一种肝素衍生的多糖混合物及其制法和药物组合物制造技术

本发明专利技术涉及一种肝素衍生的多糖混合物及其制法和药物组合物。具体地，本发明专利技术的肝素衍生的多糖混合物是肝素或肝素酯或肝素酯盐的降解产物，并具有以下特性：重均分子量为３１００～４５００道尔顿；抗凝血因子Ｘａ的活性高且抗凝血因子ＩＩａ的活性低。本发明专利技术肝素衍生的多糖混合物的抗血栓性能优异，且副作用低，没有有机碱和硫酸皮肤素等不利成分的残留。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及由肝素衍生的多糖混合物，及其制备方法与含有所述多糖混合物的药物组合物。
技术介绍
肝素是动物(猪或牛)来源的硫酸多糖混合物，由于它们具有良好的抗血栓形成 性质，因而得到了广泛应用，例如制备抗血栓形成药物、治疗心血管疾病的药物、和治疗脑 血管疾病的药物等。 然而，天然肝素有许多缺陷，这些缺陷限制肝素的应用。 一个主要缺陷是肝素用药 过多可致自发性出血，故每次注射前应测定凝血时间。此外，肝素还可引起过敏反应、血小 板减少、骨质疏松和自发性骨折。 肝素钠自发性出血危险很大，临床使用中必须监测凝血时间，这给医生和患者均 带来很大不便。同时，血小板减少和骨质疏松等不良反应也让医生在使用中有所顾忌。因 此，广大医药工作者希望找到一种优化方法，既保留肝素钠的高效抗血栓，又能减少其出血 等不良反应。 科学研究表明，肝素的高抗凝血活性(抗凝血因子IIa活性)可能引起出血，降低 抗IIa活性可降低出血风险。 肝素的高抗凝血因子IIa活性与其分子链的长短即分子大小有关。因此，通过对肝 素的化学降解，可获得低分子肝素，如对肝素酯的进行碱性降解(或解聚)，获得了依诺肝素 钠。临床试验表明，这些降低了抗凝血因子IIa活性的低分子肝素大大降低了肝素的出血等 缺陷。但是，这些产物还具有较高抗凝血因子IIa活性，因此，仍然具有一定的出血等风险。 中国专利CN01814187中公布了 一种低分子量肝素混合物，其平均分子量为 1500 3000道尔顿。然而，该文献的混合物含有大量(至少约35% )分子量过低(如小 于1700道尔顿)因而无抗凝血因子Xa活性的组分。此外，该文献公开了一种制备方法，其 中包括了与苄索氯铵二次成盐以及用胍类有机碱进行降解的步骤。然而，二次成盐会增加 成本，且胍类有机碱易残留于成品中，造成危害。 因此，本领域迫切需要开发既具有优异抗血栓形成性质，且副作用小(如出血风 险低)的肝素产品。
技术实现思路
本专利技术的目的就是提供一种具有优异抗血栓形成性质，且副作用小(如出血风险 低)的肝素产品。 在本专利技术的第一方面，提供了一种肝素衍生的多糖混合物，所述混合物是肝素或 肝素酯或肝素酯盐的降解产物，并且所述混合物具有下述特性 -重均分子量为3100 4500道尔顿； _抗凝血因子Xa的活性为100-150IU/毫克，抗凝血因子IIa的活性为0. 001-10IU/毫克，且抗凝血因子Xa活性与抗凝血因子IIa活性的比值》10 ;-在所述混合物中的构成多糖中，在其一端具有不饱和的4， 5-葡糖醛酸2-0-硫酸酯结构单元；禾口-所述的多糖混合物为碱金属盐或碱土金属盐形式。 在另一优选例中，所述多糖混合物的抗凝血因子Xa活性是125-150IU/毫克。 在另一优选例中，重均分子量是3200 4000道尔顿。 在另一优选例中，所述混合物为钠盐、钾盐、*丐盐或镁盐形式。 在另一优选例中，所述混合物的抗凝血因子IIa活性为0. 01-5IU/毫克。 在另一优选例中，所述混合物的抗凝血因子Xa活性与抗凝血因子I la活性的比值> 20，较佳地^ 25，更佳地^ 30。 在另一优选例中，按下式计，所述混合物中分子量《1700道尔顿的肝素衍生的多糖的含量Y《20% :分子量《1700道尔顿的肝素衍生的多糖的重量Y=- X100% 。肝素衍生的多糖混合物的重量 较佳地，所述的含量Y《15% ;更佳地，所述的含量Y《10%。 在另一优选例中，所述的肝素是来源于牛、猪的肝素，即猪肝素或牛肝素。 在本专利技术的第二方面，提供了本专利技术上述的肝素衍生的多糖混合物的制备方法，包括步骤 (a)在水性溶剂中，在pH 10-14 (更佳地11-13)和碱金属氢氧化物存在下，降解肝素苄酯碱金属盐或碱土金属盐，从而形成降解的肝素衍生的多糖；禾口 (b)从反应体系中分离或纯化出本专利技术所述的肝素衍生的多糖混合物。 在另一优选例中，所述的肝素苄酯碱金属盐或碱土金属盐的酯化度是60_99%，更佳地为70 95%。 在另一优选例中，所述的碱金属氢氧化物为氢氧化钾或氢氧化钠。 在另一优选例中，在降解步骤(a)中，所述碱金属氢氧化物和肝素苄酯碱金属盐或碱土金属盐的重量比为0. 06 0. 2，更佳地为0. 08 0. 15。 在步骤(a)中，反应温度范围在60°C 9(TC，更佳地为70°C 85°C ;反应时间范 围在30分钟 3小时，更佳地为1 3小时。 