【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于微生物领域，具体涉及一种短促生乳杆菌及其应用。
技术介绍
1、游离胆红素(间接胆红素)是制造体外培育牛黄及制造人工牛黄的主要原料，具有多种药理作用，在医药及医美产品中应用及其广泛，市场需求量极大。目前市场上游离胆红素及其胆红素钙的获取方法主要是从各种动物胆汁中提取，提取方法采取物理与化学方法的沉淀法、溶媒萃取法及离子交换树脂吸附法等：
2、中国专利cn101429152a《从牛胆汁中提取胆红素的方法》将动物胆汁原料中的胆绿素进行还原以提高胆红素收率，但由于繁琐的工艺过程，提取收率低下并耗费大量酸碱及溶剂，生产成本高。
3、中国专利cn104774885a《一种利用发酵法从牛胆汁中提取胆红素的方法》采用生物法结合溶媒溶剂萃取法从动物胆汁中获取胆红素，使得胆红素的得率与产品纯度都获得一定的提高。但存在微生物发酵使用的菌株为大肠杆菌、产气梭状芽胞杆菌等致病菌或条件致病菌，造成产品分离纯化难以去除致病菌产生的有害细菌毒素等，产品应用于医美或医药产品中存在一定的安全风险，应用规模受到限制。
4、中国专利技术专利申请cn115851497a《一株耐牛胆汁型牛黄转化菌及其应用》公开了一株柠檬酸杆菌cgmcc no.24893，该菌能够耐受牛胆汁，并具有发酵牛胆汁转化生成游离胆红素及游离胆酸的能力，但该株柠檬酸杆菌在牛胆汁中的延迟期为48h，且发酵周期长达16天，且柠檬酸杆菌为革兰氏阴性菌，在发酵过程中将产生内毒素等毒力因子，产品应用于医美或医药产品中存在一定的安全风险。
1、本专利技术应用安全有效的益生菌菌株进行发酵牛胆汁生产游离胆红素及胆红素钙，实现体外培育牛黄，具有生产工艺温和简单、生产成本低、减少易燃易爆溶剂溶媒使用，减少环境污染，生产过程安全、减排降耗环保，产品质量安全等优点，具有良好的经济与社会效益。具体的：
2、本专利技术的第一方面，提供了一种短促生乳杆菌(levilactobacillus brevis)，所述的短促生乳杆菌已于2023年10月23日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址：广东省广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，保藏号为gdmcc no:63910。
3、优选的，所述的短促生乳杆菌的16s rdna的序列如seq id no：1所示。
4、优选的，所述的短促生乳杆菌具有耐牛胆汁的能力，进一步优选的，所述的短促生乳杆菌在纯牛胆汁中能够存活至少6天。
5、本专利技术所述的短促生乳杆菌来源于传统发酵食品，属于公认安全(generallyreconized as safe,gras)的菌种。
6、本专利技术的第二方面，提供了一种上述第一方面所述短促生乳杆菌的培养方法，所述的培养方法包括使用培养基，所述的培养基中包含体积分数为至少10％的牛胆汁，优选为10％-50％中任一数值或区间，例如10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％或50％。
7、本专利技术的第三方面，提供了一种上述第一方面所述的短促生乳杆菌在发酵牛胆汁、将结合胆红素转化为游离胆红素、制备胆红素钙，和/或，制备体外培育牛黄中的应用。
8、本专利技术的第四方面，提供了一种将结合胆红素转化为游离胆红素的方法，所述的方法包括将微生物接入包含结合胆红素的体系中，所述的微生物包括上述第一方面所述的短促生乳杆菌。
9、优选的，所述的方法包括使用微生物对包含结合胆红素的体系进行发酵。
10、优选的，所述的方法包括将包含结合胆红素的体系经过过滤、灭菌处理获得除菌体系。
11、优选的，所述的方法包括将微生物接入种子培养基获得微生物种子液。
12、优选的，所述的种子培养基可以是现有技术中任一适合微生物(特别是乳酸杆菌)增殖的培养基，进一步优选在所述的种子培养基中添加灭菌牛胆汁或灭菌牛胆粉或灭菌牛胆盐中的一种或多种，更优选的，所述的种子培养基中，灭菌牛胆汁或灭菌牛胆粉或灭菌牛胆盐中一种或多种的体积分数至少40％以上，优选为40％-60％中任一数值，例如40％、45％、50％、55％或60％。
13、优选的，所述的种子培养基可以为mrs培养基(例如mrs肉汤培养基或mrs琼脂培养基)。
14、优选的，根据微生物的生理特性，所述的种子培养基的温度是可调节的，优选为30-40℃中任一数值或区间，例如30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40℃。
15、优选的，所述的方法包括将上述的微生物种子液接入上述的除菌体系获得发酵体系。
16、优选的，微生物种子液的接入比例占发酵体系体积分数的5％-90中任一数值或区间，优选为20％-50％中任一数值或区间，例如5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％或90％。
