【技术实现步骤摘要】
：本专利技术属于生物工程，具体涉及一种异丁醇的高产菌株wyh-1，及其在生产过程中的应用。
技术介绍
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技术介绍
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1、异丁醇(2-methyl-1-propanol)是一种无色易燃，有特殊气味的有机化合物。其异构体为正丁醇、仲丁醇和叔丁醇。在自然界，异丁醇能通过碳水化合物的自然发酵得到，也可以作为有机质降解过程中的一个副产品。工业上从丙烯的羰基合成得到正、异丁醛，再加氢、分离产物便得到异丁醇。
2、异丁醇在化工业上占有重要地位，不仅可作为重要的药物前体、多种化学品的中间体，同时由于可再生性和化学稳定性，也被用作生物燃料的重要原料。在当前双碳政策背景下，随着清洁能源和可替代能源的需求上升，以及工业领域对环保型、低挥发性的溶剂的需求，未来异丁醇的市场将不断扩大。
3、传统化学合成异丁醇采用异丁醇丙烯羰基合成法。高压羰基合成技术由于选择性较差、丙烷和高沸物等副产品较多,已被以铑为催化剂的低压羰基合成技术所取代。当前的工业生产高度依赖石油产业，存在环境污染严重、且价格波动大，规模受到限制等问题。与此同时，当利用细胞工厂进行异丁醇发酵生产时，若发酵液中丁醇浓度达13-14g/l，菌体的生长会受到抑制作用，从而导致发酵结束时产物浓度极低。因此，筛选出高丁醇耐受性的优良菌株是解决此现象的有效方法之一。
4、本专利技术利用bmor生物传感器从artp诱变库中筛选得到异丁醇高产菌株，为使用生物法规模化生产异丁醇提供了一条有效途径。
技术实现思路
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1、本专利技术旨在提供一种可以生产高浓度异丁醇菌株，利用bmor生物传感器从artp诱变库中筛选出来，最后通过发酵罐试验，发酵100小时后异丁醇浓度达到70-80g/l。
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1.一株高产异丁醇的WYH-1菌株，为大肠杆菌JCL16突变体，包含从丙酮酸到2-酮异戊酸的基因alsS，ilvC和ilvD以及从2-酮异戊酸到异丁醇基因Kivd和AdhA。
2.根据权利要求1所述的一株高产异丁醇的WYH-1菌株，其特征在于：
3.根据权利要求2中所述的一株高产异丁醇的WYH-1菌株，其特征在于按照以下步骤获得：
4.根据权利要求3所述的一株高产异丁醇的WYH-1菌株，其特征在于步骤(4)中使用的发酵培养基组成为：40g/L葡萄糖，3g/L(NH4)2SO4，14.6g/L K2HPO4，4g/L KH2PO4，2.2g/L柠檬酸钠，8g/L酵母提取物，1.25g/L MgSO4·7H2O，0.1g/L Amp，0.05g/L Kana，0.025g/LCm和1mL/L包含14.1g/L EDTA，2.5g/L CoCl2·6H2O,15g/L MnCl2·4H2O，1.5g/L CuCl2·2H2O，3g/L H3BO3,，2.1g/LNa2MoO4·2H2O，33.8g/L Zn(CH3COO)2·2H2O和80g/L F
5.根据权利要求3所述的一株高产异丁醇的WYH-1菌株，其特征在于步骤(4)中5L发酵罐发酵所需的种子液需要进行以下处理：首先活化菌株WYH-1后，接种于5mL LB培养基，过夜培养后，接种1mL一级种子液到100mL LB中，在37℃，220rpm培养2到3小时，使其OD600达到0.8左右，接种50mL种子液到2L培养基中。
6.根据权利要求3所述的一株高产异丁醇的WYH-1菌株，其特征在于步骤(4)中发酵过程如下：接种种子液后，设置温度为37℃，转速为800rpm发酵2小时，之后接种入终浓度0.1mM的IPTG(，并将温度调至30℃，转速调至600rpm，且需全程维持pH为6.8，并使葡萄糖浓度维持在5g/L以上。
...【技术特征摘要】
1.一株高产异丁醇的wyh-1菌株，为大肠杆菌jcl16突变体，包含从丙酮酸到2-酮异戊酸的基因alss，ilvc和ilvd以及从2-酮异戊酸到异丁醇基因kivd和adha。
2.根据权利要求1所述的一株高产异丁醇的wyh-1菌株，其特征在于：
3.根据权利要求2中所述的一株高产异丁醇的wyh-1菌株，其特征在于按照以下步骤获得：
4.根据权利要求3所述的一株高产异丁醇的wyh-1菌株，其特征在于步骤(4)中使用的发酵培养基组成为：40g/l葡萄糖，3g/l(nh4)2so4，14.6g/l k2hpo4，4g/l kh2po4，2.2g/l柠檬酸钠，8g/l酵母提取物，1.25g/l mgso4·7h2o，0.1g/l amp，0.05g/l kana，0.025g/lcm和1ml/l包含14.1g/l edta，2.5g/l cocl2·6h2o,15g/l mncl2·4h2o，1.5g/...
【专利技术属性】
技术研发人员：王雨涵，侯真，霍毅欣，陈振娅，
申请(专利权)人：北京理工大学，
类型：发明
国别省市：
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