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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物技术和遗传育种,具体涉及lcimt基因在番茄中的应用。
技术介绍
1、荔枝(litchi chinensis sonn.)是无患子科、荔枝属常绿乔木。荔枝中含有丰富的白坚木皮醇(quebrachitol,2-o-methy l-chiro-inositol),在植株各个组织器官系统性分布。白坚木皮醇在叶片、种子和果皮中含量较高,荔枝叶片和种子内白坚木皮醇含量高达10mg·g-1(fw),果肉内含量最低,仅为1.6±0.14mg·g-1(fw)。
2、白坚木皮醇是荔枝主要的光合产物,也是维持荔枝叶片渗透势的重要组分。目前在植物中发现6种肌醇甲醚类物质,分别是白坚木皮醇(quebrachitol)、l-无患子醇(l-bornesitol)、d-无患子醇(d-bornesitol)、红杉醇(sequoyitol)、d-松醇(d-pinitol)和d-芒柄醇(d-ononitol)。在含有肌醇甲醚类物质的植物内,肌醇甲醚能作为重要的渗透调节物质,在植物受到渗透胁迫时发挥重要作用。如大豆遭受干旱胁迫时,d-松醇的含量会显著上升,其浓度甚至比脯氨酸的浓度还高。在盐生植物冰叶日中花内发现大量的d-松醇,冰叶日中花能在含盐土壤生长可能与其积累d-松醇有关。同样的,在研究盐生稻porteresiacoarctata在高盐胁迫下肌醇类物质变化的时候,发现高盐胁迫下肌肌醇的含量会显著下降,而d-松醇的含量则显著上升,这些证据证明d-松醇能参与植物渗透调控。无患子醇和白坚木皮醇也能参与植物的渗透调控,在橡胶树中利用13co
3、目前只有15个科57种植物内检测出白坚木皮醇,不同植物中白坚木皮醇含量有较大差异,荔枝和龙眼叶片中含有大量的白坚木皮醇,荔枝叶片中高达10mg·g-1(fw),山龙眼科中的邦克希木(banksia grandis)叶片中含量较低,仅含有0.1mg·g-1(fw)左右。
4、imt(肌醇甲基转移酶)基因是一类合成肌醇甲醚的基因。荔枝中的肌醇甲基转移酶能以sam(s-腺苷蛋氨酸)为甲基供体合成无患子醇,无患子醇随后在另外两种异构酶的作用下合成白坚木皮醇。目前荔枝中的lcimt基因已被鉴定,但无患子醇在其他植物中的功能仍未进行相关开发和研究。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于避免现有技术中的不足之处而提供一种lcimt基因在番茄中的应用,该lcimt基因在番茄中应用,能够有效提高了番茄中无患子醇含量,提高番茄性能。
2、本专利技术提供以下技术方案:
3、提供lcimt基因在番茄中的应用,所述番茄包含编码无患子醇蛋白质的lcimt基因,所述lcimt基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
4、在一些实施方式中,所述lcimt基因源自荔枝。
5、提供lcimt基因在提升番茄抗旱能力中的应用,所述lcimt基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
6、提供lcimt基因在番茄中应用的方法,包括以下步骤:
7、s1、以下列引物从妃子笑荔枝叶片cdna中扩增得到lcimt基因,得到pcr产物,所述引物序列如下:
8、上游引物:5'-gccatggctgatatcggatccatgggatcggtagaagaagagagg-3';
9、下游引物:5'-ggtggtgctcgagtgcggccgctcactgtggataggcctcaataacg-3';
10、对pcr产物进行胶回收纯化;
11、s2、使用ecorⅰ和xhoⅰ对psk277过表达载体进行双酶切,得到同源重组酶对酶切载体;
12、s3、利用同源重组酶对酶切载体和纯化pcr产物进行连接后转入dh5α大肠杆菌感受态后涂板孵育,挑取单克隆测序,将测序正确的载体转入gv3101农杆菌感受态涂板孵育,挑取单克隆保留菌液pcr有条带的克隆备用,得到lcimt基因;
13、s4、将lcimt基因转至番茄,得到转lcimt基因番茄。
14、本专利技术lcimt基因在番茄中的应用的有益效果:
15、本专利技术将lcimt基因转至番茄中,imt(肌醇甲基转移酶)基因是一类合成肌醇甲醚的基因。lcimt基因产生的肌醇甲基转移酶能以sam(s-腺苷蛋氨酸)为甲基供体合成无患子醇,无患子醇随后在异构酶的作用下合成白坚木皮醇,促进番茄叶片渗透势的调控;并且,提升番茄中的无患子醇能提升番茄的抗旱能力以及其他性能,利于进一步地优化番茄的性能。
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1.LcIMT基因在番茄中的应用,其特征在于,所述番茄包含编码无患子醇蛋白质的LcIMT基因,所述LcIMT基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求2所述的LcIMT基因在番茄中的应用,其特征在于,所述LcIMT基因源自荔枝。
3.LcIMT基因在提升番茄抗旱能力中的应用,其特征在于,所述LcIMT基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
4.LcIMT基因在番茄中应用的方法,其特征在于,包括以下步骤:
【技术特征摘要】
1.lcimt基因在番茄中的应用,其特征在于,所述番茄包含编码无患子醇蛋白质的lcimt基因,所述lcimt基因的核苷酸序列如seq id no.1所示。
2.根据权利要求2所述的lcimt基因在番茄中的应用,其特征在于,所...
【专利技术属性】
技术研发人员:王惠聪,黄亮亮,黄旭明,曾仁芳,陈玉娇,
申请(专利权)人:华南农业大学,
类型:发明
国别省市:
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