一种烤烟醇化品质判定的高效液相指纹图谱分析方法技术

本发明专利技术涉及一种烤烟醇化品质判定的高效液相指纹图谱分析方法。它是采用高效液相色谱分析方法测定不同烟叶样品，得出烟叶指纹图谱特征峰，然后利用中草药指纹图谱软件对特征峰进行分析，建立指纹图谱特征峰总面积与烟叶样品感官质量的回归关系模型；以感官质量为依变量ｙ，指纹图谱总面积ｘ为因变量，建立两者的回归关系模型为：Ｙ＝７２．０４９７４＋０．１３８８＊ＬＮ（Ｘ）＊ＬＮ（Ｘ）或Ｙ＝Ｘ／（０．０１１０８１＊Ｘ＋１３．２４７）；根据所测样品的指纹图谱总面积Ｘ，计算出感官质量Ｙ。本发明专利技术具有准确性高、稳定性好的特点，实际操作中可节省大量的人力物力财力，使用方便，完全能够代替利用传统的感官评吸方法对烟叶醇化质量的判定。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种烤烟醇化品质的分析判定方法，尤其是一种烤烟醇化品质 判定的高效液相指纹图谱分析方法。
技术介绍
烟叶醇化是巻烟生产的重要环节，同时也是烟叶吸食品质改善的一个重要步骤，在提高巻烟成品质量和加强成本控制方面发挥着十分重要的作用。在醇化过程中，烤烟片烟内部发生一系列复杂的生理生化及纯化学的变化，导致内部化学成分的改变，进而引起烟叶品质的改善。烟叶中的化学成分是决定烟叶品质的内在因素，烟叶的化学成分主要包括羰基化合物、氨基酸、蛋白质及其含氮化合物、生物碱和其他含氮杂环化合物、 酶、有机酸、酚类化合物、色素、石油醚提取物、矿物质等；经进一步研究表明，烟叶的化学成分变化主要有两个特征， 一是不具有香气特征的大分子化合 物如总糖、还原糖、淀粉、总氮、蛋白质、氨基酸、烟碱、类胡萝卜素和高级脂肪酸等发生降解和转化，含量呈下降趋势；二是芳香性的小分子化合物如总 有机酸、羰基化合物如醇、醛、酮类、烟叶精油以及糖苷态香气物质得到合成、 转化和积累。在烟叶醇化过程中，烟叶挥发性酸、挥发性羰基化合物含量以及 烟叶精油中绝大多数香气成分含量显著增加，并符合二次曲线变化规律；醇化 过程中烤烟片烟中的还原糖、烟碱、挥发碱、淀粉含量及pH值均随着醇化时 间的延长呈持续降低趋势，挥发酸含量则逐渐增加，总氮含量无明显变化。依据烟叶醇化过程中化学成分变化的基本特征，探讨以化学分析与感官评 吸相结合的醇化质量评价方式，对于减少和克服传统评价方式的缺陷，增加客 观性和评价的准确性具有积极的意义。多年来，烟草科研人员试图用简单有效 的化学方法来代替传统的感官质量评吸方法。但是，由于影响烟叶抽吸品质的 因素是各化学成分的复杂平衡关系导致，所以利用化学指标方法来判断烟叶的醇化质量显得单一、片面；然而，目前还没有广泛适用的化学分析和仪器分析 方法，这就限制了在生产上的应用。我们在研究中发现指纹图谱技术是对模糊 物质研究的最佳方法，通过指纹图谱技术判断烟叶的醇化质量具有全面性和均一性。指纹图谱的概念是从中药药材的药性研究中首先提出来的，其定义是指样 品经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该样品特性的共有峰 的图谱。当前，色谱技术的多样化和检测能力的增强为指纹图谱研究和应用提 供了良好的工作平台，针对此项技术，所涉及的方法种类繁多，包括TLC、TLCS、 HPLC、 HPLC/MS、 GC、 GC/MS、 HPCE、 IR、 NMR及X射线衍射等。其中 色谱技术是主流，尤其是TLCS、 HPLC和GC己是大家所公认的三种常规的 分析手段。随着科学技术的发展，色谱分析仪器的完善与提高，在克服自身固 有缺陷，发挥自身优势方面有了长足发展，成为三种互相补充、相互结合的分 析手段。其中HPLC方法随新的高效通用型检测器的发展，使得HPLC的适用 性和灵敏度得到显著提高，从而使复杂样品的成功分析成为可能。烟叶的指纹图谱是利用色谱技术获得的烟叶特征提取物的色谱图，这是一 种综合的、可定性化的鉴别方法，借助MS， NMR法对烟叶的特征提取物进行 定性，通过内标和外标进行定量的先进方法。本专利技术对烤烟片烟在醇化过程中 指纹图谱变化规律研究的基础上，建立了不同条件下烟叶醇化品质与指纹图谱特征之间的关系，筛选出适宜的烟叶醇化品质的指纹图谱判定方法，为指导烟 叶醇化过程和准确判断醇化质量提供技术支撑。研究对于减少和克服传统评价 方式的缺陷，增加客观性和评价的准确性具有积极的意义。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种烤烟醇化品质判定的高效液相指纹图谱分析方 法，该方法测定的结果与感官评吸结果具有很好的一致性，有利于增强判定烟 叶醇化品质的客观性。