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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及化学发光检测,尤其涉及一种光激微球及其制备方法。
技术介绍
1、均相光激化学发光是一种新型的检测技术,其主要原理是带有感光物质的供体球在激光照射下产生单线态氧,在有待测物存在时,供、受体试剂和待测物发生免疫反应形成复合物而相互靠近,供体球释放的单线态氧和受体球上的染料发生一系列能量传递而产生检测信号。均相光激化学发光技术的优势在于均相免洗,这大大简化了反应步骤,降低了仪器成本。
2、实现均相免洗的关键在于供、受体球在没有待测物存在时由非特异吸附产生的本底信号要尽可能低,才能实现检测的高灵敏度。在现有技术中,往往通过溶胀法将感光物质和发光物质分别溶胀进聚苯乙烯基材中形成供、受体微球,然后在微球表面修饰一层或多层葡聚糖水凝胶来降低微球的非特异吸附。然而,由于感光物质和发光物质分布在载体微球内部,表面葡聚糖层的修饰往往会使供、受体球之间的距离增大,导致微球之间能量传递效率降低、化学发光信号减弱,从而影响检测的灵敏度。
技术实现思路
1、本专利技术要解决的技术问题在于,提供一种将感光物质和发光物质分别负载在供、受体微球表面,提高供、受体微球之间能量传递效率,提高化学发光信号的光激微球及其制备方法。
2、本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是:提供一种光激微球,包括供体微球和受体微球;
3、所述供体微球包括第一疏水聚合物载体微球、第一两亲性聚合物配体以及脂溶性的感光物质;所述第一两亲性聚合物配体修饰在所述第一疏水聚合物载体微球表面,并且所
4、所述受体微球包括第二疏水聚合物载体微球、第二两亲性聚合物配体以及脂溶性的发光物质;所述第二两亲性聚合物配体修饰在所述第二疏水聚合物载体微球表面,并且所述第二两亲性聚合物配体的疏水端和所述第二疏水聚合物载体微球表面形成第二疏水空腔,所述发光物质通过疏水作用结合在所述第二疏水空腔内。
5、优选地,所述第一疏水聚合物载体微球和所述第二疏水聚合物载体微球的材料分别选自聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚丙烯、聚乙烯-甲基丙烯酸甲酯中至少一种。
6、优选地,所述第一两亲性聚合物配体和所述第二两亲性聚合物配体分别选自磷脂分子、聚丙烯酸-油胺、聚马来酸酐十八烯、聚丙烯酸十六胺、聚乙烯醇-磷脂酰乙醇胺或其它人工合成带有不同基团的两亲性嵌段聚合物。
7、优选地,所述第一疏水聚合物载体微球和所述第二疏水聚合物载体微球的粒径分别为20nm~350nm。
8、优选地,所述感光物质包括亚甲基蓝、玫瑰红、卟啉、酞菁及其衍生物中的一种或多种。
9、优选地,所述发光物质包括能量传递物质和化学发光物质;所述能量传递物质包括二甲基噻吩、8-巯基喹啉、双二丁酮化合物、氧硫杂环己烯、烯醇醚、芳基乙醚烯及其衍生物中的一种;所述化学发光物质包括稀土金属或viii族金属螯合物。
10、优选地,所述第一两亲性聚合物配体的亲水端位于所述第一疏水聚合物载体微球的最外层,所述第二两亲性聚合物配体的亲水端位于所述第二疏水聚合物载体微球的最外层。
11、优选地,所述供体微球还包括封装在所述第一两亲性聚合物配体的亲水端上的peg或者葡聚糖,所述受体微球还包括封装在所述第二两亲性聚合物配体的亲水端上的peg或者葡聚糖。
12、本专利技术还提供一种光激微球的制备方法,包括供体微球的制备和受体微球的制备;所述供体微球的制备包括以下步骤:
13、s1.1、在第一疏水聚合物载体微球的表面修饰第一两亲性聚合物配体,所述第一两亲性聚合物配体的疏水端和所述第一疏水聚合物载体微球表面形成第一疏水空腔;
14、s1.2、将脂溶性的感光物质通过疏水作用结合在所述第一疏水空腔内,形成供体微球;
15、s1.3、对所述第一两亲性聚合物配体的亲水端进行封装,降低所述第一疏水聚合物载体微球表面的非特异吸附;
16、所述受体微球的制备包括以下步骤:
17、s2.1、在第二疏水聚合物载体微球的表面修饰第二两亲性聚合物配体,所述第二两亲性聚合物配体的疏水端和所述第二疏水聚合物载体微球表面形成第二疏水空腔;
18、s2.2、将脂溶性的发光物质通过疏水作用结合在所述第二疏水空腔内,形成受体微球;
19、s2.3、对所述第二两亲性聚合物配体的亲水端进行封装,降低所述第二疏水聚合物载体微球表面的非特异吸附。
20、优选地,步骤s1.1中,所述第一两亲性聚合物配体通过偶联法或者吸附法修饰在所述第一疏水聚合物载体微球的表面;修饰后的第一疏水聚合物载体微球最外层为所述第一两亲性聚合物配体的亲水端。
21、优选地,步骤s2.1中,所述第二两亲性聚合物配体通过偶联法或者吸附法修饰在所述第二疏水聚合物载体微球的表面;修饰后的第二疏水聚合物载体微球最外层为所述第二两亲性聚合物配体的亲水端。
22、优选地,步骤s1.2包括以下步骤:
