【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及酶催化，具体涉及一种l-天冬氨酸α-脱羧酶突变体催化l-高丝氨酸合成3-氨基丙醇的方法。
技术介绍
1、l-天冬氨酸α-脱羧酶(pand)能够特异性催化l-天冬氨酸脱羧生产β-丙氨酸，是生物合成β-丙氨酸、泛酸、肌肽等化合物的关键酶。酶法合成因其更加绿色、高效、可持续，是目前多种化合物合成的主流方法。
2、目前普遍使用的是谷氨酸棒杆菌和枯草芽孢杆菌来源的l-天冬氨酸α-脱羧酶，但这两种来源的酶合成β-丙氨酸或其它产物(3-氨基丙醇)的瓶颈是较低的酶活。
技术实现思路
1、为解决这一问题，本专利技术对l-天冬氨酸α-脱羧酶进行半理性设计，提升新酶的对不同底物(l-高丝氨酸)的催化性能。
2、本专利技术的目的在于提供一种l-天冬氨酸α-脱羧酶突变体，其是在l-天冬氨酸α-脱羧酶pand的氨基酸序列的第54位氨基酸残基突变为x后获得；所述l-天冬氨酸α-脱羧酶pand的氨基酸序列如序列表seq id no.1所示。
3、进一步地，在所述的第54位氨基酸残基突变为x的基础上，在第3位氨基酸残基突变为k后获得。
4、进一步地，在所述的第54位氨基酸残基突变为x的基础上，在第88位氨基酸残基突变为m后获得。
5、进一步地，在所述的第54位氨基酸残基突变为x的基础上，在第26位氨基酸残基突变为v后获得。
6、进一步地，在所述的第54位氨基酸残基突变为x和在第3位氨基酸残基突变为k的基础上，在第88位氨基酸残基突
7、进一步地，在所述的第54位氨基酸残基突变为x和在第3位氨基酸残基突变为k的基础上，在第26位氨基酸残基突变为v后获得。
8、进一步地，在所述的第54位氨基酸残基突变为x、在第3位氨基酸残基突变为k和在第26位氨基酸残基突变为v的基础上，在第88位氨基酸残基突变为m后获得。
9、进一步地，在所述的第54位氨基酸残基突变为x和在第26位氨基酸残基突变为v的基础上，在第88位氨基酸残基突变为m后获得。
10、本专利技术还提供了所述的l-天冬氨酸α-脱羧酶突变体在催化l-高丝氨酸产3-氨基丙醇中的应用。
11、进一步地，所述催化的条件为：ph为6.5-7.0、温度为37℃。
12、本专利技术采用l-高丝氨酸为底物，经l-天冬氨酸α-脱羧酶突变体脱羧后合成3-氨基丙醇(图1所示)。与现有的化学合成方法相比，本专利技术方法具有绿色环保、成本低等优势。
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1.L-天冬氨酸α-脱羧酶突变体，其是在L-天冬氨酸α-脱羧酶panD的氨基酸序列的第54位氨基酸残基突变为X后获得；
2.依据权利要求1所述的L-天冬氨酸α-脱羧酶突变体，其特征在于，在所述的第54位氨基酸残基突变为X的基础上，在第3位氨基酸残基突变为K后获得。
3.依据权利要求1所述的L-天冬氨酸α-脱羧酶突变体，其特征在于，在所述的第54位氨基酸残基突变为X的基础上，在第88位氨基酸残基突变为M后获得。
4.依据权利要求1所述的L-天冬氨酸α-脱羧酶突变体，其特征在于，在所述的第54位氨基酸残基突变为X的基础上，在第26位氨基酸残基突变为V后获得。
5.依据权利要求2所述的L-天冬氨酸α-脱羧酶突变体，其特征在于，在所述的第54位氨基酸残基突变为X和在第3位氨基酸残基突变为K的基础上，在第88位氨基酸残基突变为M后获得。
6.依据权利要求2所述的L-天冬氨酸α-脱羧酶突变体，其特征在于，在所述的第54位氨基酸残基突变为X和在第3位氨基酸残基突变为K的基础上，在第26位氨基酸残基突变为V后获得。
7.依据
8.依据权利要求4所述的L-天冬氨酸α-脱羧酶突变体，其特征在于，在所述的第54位氨基酸残基突变为X和在第26位氨基酸残基突变为V的基础上，在第88位氨基酸残基突变为M后获得。
9.依据权利要求1至8中任一所述的L-天冬氨酸α-脱羧酶突变体在催化L-高丝氨酸产3-氨基丙醇中的应用。
10.依据权利要求9所述的L-天冬氨酸α-脱羧酶突变体在催化L-高丝氨酸产3-氨基丙醇中的应用，其特征在于，所述催化的条件为：pH为6.5-7.0、温度为37℃。
...【技术特征摘要】
1.l-天冬氨酸α-脱羧酶突变体，其是在l-天冬氨酸α-脱羧酶pand的氨基酸序列的第54位氨基酸残基突变为x后获得；
2.依据权利要求1所述的l-天冬氨酸α-脱羧酶突变体，其特征在于，在所述的第54位氨基酸残基突变为x的基础上，在第3位氨基酸残基突变为k后获得。
3.依据权利要求1所述的l-天冬氨酸α-脱羧酶突变体，其特征在于，在所述的第54位氨基酸残基突变为x的基础上，在第88位氨基酸残基突变为m后获得。
4.依据权利要求1所述的l-天冬氨酸α-脱羧酶突变体，其特征在于，在所述的第54位氨基酸残基突变为x的基础上，在第26位氨基酸残基突变为v后获得。
5.依据权利要求2所述的l-天冬氨酸α-脱羧酶突变体，其特征在于，在所述的第54位氨基酸残基突变为x和在第3位氨基酸残基突变为k的基础上，在第88位氨基酸残基突变为m后获得。
6.依据权利要求2所述的l-天冬氨酸α-...
【专利技术属性】
技术研发人员：郑棚，于波，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：
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