碎制成粉末；(2)将粉末与海盐水混合，煮沸得混合液；(3)将混合液进行200目过滤
4、优选地，上述纯化培养方法包括以下条件中的一种或多种组合：(a)步骤(1)中，鱼肉为干燥的鱼肉，干燥包括：将鱼肉切为5mm薄片，然后在80℃干燥48h；(b)步骤(1)中，破碎条件为2000rpm破碎60s；(c)步骤(2)中，粉末的量为0.3g/100ml海盐水；(d)步骤(2)中，煮沸时间为10min。
5、优选地，上述纯化培养方法还包括：将第二培养液依次进行300目和1000分级过滤。
6、优选地，上述第二培养液使用过滤装置进行300目和1000分级过滤；过滤装置包括取样器、第一过滤装置和第二过滤装置，取样器、第一过滤装置和第二过滤装置依次连接；其中，第一过滤装置包括第一滤膜，第二过滤装置包括第二滤膜；第一滤膜的目数为300目，第二滤膜的目数为1000目。
7、优选地，上述过滤装置还包括以下特征中的一种或多种：(a)取样器、第一过滤装置和第二过滤装置通过盈配合连接；(b)第一滤膜和第二滤膜为尼龙网膜。
8、优选地，上述过滤装置还包括集液管，其与第二过滤装置连接。
9、优选地，上述盾纤毛虫体长为15μm-50μm。
10、优选地，上述盾纤毛虫包括水滴伪康纤虫或海洋尾丝虫。
11、优选地，上述鱼肉为盾纤毛虫的宿主肌肉。
12、本专利技术有益效果至少包括：
13、(1)使用本专利技术中纯化培养方法培养得到的含有盾纤毛虫的培养液中大颗粒杂质含量显著减少，盾纤毛虫培养液体系明显变得纯净。
14、(2)通过本专利技术中的过滤装置进行分级过滤后产率较高，比如盾纤毛虫种群密度培养液分级过滤前为134667±5462ind/ml，分级过滤后为71912±4372ind/ml，产率为53.4％。
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1.一种盾纤毛虫的纯化培养方法，其特征在于，包括：使用第一培养液接种盾纤毛虫进行培养得第二培养液；第一培养液的制备方法包括：(1)将鱼肉进行破碎制成粉末；(2)将粉末与海盐水混合，煮沸得混合液；(3)将混合液进行200目过滤得培养液。
2.根据权利要求1所述的纯化培养方法，其特征在于，纯化培养方法包括以下条件中的一种或多种组合：(a)步骤(1)中，鱼肉为干燥的鱼肉，干燥包括：将鱼肉切为5mm薄片，然后在80℃干燥48h；(b)步骤(1)中，破碎条件为2000rpm破碎60s；(c)步骤(2)中，粉末的量为0.3g/100ml海盐水；(d)步骤(2)中，煮沸时间为10min。
3.根据权利要求1或2所述的纯化培养方法，其特征在于，纯化培养方法还包括：将第二培养液依次进行300目和1000分级过滤。
4.根据权利要求3所述的纯化培养方法，其特征在于，第二培养液使用过滤装置进行300目和1000分级过滤；过滤装置包括取样器(1)、第一过滤装置(2)和第二过滤装置(3)，取样器(1)、第一过滤装置(2)和第二过滤装置(3)依次连接；其中，第一过滤装置(
5.根据权利要求4所述的纯化培养方法，其特征在于，过滤装置还包括以下特征中的一种或多种：(a)取样器(1)、第一过滤装置(2)和第二过滤装置(3)通过盈配合连接；(b)第一滤膜(5)和第二滤膜(6)为尼龙网膜。
6.根据权利要求4或5所述的纯化培养方法，其特征在于，过滤装置还包括集液管(4)，其与第二过滤装置(3)连接。
7.根据权利要求1、2、4或5所述的纯化培养方法，其特征在于，盾纤毛虫体长为15μm-50μm。
8.根据权利要求1、2、4或5的纯化培养方法，其特征在于，盾纤毛虫包括水滴伪康纤虫或海洋尾丝虫。
9.根据权利要求1、2、4或5所述的纯化培养方法，其特征在于，鱼肉为盾纤毛虫的宿主肌肉。
10.根据权利要求6所述的纯化培养方法，其特征在于，鱼肉为盾纤毛虫的宿主肌肉。
...【技术特征摘要】
1.一种盾纤毛虫的纯化培养方法，其特征在于，包括：使用第一培养液接种盾纤毛虫进行培养得第二培养液；第一培养液的制备方法包括：(1)将鱼肉进行破碎制成粉末；(2)将粉末与海盐水混合，煮沸得混合液；(3)将混合液进行200目过滤得培养液。
2.根据权利要求1所述的纯化培养方法，其特征在于，纯化培养方法包括以下条件中的一种或多种组合：(a)步骤(1)中，鱼肉为干燥的鱼肉，干燥包括：将鱼肉切为5mm薄片，然后在80℃干燥48h；(b)步骤(1)中，破碎条件为2000rpm破碎60s；(c)步骤(2)中，粉末的量为0.3g/100ml海盐水；(d)步骤(2)中，煮沸时间为10min。
3.根据权利要求1或2所述的纯化培养方法，其特征在于，纯化培养方法还包括：将第二培养液依次进行300目和1000分级过滤。
4.根据权利要求3所述的纯化培养方法，其特征在于，第二培养液使用过滤装置进行300目和1000分级过滤；过滤装置包括取样器(1)、第一过滤装置(2)和第二过滤装置(3)，取样器(1)、第一过滤装置(2...
【专利技术属性】
技术研发人员：黎睿君，倪鑫鹏，赵庚彤，孙清美慧，
申请(专利权)人：大连海洋大学，
类型：发明
国别省市：
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