一种叶酸介导靶向的聚合物胶束制造技术

本发明专利技术属药物制剂领域，涉及一种叶酸介导靶向聚合物胶束，尤其是一种包载难溶性抗肿瘤药物的叶酸介导靶向聚合物胶束。本发明专利技术采用一定比例的两种生物相容的叶酸－聚乙二醇－磷脂酰乙醇胺和甲氧基聚乙二醇－磷脂酰乙醇胺材料制成叶酸介导靶向聚合物胶束，其包载有难溶性抗肿瘤药物，使难溶性抗肿瘤药物有效增溶在其所形成的聚合物胶束内，经试验证实，具有特异性靶向抑制肿瘤细胞生长、有效规避了巨噬细胞吞噬的双重优势，为难溶性抗肿瘤药物提供了一种理想的新型药物载体和制剂形式。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属药物制剂领域，涉及一种叶酸介导靶向聚合物胶束，尤其是一种包载难溶性抗肿瘤药物的叶酸介导靶向聚合物胶束。
技术介绍
临床治疗肿瘤的药物，其中的难溶性抗肿瘤药物的给药，特别是注射给药的最大 障碍是药物溶解度低，难于制备合适的制剂，往往需要采取各种增加溶解度的方法，如将药 物制备成盐、加入助溶剂及表面活性剂增溶等。由于相对安全的表面活性剂较容易获得，所 以通过表面活性剂增溶往往成为首选。例如紫杉醇(paclitaxel， PCL)是从红豆杉属植物 紫杉的树干和树皮中提取得到的天然抗癌药，临床上主要用于卵巢癌、乳腺癌及非小细胞 肺癌的治疗，其注射液治疗对顺铂耐药或未控制的卵巢癌亦有效，对食道癌和肺癌也有一 定疗效。PCL难溶于水(〈6mg/L)，不稳定，口服生物利用度差。上市的注射剂所采用的增 溶溶媒聚氧乙烯蓖麻油(Cremophor EL)易产生高敏性、神经毒性、肾毒性、心脏毒性等不良 反应，且在给药过程中能够溶解静脉注射输液管中的增塑剂，加之PCL本身对心脏和肾脏 等组织亦有毒副作用，而限制了 PCL在临床上的应用。同样的情况也出现在喜树碱等抗肿 瘤药物的注射剂中。因此研究开发难溶性抗肿瘤药物载体，对临床治疗有着重要的意义。近 年来，两亲性嵌段共聚物的胶束载药系统引起了广泛的关注。 聚合物胶束作为药物载体发展于20世纪90年代，是由两亲性聚合物在水溶液 中自发形成的一种自组装结构，亲水性片段形成外壳，疏水性片段形成内核，构成独特的 核-壳结构，并将疏水性抗肿瘤药物包载于内核中；亲水性组分多为聚乙二醇(PEG)、聚氧 乙烯(PE0)等；疏水性组分多为聚氧丙烯、聚苯乙烯、聚氨基酸、聚酯等，粒径一般为小于 100nm，具有载药量高、载药范围广、稳定性好、体内滞留时间长以及增加药物的稳定性、提 高生物利用度和降低毒副作用等特点，还可以连接具有特异性识别功能的配基对其表面进 行修饰实现主动靶向给药，使药物有效地到达靶点。近年来，药物靶向传释系统作为治疗肿 瘤和癌症的重要手段之一成为研究重点，既可以改善因抗肿瘤药物选择性不强而导致药物 分布全身各器官的问题，又可以提高药物活性，降低药物毒副作用。 现有技术公开了叶酸(Folic acid)是一种分子结构中含有喋呤环的小分子维生 素(VBn)，在生理条件下很难自由透过细胞膜，必须进行内化才能被人体所吸收。研究发 现两种内化叶酸的机制一是低亲和力的跨膜蛋白，转运四氢叶酸、二氢叶酸(叶酸的还原态)进入细胞内；二是高亲和力的叶酸受体，可吸收叶酸进入细胞内。叶酸受体(FR)是一种糖蛋白膜受体，在某些实体肿瘤细胞膜表面高度表达，而在正常组织低表达，对于叶酸或叶酸的偶联物都有高度的亲和力，因此可介导含有叶酸及其偶联物的载体进入肿瘤细胞内。利用叶酸与叶酸受体特异性结合的特点，将叶酸连接到聚合物胶束表面，使聚合物胶束具有靶向肿瘤细胞的特性，从而提高抗肿瘤药物的生物利用度，降低毒副作用。 然而，叶酸分子过量会导致载药胶束被巨噬细胞吞噬，从而降低靶向肿瘤细胞的作用，降低药效。因此，研制一种可规避巨噬细胞吞噬的叶酸受体靶向纳米胶束作为难溶性抗肿瘤药物的载体，可以改变药物分布，增加药物在体内滞留时间，提高药物的肿瘤组织靶 向性，在肿瘤靶向诊断和治疗中，有着广阔的应用前景。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，提供一种叶酸介导靶向的聚合物胶束，尤其是一种包载难溶 性抗肿瘤药物的叶酸介导靶向聚合物胶束。本专利技术的聚合物胶束为可静脉注射的难溶性抗 肿瘤药物叶酸受体靶向纳米胶束制剂，可有效规避巨噬细胞，延长药物在体内滞留时间，并 具有良好的靶向肿瘤细胞的作用，增加药物在肿瘤组织分布，从而提高疗效，降低毒性。 本专利技术具体公开了叶酸受体靶向纳米胶束的载体材料的合成，以及通过筛选含叶 酸材料在载体中所占比例，使载药胶束具有有效规避巨噬细胞的特点，并包载难溶性抗肿 瘤药物，构建叶酸受体靶向纳米载药胶束给药系统。 本专利技术所述的的叶酸介导靶向的聚合物胶束，由叶酸_聚乙二醇_磷脂酰乙醇胺和甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺材料按o. i : ioo-io : ioo摩尔比形成，其包载有难溶性抗肿瘤药物。 