为实现本专利技术目的所采取的技术方案是它是采用高效液相色谱分析方法 测定不同烟叶样品，得出烟叶指纹图谱特征峰，然后利用中草药指纹图谱软件 对特征峰进行分析，建立特征峰与烟叶样品感官质量的回归关系模型；以感官 质量为依变量y，指纹图谱总面积X为因变量，建立两者的回归关系模型为Y =72.04974+0.1388*LN(X)*LN(X);根据所测样品的指纹图谱总面积X，计算出 感官质量Y。其中进行高效液相色谱分析时，流动相A: 0.1%的甲酸；B:乙腈，进样 量10ul;流量5.0ml/vmin;柱温25°C ，采用剃度洗脱在0~40min乙腈由O.OV/V 至lj50， 40~45min由50变为100，然后保留5min，在50—55min变为0，保留 5min。本专利技术的另一种技术方案是以感官质量为依变量y，指纹图谱总面积x为 因变量，建立两者的另一回归关系模型为Y=X/(0.011081*X+13.247);根据所 测样品的指纹图谱总面积X，计算出感官质量Y。从而对烤烟的醇化品质做出判定。本专利技术利用HPLC分析技术，建立烤烟指纹图谱特征峰与感官质量之间的相关关系，进而建立指纹图谱特征峰与感官质量的多元回归模型，利用多元回 归模型对烟叶的感官质量进行检测。它的有益效果是提供了一种客观的烤烟醇 化品质的判定方法，且准确性和可靠性高；提出的指纹图谱方法和感官评吸方 法评价烟叶醇化质量具有一样的效果；该方法简单实用，操作简便，非常适合 作为烤烟质量的检测方法。附图说明图1为烟叶指纹图谱特征峰示意图 具体实施例方式通过具体的实施例子对本专利技术进一步说明。指纹图谱的优势主要是能够反应具有复杂成分的植物材料及其制剂内在质 量的均一性和稳定性。烟叶质量因产区的生态环境、等级、部位及醇化时间的 不同而有明显差异，而指纹图谱既具有判断该对象真伪的"共性",又能反映影响 因素带来的差异性特征,具有物种的唯一性和个体的相似性，从而能够从整体上 反应烟叶的质量。我们过去曾提出采用碘值法判断烟叶醇化进程，但该方法离生产实际应用 的需要还相差甚远，这些研究仅仅提供了应用非感官方法判断烟草醇化进程和 品质的可行性认识。在烟草醇化的理论与实践研究中，我们在过去指纹图谱理 论与实践研究的基础上，进一步探讨烤烟指纹图谱特征值与醇化进程和醇化品 质的关系，并建立了综合预测模型。同时，本项目重点研究了所提出判断方法 的影响因子及指标体系，明确其应用条件和范围，使该方法的应用更具有广泛 的适用性和实际可操作性。实施例为推广本专利技术的指纹图谱方法，特将本专利技术的方法应用与不同醇化时间、不同产地的烤烟进行了醇化质量判定实验。采用的样品见表l:表l:试验验证采用的样品一览表6大，份 2005年福建C3F 2005年云南C3F 2005年四川C3F 2005年贵州CFL 2005年湖北C3L 2005年东北CFL4个生态地区 """2005年湖北BLF~~ 2005年湖北XFL 2005年云南BFL 2005年云南XFL 2005年贵州BFL 2005年贵州BFL 2005年四川BFL-B3L 2005年四川BFL-CX1K2个年份 2005年云南C3F-B2005年四川C2L 2005年湖北C2L-A 2005年东北C2L-A 2004年云南C3F-B 2004年四川C2L 2004年湖北C2L-A 2004年东北C2L-B从打叶复烤线上取若干供试片烟，按照正常程序装箱打包，然后运回武汉， 存放在指定的试验仓库中。以放置时间为起始醇化时间，每3个月取一次样，每本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种烤烟醇化品质判定的高效液相指纹图谱分析方法，它是采用高效液相色谱分析方法测定不同烟叶样品，得出烟叶指纹图谱特征峰，然后利用中草药指纹图谱软件对特征峰进行分析，建立特征峰与烟叶样品感官质量的回归关系模型；以感官质量为依变量ｙ，指纹图谱总面积ｘ为因变量，建立两者的回归关系模型为：Ｙ＝７２．０４９７４＋０．１３８８＊ＬＮ（Ｘ）＊ＬＮ（Ｘ）；根据所测样品的指纹图谱总面积Ｘ，计算出感官质量Ｙ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：闫铁军，何结望，吴风光，司辉，孙敬国，涂书新，
申请(专利权)人：湖北中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]