【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及基因工程领域，具体涉及一种塑料老化情况及健康风险的生物检测方法。
技术介绍
1、原始完整塑料由于相对坚固和其较强的疏水性，聚合物以及化学添加剂相对稳定，使用相对安全，但是塑料在长期使用和老化过程中，比如接触紫外光照消毒、高温加热、盛放高油脂食物等，塑料的表面结构和环境行为发生改变，使得塑料裂解成微塑料颗粒以及塑料基质中的添加剂及老化反应副产物等有害化学物质释放迁移。这些物质可以直接通过消化道进入人体，通过循环系统抵达不同的脏器，继而诱发多种疾病风险。
2、当前对于塑料老化及其健康风险评价，现有技术大多采用物理或化学方法，例如通过显微镜以及电子显微镜直接观察老化塑料表面颜色、裂纹、微塑料颗粒生成等物理变化，或者利用质谱、光谱以及能谱表征老化后塑料聚合物化学结构的改变以及塑料添加剂及老化反应副产物等有害化学物质释放情况。物理学颜色变化观察仅适用于透明塑料，而添加有着色剂的塑料很难通过颜色变化辨别塑料老化情况，此外，电子显微镜观察塑料老化裂纹以及微塑料生成观察，前处理过程较复杂，通常需要采用贵金属金或铂进行导电涂层处理也增加了技术成本。化学质谱、光谱以及能谱的塑料聚合物化学结构变化以及有害化学物质释放和鉴定对评估塑料老化具有很好的参考价值，但是对仪器设备要求比较高，对检测人员专业要求高、仪器成本大，一般实验室通常较难开展。尤为重要的是物理和化学方法仅从塑料的物理形状和化学成分层面表征塑料老化情况，从而间接评估老化塑料的潜在生物健康风险。
技术实现思路
1、针对现
2、为达到上述专利技术目的，本专利技术所采用的技术方案为：
3、提供一种塑料老化情况的生物检测方法，其包括如下步骤：
4、s1：使用待检测塑料对正常肝细胞暴露处理48h，得到受损肝细胞；
5、s2：对受损肝细胞使用trizol法提取得到rna并逆转录得到cdna；
6、s3：对cdna进行pcr检测并根据相对定量法得到hmox-1基因表达量；根据hmox-1基因表达量判断塑料老化程度，hmox-1基因表达量与塑料老化程度呈正比。
7、进一步的，所述步骤s1中暴露处理包括原位暴露和培养液浸提暴露；
8、所述原位处理的具体步骤为：将肝细胞接种在待检测塑料片上，将待检测塑料片和肝细胞放入培养皿中培养；
9、所述培养液浸提暴露的具体步骤为：将待检测塑料裁剪为碎片，将碎片浸入培养液后在100rpm下摇晃浸提30min得到浸提液，将浸提液加入接种有肝细胞的培养皿中。
10、进一步的，所述步骤s3中pcr检测的上游引物的序列为：agggtgacagaagaggctaa；pcr检测的下游引物的序列为：gtcaggtatctccctccatt。
11、进一步的，所述pcr检测的反应程序为：
12、95℃10min→{95℃15s→60℃30s}×45→4℃。
13、一种塑料老化健康风险的生物检测方法，具体步骤为：
14、a1：采样动物体的肝细胞样本；
15、a2：将肝细胞样本使用trizol法提取得到rna并逆转录得到cdna；
16、a3：对cdna进行pcr检测并根据相对定量法得到hmox-1基因表达量；根据hmox-1基因表达量判断动物体受老化塑料损伤程度。
17、本专利技术的有益效果为：
18、本专利技术通过使用肝细胞暴露于待检测塑料，使肝细胞受损，检测受损肝细胞的生物标志物hmox-1基因的表达量，由hmox-1基因表达量大小能够有效判断塑料老火情况，从而实现对老化塑料的生物检测方法。
19、通过采集动物体的肝细胞，对hmox-1基因表达量的体外检测，还能够实现对动物体受老化塑料的损伤影响进行检测判断，从而帮助确定动物体的健康情况，进一步为动物体的生存环境检测提供支持。
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1.一种塑料老化情况的生物检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的塑料老化情况的生物检测方法，其特征在于，所述步骤S1中暴露处理包括老化塑料原位暴露和培养液浸提暴露；
3.根据权利要求1所述的塑料老化情况的生物检测方法，其特征在于，所述步骤S3中PCR检测的上游引物的序列为：AGGGTGACAGAAGAGGCTAA；PCR检测的下游引物的序列为：GTCAGGTATCTCCCTCCATT。
4.根据权利要求3所述的塑料老化情况的生物检测方法，其特征在于，所述PCR检测的反应程序为：
5.一种塑料老化健康风险的生物检测方法，其特征在于，通过分子生物学技术评估动物体肝脏受老化塑料损伤程度具体步骤为：
【技术特征摘要】
1.一种塑料老化情况的生物检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的塑料老化情况的生物检测方法，其特征在于，所述步骤s1中暴露处理包括老化塑料原位暴露和培养液浸提暴露；
3.根据权利要求1所述的塑料老化情况的生物检测方法，其特征在于，所述步骤s3中pcr检测的上游引物的序列为：agggtga...
【专利技术属性】
技术研发人员：田美平，苏博文，黄清育，
申请(专利权)人：中国科学院城市环境研究所，
类型：发明
国别省市：
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