在另一优选例中，在步骤(b)中还包括对制得的所述的肝素衍生的多糖混合物用 硼氢化钠进行脱色处理。 在本专利技术的第三方面，提供了本专利技术所述的肝素衍生的多糖混合物的用途，它们 被用于(a)制备抗血栓形成药物；(b)制备治疗心血管疾病的药物；或(c)制备治疗脑血管 疾病的药物。 在本专利技术的第四方面，提供了一种药物组合物，它含有作为活性组分的本专利技术上 述的肝素衍生的多糖混合物和药学上可接受的载体。具体实施例方式本专利技术人经过广泛而深入的研究，通过改进肝素衍生多糖混合物的制备方法，采用在特定条件下用无机碱进行降解，并用甲醇使得处于特定重均分子量范围内的衍生多糖 析出，从而首次制备了一种具有优异抗血栓形成性质，且副作用小(如出血风险低)的肝素 产品。本专利技术的肝素衍生的多糖混合物具有以下主要优点(l)无活性成分的含量低；(2) 抗凝血因子Xa的活性高(通常为100-150IU/毫克)且抗凝血因子Ila的活性很低(通常 为0. 001-10IU/毫克)，故抗凝血因子Xa活性与抗凝血因子Ila活性的比值远大于10 (如 20-200或更高)。 如本文所用，术语本专利技术的混合物和本专利技术的肝素衍生的多糖混合物可互 换使用。本专利技术的肝素衍生的多糖混合物可以采用如下方法制备在水性溶剂(如水或水 与醇(如甲醇、乙醇)形成的混合溶剂)中，借助氢氧化钠，对高酯化度的肝素苄酯钠盐进 行降解，从而形成降解的肝素衍生多糖，然后进行分离和/或纯化。 在本专利技术的一个优选例中，所述的制备方法包括步骤 1、将肝素与季铵盐(以苯乙铵盐为佳，例如氯化苄乙氧铵)在惰性溶剂(如水) 中反应形成盐，从而得到肝素苄乙氧铵盐。 肝素与季铵盐(如氯化苄乙氧铵)的重量比约为1 : 4，以1 : 2. 5 2. 8为佳。 其中，反应温度和时间没有特别限制，通常反应温度可以为4°c -e(TC，较佳地为10-50°C ;反应时间通常为5分钟-24小时。 2、在惰性溶剂(如二氯甲烷)中，将肝素铵盐(如肝素苄乙氧铵盐)与苄基氯反应 形成肝素酯。通常所形成的肝素酯的酯化度为60% 99%，优选地75% 95%。在形成 肝素酯后，可进一步与醋酸碱金属盐(如醋酸钠)的甲醇溶液反应，形成肝素酯碱金属盐。 其中，酯化反应的温度和时间没有特别限制，通常反应温度可以为15-60°C ;反应 时间通常为30分钟-72小时。 一种特别优选的肝素酯是肝素苄酯。 形成肝素酯碱金属盐的反应温度和时间没有特别限制，通常反应温度可以为 15-6(TC;反应时间通常为15分钟-24小时。 一种特别优选的肝素酯碱金属盐是肝素苄酯钠。 在一具体实施例中，为得到范围为60% 99%的酯化度，在3-5份体积的氯溶剂 中，用每1份重量肝素苄乙氧铵盐约与1 1. 5份体积的苄基氯是特别有利的，在温度为 2本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种肝素衍生的多糖混合物，所述混合物是肝素或肝素酯或肝素酯盐的降解产物，其特征在于，所述混合物具有下述特性：－重均分子量为３１００～４５００道尔顿；－抗凝血因子Ⅹａ的活性为１００－１５０ＩＵ／毫克，抗凝血因子Ⅱａ的活性为０．００１－１０ＩＵ／毫克，且抗凝血因子Ⅹａ活性与抗凝血因子Ⅱａ活性的比值≥１０；－在所述混合物中的构成多糖中，在其一端具有不饱和的４，５－葡糖醛酸２－Ｏ－硫酸酯结构单元；和－所述的多糖混合物为碱金属盐或碱土金属盐形式。

【技术特征摘要】
一种肝素衍生的多糖混合物，所述混合物是肝素或肝素酯或肝素酯盐的降解产物，其特征在于，所述混合物具有下述特性-重均分子量为3100～4500道尔顿；-抗凝血因子Xa的活性为100-150IU/毫克，抗凝血因子IIa的活性为0.001-10IU/毫克，且抗凝血因子Xa活性与抗凝血因子IIa活性的比值≥10；-在所述混合物中的构成多糖中，在其一端具有不饱和的4，5-葡糖醛酸2-O-硫酸酯结构单元；和-所述的多糖混合物为碱金属盐或碱土金属盐形式。2. 如权利要求1所述的多糖混合物，其特征在于，所述多糖混合物的抗凝血因子Xa活 性是125-150IU/毫克，和/或重均分子量是3200 4000道尔顿。3. 如权利要求1所述的多糖混合物，其特征在于，所述混合物为钠盐、钾盐、钙盐或镁 盐形式。4. 如权利要求l所述的多糖混合物，其特征在于，所述混合物的抗凝血因子IIa活性为 0. 01-5IU/毫克。5. 如权利要求1所述的多糖混合物，其特征在于，所述混合物的抗凝血因子Xa活性与 抗凝血因子IIa活性的比值^ 20，较佳地^ 25，更佳...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐学明，
申请(专利权)人：上海喜恩医药科技发展有限公司，上海医药工业研究院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]