【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中药提取与应用，具体涉及高乌头新碱a及其提取方法与应用。
技术介绍
1、生物体内自由基主要是活性氧(reactive oxygen species，ros)，作为正常代谢产物，在机体中承担着传递细胞信息、攻击入侵异物以及参与产生能量的重要作用。然而，当机体遭受氧化应激或自由基失衡(oxidative stress，os)时，清除自由基的能力会降低(抗氧化酶活性减弱或抗氧化剂浓度降低)，导致体内自由基过剩，进而损伤细胞成分和生物分子。
2、机体内存在着氧化防御系统，包括超氧化物歧化酶(sod)、还原型谷胱甘肽(gsh)和抗氧化营养素等对抗氧化应激反应。氧化与抗氧化之间保持的动态平衡一旦被打破，如机体受到疾病或某些外源性药物和毒物的侵害，自由基便会产生强大的伤害作用，造成生物膜的脂质过氧化损伤，引起酶、氨基酸、蛋白质的氧化破坏，对内脏器官、免疫系统的形态功能产生影响，从而引起机体疾病，甚至死亡。因此，大量抗自由基化合物和药物正被开发中，发现天然抗氧化剂，特别是碱性条件下使用的抗氧化剂越来越受到人们的重视。
3、毛茛科(ranunculaceae)乌头属(aconitum)植物高乌头aconitum sinomontanumnakai，又名“麻布七”，具有祛风除湿、理气止痛及活血消肿等的功效。高乌头中主要化学成分为二萜类生物碱，其具有镇痛、抗心律失常、抗炎、抗风湿、抗癌和抗菌等生物活性。高乌头中的高乌甲素成分具有明显的抗炎和镇痛作用，被广泛运用于中国、巴基斯坦以及其他亚洲国家的传统医药领域。>
4、目前，高乌头根中生物碱的抗氧化活性方面鲜有报道，因此，在中药提取与应用
，若提供一种c18-型二萜生物碱新化合物，并且提供的c18-型二萜生物碱新化合物具有很强的清除自由基的能力，则显得很有必要。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种c18-型二萜生物碱新化合物，该c18-二萜生物碱化合物具有很好的清除自由基的能力，其ic50值为87.2±2.4μg/ml，作为碱性抗氧化剂，可在防晒化妆品和自由基清除相关药物中应用。
2、第一方面，提供高乌头新碱a，所述高乌头新碱a具有如式(i)所示的结构：
3、
4、优选的，所述高乌头新碱a的分子式为c24h39no6，所述高乌头新碱a的分子量为438.2839。
5、第二方面，提供高乌头新碱a的提取方法，所述提取方法包括以下步骤：
6、步骤s1：将高乌头根粉碎，用甲醇溶液回流提取，提取液减压蒸除甲醇，静置并滤除沉积物，得到水悬浮液；
7、优选的，用90％甲醇溶液回流提取3次。
8、步骤s2：将水悬浮液依次用石油醚和乙酸乙酯萃取，萃取液减压浓缩，得到乙酸乙酯浸膏；
9、步骤s3：将乙酸乙酯浸膏进行硅胶柱层析，tlc监测合并得到十二个组分，分别为第一组分、第二组分、第三组分、第四组分、第五组分、第六组分、第七组分、第八组分、第九组分、第十组分、第十一组分和第十二组分；
10、优选的，所述步骤s3中将乙酸乙酯浸膏进行硅胶柱层析的洗脱剂为二氯甲烷与甲醇，所述二氯甲烷与所述甲醇的体积比依次为100:0、98:2、95:5、90:10、85:15、80:20、70:30和60:40。
11、步骤s4：将第七组分进行硅胶柱层析，得到第十三组分、第十四组分、第十五组分、第十六组分和第十七组分；
12、优选的，步骤s4中将第七组分用二氯甲烷、甲醇与氨水体系进行硅胶柱层析梯度洗脱，得到五个组分，分别为第十三组分、第十四组分、第十五组分、第十六组分和第十七组分。
13、更优选的，二氯甲烷、甲醇与氨水体系中二氯甲烷、甲醇与氨水的体积比依次为100:5:1、100:10:1、100:20:1和100:30:1。
14、步骤s5：将第十六组分依次进行葡聚糖凝胶柱除杂、洗脱分离和纯化，得到目标化合物，即为高乌头新碱a。
15、优选的，步骤s5中将第十六组分用二氯甲烷与甲醇体系，sephadex lh-20葡聚糖凝胶柱除杂，正向硅胶柱用乙酸乙酯、乙醇与氨水梯度洗脱分离，用甲醇作为洗脱剂的sephadex lh-20柱进一步纯化制备得到目标化合物，即高乌头新碱a。
16、在本专利技术中，所述高乌头新碱a为c18-型二萜生物碱新化合物。