所述的叶酸-聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺和甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺两种 材料中的聚乙二醇分子量为2300-5000，其中的磷脂酰乙醇胺选自二硬脂酸磷脂酰乙醇胺 (DSPE)、氢化豆磷脂乙醇胺(HSPE)、氢化蛋磷脂乙醇胺(HEPE);其中的叶酸-聚乙二醇_磷脂酰乙醇胺与甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺的摩尔比为o. i : ioo-io : ioo，优选摩尔 比为i : ioo。 所包载的难溶性药物选自紫杉烷类药物如紫杉醇、喜树碱类药物如9-硝基喜树碱、嗯环类药物如阿霉素。 本专利技术提供了可静脉注射的难溶性抗肿瘤药物叶酸受体靶向纳米胶束载体材料的制备方法，包括材料分离纯化，及纯度检测方法的建立。 本专利技术提供了可静脉注射的难溶性抗肿瘤药物叶酸受体靶向纳米胶束的制备方 法，包括 1)制备载体材料FA-PEG-DSPE 制备Folate-PEG_NH2 ; 制备Folate-PEG-SUC ; 制备Folate-PEG-DSPE ; 2)制备载体材料MPEG-DSPE ; 3)制备FA-PEG-DSPE/MPEG-DSPE为载体的载药胶束。 本专利技术的叶酸介导靶向的聚合物胶束进行了肿瘤细胞体外实验，实验结果表明， 将FA-PEG-DSPE与MPEG-DSPE按照摩尔比0. 1 : 100-10 : 100混合作为载体，优选摩尔比i : ioo，采用成膜水化法包载难溶性抗肿瘤药物，制成的载药叶酸偶联聚合物胶束，能有效规避巨噬细胞，体外抗肿瘤活性显著高于无叶酸载药胶束以及游离药物。 附图说明 图1显示载体材料FA-PEG-DSPE/MPEG-DSPE高效液相检测图谱。 图2显示载体材料FA-PEG-DSPE/MPEG-DSPE分别对细胞产生毒性结果。 图3显示载体材料的CMC测定结果， 其中，A :MPEG-DSPE ;B :FA-PEG-DSPE。 图4显示为本专利技术中实施例6中流式细胞法结合载药叶酸偶联胶束抑制肿瘤细 胞生长法，筛选胶束载体材料中FA-PEG-DSPE与MPEG-DSPE的最佳比例。具体实施例方式以下借助非限制性实施例进一步描述本专利技术。 实施例1制备载体材料FA-PEG-DSPE 制备Folate-PEG_NH2取30. 9mg(0. 15mmol)DCC溶于5ml 二甲亚砜(DMSO)，力B入300mgNH2-PEG_NH2， 66. 2mg Folate, 10 ill吡啶，25搅拌24h，加入10ml蒸馏水终止反应，离心，取上清液，用 蒸馏水透析，冻干。依次用DEAE S印harose FF离子交换柱和S印hadex G-15柱结合AKTA explorer快速纯化系统进行分离纯化，冻干，得黄色的Folate-PEG_NH2固体154mg。 制备Folate-PEG-SUC取Folate-PEG-NH280. 9mg溶于lml DMF， SUC 23. 8mg溶于lml DMF，混合，50。C反 应，点板检测反应进行。反应4h后加2ml蒸馏水终止反应，用S印hadexG-15柱结本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种叶酸介导靶向的聚合物胶束，其特征在于，由叶酸－聚乙二醇－磷脂酰乙醇胺和甲氧基聚乙二醇－磷脂酰乙醇胺材料按０．１∶１００－１０∶１００摩尔比形成叶酸介导靶向的聚合物胶束，其包载有难溶性抗肿瘤药物。

【技术特征摘要】
一种叶酸介导靶向的聚合物胶束，其特征在于，由叶酸-聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺和甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺材料按0.1∶100-10∶100摩尔比形成叶酸介导靶向的聚合物胶束，其包载有难溶性抗肿瘤药物。2. 根据权利要求i所述的叶酸介导靶向的聚合物胶束，其特征在于，所述叶酸-聚乙二 醇-磷脂酰乙醇胺与甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺的摩尔比为i : ioo。3. 根据权利要求i所述的叶酸介导靶向的聚合物胶束，其特征在于，所述叶酸-聚 乙二醇-磷脂酰乙醇胺和甲氧基聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺材料中的聚乙二醇分子量为2300-...

【专利技术属性】
技术研发人员：陆伟跃，韩雪，刘婧，刘敏，谢操，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]