23、s1.2.1、将修饰后的第一疏水聚合物载体微球分散在水中,形成第一微球混合液;
24、s1.2.2、将脂溶性的感光物质分散在有机溶剂中,形成感光混合液;
25、s1.2.3、将所述感光混合液和所述第一微球混合液混合,超声反应;
26、s1.2.4、反应结束后用水离心洗涤,得到负载了感光物质的供体微球。
27、优选地,步骤s2.2包括以下步骤:
28、s2.2.1、将修饰后的第二疏水聚合物载体微球分散在水中,形成第二微球混合液;
29、s2.2.2、将脂溶性的发光物质分散在有机溶剂中,形成发光混合液;
30、s2.2.3、将所述发光混合液和所述第二微球混合液混合,超声反应;
31、s2.2.4、反应结束后用水离心洗涤,得到负载了发光物质的受体微球。
32、优选地,步骤s1.3和步骤s2.3中,分别采用peg或者葡聚糖对所述第一两亲性聚合物配体和所述第二两亲性聚合物配体的亲水端进行封装;
33、优选地,所述peg的分子量为1000da~10000da;所述peg的活性基团为羟基、羧基、酰胺基、氨基、醛基、磺酸基中的一种。
34、优选地,所述第一疏水聚合物载体微球和所述第二疏水聚合物载体微球的材料分别选自聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚丙烯、聚乙烯-甲基丙烯酸甲酯中至少一种。
35、优选地,所述第一两亲性聚合物配体和所述第二两亲性聚合物配体分别选自磷脂分子、聚丙烯酸-油胺、聚马来酸酐十八烯、聚丙烯酸十六胺、聚乙烯醇-磷脂酰乙醇胺或其它人工合成带有不同基团的两亲性嵌段聚合物。
36、优选地,所述感光物质包括亚甲基蓝、玫瑰红、卟啉、酞菁及其衍生物中的一种或多种。
37、优选地,所述发光物质包括能量传递物质和化学发光本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种光激微球,其特征在于,包括供体微球和受体微球;
2.根据权利要求1所述的光激微球,其特征在于,所述第一疏水聚合物载体微球和所述第二疏水聚合物载体微球的材料分别选自聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚丙烯、聚乙烯-甲基丙烯酸甲酯中至少一种;
3.根据权利要求1所述的光激微球,其特征在于,所述第一疏水聚合物载体微球和所述第二疏水聚合物载体微球的粒径分别为20nm~350nm。
4.根据权利要求1所述的光激微球,其特征在于,所述感光物质包括亚甲基蓝、玫瑰红、卟啉、酞菁及其衍生物中的一种或多种;
5.根据权利要求1-4任一项所述的光激微球,其特征在于,所述第一两亲性聚合物配体的亲水端位于所述第一疏水聚合物载体微球的最外层,所述第二两亲性聚合物配体的亲水端位于所述第二疏水聚合物载体微球的最外层;
6.一种光激微球的制备方法,其特征在于,包括供体微球的制备和受体微球的制备;所述供体微球的制备包括以下步骤:
7.根据权利要求6所述的光激微球的制备方法,其特征在于,步骤S1.1中,所述第一两亲性聚合物配体通过偶联法或者吸附
8.根据权利要求6所述的光激微球的制备方法,其特征在于,步骤S1.2包括以下步骤:
9.根据权利要求6所述的光激微球的制备方法,其特征在于,步骤S1.3和步骤S2.3中,分别采用PEG或者葡聚糖对所述第一两亲性聚合物配体和所述第二两亲性聚合物配体的亲水端进行封装;
10.根据权利要求6-9任一项所述的光激微球的制备方法,其特征在于,所述第一疏水聚合物载体微球和所述第二疏水聚合物载体微球的材料分别选自聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚丙烯、聚乙烯-甲基丙烯酸甲酯中至少一种;
...【技术特征摘要】
1.一种光激微球,其特征在于,包括供体微球和受体微球;
2.根据权利要求1所述的光激微球,其特征在于,所述第一疏水聚合物载体微球和所述第二疏水聚合物载体微球的材料分别选自聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚丙烯、聚乙烯-甲基丙烯酸甲酯中至少一种;
3.根据权利要求1所述的光激微球,其特征在于,所述第一疏水聚合物载体微球和所述第二疏水聚合物载体微球的粒径分别为20nm~350nm。
4.根据权利要求1所述的光激微球,其特征在于,所述感光物质包括亚甲基蓝、玫瑰红、卟啉、酞菁及其衍生物中的一种或多种;
5.根据权利要求1-4任一项所述的光激微球,其特征在于,所述第一两亲性聚合物配体的亲水端位于所述第一疏水聚合物载体微球的最外层,所述第二两亲性聚合物配体的亲水端位于所述第二疏水聚合物载体微球的最外层;
6.一种光激微球的制备方法,其特征在于,包括供体微球...
【专利技术属性】
技术研发人员:阙巧珍,秦军芳,
申请(专利权)人:深圳市帝迈生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
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