17、优选的，所述发酵体系的初始ph为4-8中任一数值或区间，例如4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5或8。在本专利技术的一个具体实施方式中，控制所述发酵体系的初始ph为6.5或7。
18、优选的，所述发酵体系的温度为25-40℃中任一数值或区间，例如25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40℃。
19、在本专利技术的一个具体实施方式中，控制发酵体系的温度为37℃。
20、优选的，发酵时间为至少30h，优选为30-150h中任一数值或区间，例如30、35、36、40、45、48、50、55、60、65、70、72、75、80、84、85、90、95、96、100、105、108、110、115、120、125、130、135、140、144、145或150h；
21、优选的，所述包含结合胆红素的体系包括牛胆汁。
22、在本专利技术的一个具体实施方式中，所述的方法包括利用微生物对牛胆汁进行发酵。
23、本专利技术的第五方面，提供了一种上述第四方面所述的方法获得的发酵产物。
24、优选的，所述的发酵产物包括高游离胆红素的体系。
25、本专利技术的第六方面，提供了一种胆红素钙的制备方法，所述制备方法包括将微生物接入包含结合胆红素的体系中，所述的微生物包括上述第一方面所述的短促生乳杆菌。
26、优选的，所述的制备方法还包含加入钙离子。
27、优选的，所述的制备方法包括使用微生物对包含结合胆红素的体系进行发酵；
28、优选的，所述的制备方法包括将包含结合胆红素的体系经过过滤、灭菌处理获得除菌体系；
29、优选的，所述的制备方法包括将微生物接入种子培养基获得微生物种子液。
30、优选的，所述的种子培养基可以是现有技术中任一适合微生物(特别是乳酸杆菌)增殖的培养基，进一步优选在所述的种子培养基中添加灭菌牛胆汁或灭菌牛胆粉或灭菌牛胆盐本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种短促生乳杆菌(Levilactobacillus brevis)，其特征在于，所述的短促生乳杆菌已于2023年10月23日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC No:63910。
2.一种权利要求1所述短促生乳杆菌的培养方法，其特征在于，所述的培养方法包括使用培养基，所述的培养基中包含体积分数为至少10％的牛胆汁，优选为10％-50％。
3.权利要求1所述短促生乳杆菌在发酵牛胆汁、将结合胆红素转化为游离胆红素、制备胆红素钙，和/或，制备体外培育牛黄中的应用。
4.一种将结合胆红素转化为游离胆红素的方法，其特征在于，所述的方法包括将微生物接入包含结合胆红素的体系中，所述的微生物包括权利要求1所述的短促生乳杆菌；
5.权利要求4所述的方法获得的发酵产物；
6.一种胆红素钙的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括将微生物接入包含结合胆红素的体系中，所述的微生物包括权利要求1所述的短促生乳杆菌；优选的，所述的制备方法还包含加入钙离子；
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述的加入钙离
8.一种包含胆红素钙的混合物，其特征在于，所述的包含胆红素钙的混合物由权利要求6或7所述的制备方法获得。
9.一种制备体外培育牛黄的方法，其特征在于，所述的方法包括将权利要求6或7所述的制备方法制备的胆红素钙，或，权利要求8所述的包含胆红素钙的混合物，经过如下步骤：
10.一种体外培育牛黄，其特征在于，所述体外培育牛黄由权利要求9所述的方法制备。
...【技术特征摘要】
1.一种短促生乳杆菌(levilactobacillus brevis)，其特征在于，所述的短促生乳杆菌已于2023年10月23日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为gdmcc no:63910。
2.一种权利要求1所述短促生乳杆菌的培养方法，其特征在于，所述的培养方法包括使用培养基，所述的培养基中包含体积分数为至少10％的牛胆汁，优选为10％-50％。
3.权利要求1所述短促生乳杆菌在发酵牛胆汁、将结合胆红素转化为游离胆红素、制备胆红素钙，和/或，制备体外培育牛黄中的应用。
4.一种将结合胆红素转化为游离胆红素的方法，其特征在于，所述的方法包括将微生物接入包含结合胆红素的体系中，所述的微生物包括权利要求1所述的短促生乳杆菌；
5.权利要求4所述的方...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈俊升，邱远望，邱家亮，陈志鑫，蔡少达，
申请(专利权)人：福建中益制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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