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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种监测氨基酸及其代谢产物的高效液相色谱分析方法,属于氨基酸及其代谢产物监测领域。
技术介绍
1、工业化生产中,可采用生物代谢的方式生产氨基酸的代谢产物。在上述过程中,对不同时期的生产体系中原料(氨基酸)和产品(氨基酸的代谢产物)的含量进行实时监测,有利于提高生产效率。
2、但是在以半胱氨酸、甲硫氨酸、组氨酸作为原料,采用生物代谢的方式生产氨基酸的代谢产物的过程中,无法实现高效、准确的实时监测。这是由于半胱氨酸、甲硫氨酸、组氨酸存在相互干扰,且在生产氨基酸的代谢产物的过程中,会形成中间代谢产物(肽产物),这些中间代谢产物的种类多、结构复杂,对测定原料(半胱氨酸、甲硫氨酸、组氨酸)和产品(氨基酸的代谢产物)的含量均会造成很大的干扰,使检测结果的准确性低,导致常规的肽分析方法不适用于测定生物代谢过程中原料和产品的含量,进而不利于实现高效、准确的实时监测。
技术实现思路
1、本专利技术提供一种监测氨基酸及其代谢产物的高效液相色谱分析方法,能够同时对半胱氨酸、甲硫氨酸、组氨酸及其代谢产物的含量进行快速、准确地测定,有利于高效、准确地对生物代谢全过程进行实时监测。
2、本专利技术提供一种监测氨基酸及其代谢产物的高效液相色谱分析方法,包括以下步骤:对待测样品进行高效液相色谱分析,获得所述待测样品中目标物的峰面积;其中,所述待测样品包括氨基酸和所述氨基酸的代谢产物,所述氨基酸包括半胱氨酸、甲硫氨酸、组氨酸中的一种或多种,所述目标物为所述氨基酸和所述氨基酸的代
3、可选地,根据所述目标物的峰面积确定所述待测样品中目标物的含量的过程包括:配制含有所述氨基酸和所述氨基酸的代谢产物的标准样品;对所述标准样品进行高效液相色谱分析,获得所述目标物的峰面积,得到所述目标物的峰面积和所述标准样品中所述目标物的含量之间的关系;根据对所述待测样品进行所述高效液相色谱分析获得的所述目标物的峰面积、所述目标物的峰面积和所述标准样品中所述目标物的含量之间的关系,确定所述待测样品中目标物的含量。
4、可选地,对所述标准样品进行所述高效液相色谱分析的过程中,采用第二流动相对所述标准样品进行第二洗脱,所述第二洗脱的过程中,所述第二流动相的流速为0.9~1.2ml/min;所述第二流动相包括所述流动相a和所述流动相b;所述第二流动相中,所述流动相a和所述流动相b的体积比为(3~8):100。
5、可选地,对所述标准样品进行所述高效液相色谱分析的过程中,所述标准样品中的所述目标物的进样质量为0.25~2.5μg。
6、可选地,所述第二洗脱的过程中,采用等度洗脱。
7、可选地,所述第一洗脱的过程中,采用等度洗脱。
8、可选地,所述半胱氨酸在所述待测样品中的浓度为0.40~2.0μg/ml;和/或,所述甲硫氨酸在所述待测样品中的浓度为0.40~2.0μg/ml;和/或,所述组氨酸在所述待测样品中的浓度为0.40~2.0μg/ml。
9、可选地,所述氨基酸的代谢产物包括半胱氨酸代谢产物、甲硫氨酸代谢产物、组氨酸代谢产物中的一种或多种;所述半胱氨酸代谢产物在所述待测样品中的浓度为0.30~1.5μg/ml;和/或,所述甲硫氨酸代谢产物在所述待测样品中的浓度为0.30~1.5μg/ml;和/或,所述组氨酸代谢产物在所述待测样品中的浓度为0.30~1.5μg/ml。
10、可选地,对所述待测样品进行所述高效液相色谱分析的过程中,检测波长为210~260nm。
11、可选地,对所述待测样品进行所述高效液相色谱分析的过程中,采用的色谱柱为aq-c18色谱柱。
12、本专利技术提供一种监测氨基酸及其代谢产物的高效液相色谱分析方法,对待测样品进行高效液相色谱分析,获得的半胱氨酸、甲硫氨酸、组氨酸及其代谢产物的色谱峰的峰形好、分离度大,因而能够同时对半胱氨酸、甲硫氨酸、组氨酸及其代谢产物的含量进行快速、准确地测定,有利于高效、准确地对生物代谢全过程进行实时监测。
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1.一种监测氨基酸及其代谢产物的高效液相色谱分析方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法,其特征在于,根据所述目标物的峰面积确定所述待测样品中目标物的含量的过程包括:
3.根据权利要求2所述的高效液相色谱分析方法,其特征在于,
4.根据权利要求2或3所述的高效液相色谱分析方法,其特征在于,
5.根据权利要求3所述的高效液相色谱分析方法,其特征在于,
6.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法,其特征在于,
7.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法,其特征在于,
8.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法,其特征在于,
9.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法,其特征在于,对所述待测样品进行所述高效液相色谱分析的过程中,检测波长为210~260nm。
10.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法,其特征在于,对所述待测样品进行所述高效液相色谱分析的过程中,采用的色谱柱为AQ-C18色谱柱。
【技术特征摘要】
1.一种监测氨基酸及其代谢产物的高效液相色谱分析方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法,其特征在于,根据所述目标物的峰面积确定所述待测样品中目标物的含量的过程包括:
3.根据权利要求2所述的高效液相色谱分析方法,其特征在于,
4.根据权利要求2或3所述的高效液相色谱分析方法,其特征在于,
5.根据权利要求3所述的高效液相色谱分析方法,其特征在于,
6.根据权利要求1所述的高效液...
【专利技术属性】
技术研发人员:岳光,何勇崴,张葵,
申请(专利权)人:北大医药重庆大新药业股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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