17、更优选的，二氯甲烷与甲醇体系中二氯甲烷与甲醇的体积比为1:1；乙酸乙酯、乙醇与氨水的体积比依次为20:1:0.1、10:1:0.1和10:2:0.1。
18、第三方面，提供生物碱化合物，所述生物碱化合物包括本专利技术所述的高乌头新碱a。
19、第四方面，提供抗氧化剂，所述抗氧化剂包括本专利技术所述的高乌头新碱a或生物碱化合物。
20、第五方面，提供防晒化妆品，所述防晒化妆品包括安全有效量的如本专利技术所述的高乌头新碱a或生物碱化合物。
21、第六方面，提供自由基清除剂，所述自由基清除剂包括安全有效量的如本专利技术所述的高乌头新碱a或生物碱化合物。
22、第七方面，提供抗衰老药物，所述抗衰老药物包括安全有效量的如本专利技术所述的高乌头新碱a或生物碱化合物。
23、第八方面，提供本专利技术所述的高乌头新碱a或生物碱化合物在制备抗氧化剂或防晒化妆品中的应用。
24、第九方面，提供本专利技术所述的高乌头新碱a或生物碱化合物在制备自由基清除剂或抗衰老药物中的应用。
25、与现有技术相比，本专利技术提供的技术方案至少具备下述的有益效果或优点：
26、本专利技术利用回流提取、有机溶剂萃取、正反相硅胶柱柱层析分离以及sephadexlh-20葡聚糖凝胶纯化等步骤，首次成功从高乌头根中提取分离出c18-二萜生物碱化合物高乌头新碱a。
27、c18-二萜生物碱化合物高乌头新碱a具有较好的抗氧化能力，清除dpph自由基的半数抑制浓度(ic50)值为87.2±2.4μmol/l，与抗坏血酸(ic50值：24.17±4.17μmol/l)的清除能力在同一数量级上。
28、c18-二萜生物碱化合物高乌头新碱a的提取分离简单，可操作性强，作为碱性环境下使用的抗氧化剂具有良好的应用前景，也可应用于防晒化妆品、自由基清除剂或抗衰老药物。
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1.高乌头新碱A，其特征在于，所述高乌头新碱A具有如式(I)所示的结构：
2.高乌头新碱A的提取方法，其特征在于，所述提取方法包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，所述步骤S3中将乙酸乙酯浸膏进行硅胶柱层析的洗脱剂为二氯甲烷与甲醇，所述二氯甲烷与所述甲醇的体积比依次为100:0、98:2、95:5、90:10、85:15、80:20、70:30和60:40。
4.生物碱化合物，其特征在于，所述生物碱化合物包括权利要求1所述的高乌头新碱A。
5.抗氧化剂，其特征在于，所述抗氧化剂包括权利要求1所述的高乌头新碱A或权利要求4所述的生物碱化合物。
6.防晒化妆品，其特征在于，所述防晒化妆品包括安全有效量的如权利要求1所述的高乌头新碱A或权利要求4所述的生物碱化合物。
7.自由基清除剂，其特征在于，所述自由基清除剂包括安全有效量的如权利要求1所述的高乌头新碱A或权利要求4所述的生物碱化合物。
8.抗衰老药物，其特征在于，所述抗衰老药物包括安全有效量的如权利要求1所述的高乌头新碱A或
9.权利要求1所述的高乌头新碱A或权利要求4所述的生物碱化合物在制备抗氧化剂或防晒化妆品中的应用。
10.权利要求1所述的高乌头新碱A或权利要求4所述的生物碱化合物在制备自由基清除剂或抗衰老药物中的应用。
...【技术特征摘要】
1.高乌头新碱a，其特征在于，所述高乌头新碱a具有如式(i)所示的结构：
2.高乌头新碱a的提取方法，其特征在于，所述提取方法包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，所述步骤s3中将乙酸乙酯浸膏进行硅胶柱层析的洗脱剂为二氯甲烷与甲醇，所述二氯甲烷与所述甲醇的体积比依次为100:0、98:2、95:5、90:10、85:15、80:20、70:30和60:40。
4.生物碱化合物，其特征在于，所述生物碱化合物包括权利要求1所述的高乌头新碱a。
5.抗氧化剂，其特征在于，所述抗氧化剂包括权利要求1所述的高乌头新碱a或权利要求4所述的生物碱化合物。
<...【专利技术属性】
技术研发人员：石新卫，周亚福，李斌，路强强，李根，杨璐瑶，
申请(专利权)人：陕西省西安植物园陕西省植物研究所，
类型：发明
国别省市：
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