【技术实现步骤摘要】
本专利技术具体涉一种甘蓝型油菜bnmate12基因及甘蓝型油菜基因bnmate12在调控甘蓝型油菜种子亚油酸和亚麻酸含量中的应用。本专利技术采用crispr/cas9技术对甘蓝型油菜bnmate12基因的靶位点进行编辑，获得bnmate12基因两个拷贝功能缺失的亚油酸和亚麻酸含量改变的甘蓝型油菜种子，证实了该基因的功能及其应用途径，属于基因改良。
技术介绍
1、甘蓝型油菜(brassica napus l.)是我国主要的油菜栽培种类，其经济价值以植物油和蛋白利用为主，种子的品质性状是基础研究和育种改良所关注的重要性状。脂肪酸是油脂的主要成分，其中不饱和脂肪酸(油酸、亚油酸、亚麻酸)含量高且均衡是长期以来甘蓝型油菜遗传育种的重要目标之一。菜籽油脂肪酸中油酸含量高达65％，是影响脂肪酸含量的关键组分；亚油酸和亚麻酸含量分别为20％和9％左右。亚油酸具有降胆固醇、防止动脉硬化的功能，亚麻酸可参与人脑和视网膜发育等(whelan j,fritsche k.linoleicacid.adv nutr,2013,4(3):311-2)。但增加植物亚油酸摄入会提高患肥胖症的概率，且亚油酸转化成不饱和脂肪酸花生四烯酸后，会诱发炎症和脂肪形成等(naughton ss,mathaiml,hryciw dh,et al.linoleic acid and the pathogenesis ofobesity.prostaglandins other lipid mediat,2016,125:90-9)。为降低冠状心脏疾病的发生率，随着年龄的增长人
技术实现思路
1、专利技术目的：本专利技术的第一目的在提供一种甘蓝型油菜bnmate12基因，本专利技术的第二目的是提供该甘蓝型油菜bnmate12基因在改良植物种子油脂品质中的应用，本专利技术的第三目的是提供一种改良植物种子油脂品质的方法，本专利技术的第四目的是提供该改良方法得到的转基因植物。
2、技术方案：本专利技术所述一种甘蓝型油菜bnmate12基因，所述甘蓝型油菜bnmate12基因包含bnmate12基因两个拷贝的dna片段，所述的dna片段的序列如seq id no:1和seqid no:2所示。
3、含有本专利技术所述的甘蓝型油菜bnmate12基因编辑靶位点的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因细胞系。
4、本专利技术所述甘蓝型油菜bnmate12基因或本专利技术所述的甘蓝型油菜bnmate12基因编辑靶位点的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因细胞系在改良植物种子油脂品质中的应用。
5、进一步地，所述油脂品质包括亚油酸和/或亚麻酸的含量。
6、进一步地，所述植物种子为甘蓝型油菜种子。
7、一种改良植物种子油脂品质的转基因植物培育方法，包括以下步骤：
8、利用本专利技术所述甘蓝型油菜bnmate12基因或本专利技术所述的甘蓝型油菜bnmate12基因编辑靶位点的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因细胞系中所述的同时靶向突变seq id no:1和seq id no:2的靶位点序列seq id no.3，构建crispr/cas9重组载体，转化目标植物，获得甘蓝型油菜bnmate12两个拷贝dna突变的转基因植物。
9、进一步地，所述转基因植物的种子亚油酸和亚麻酸含量明显区别于所述目标植物。
10、进一步地，包括下述步骤：
11、(1)设计同时靶向甘蓝型油菜bnmate12两个拷贝的敲除靶位点；
12、(2)构建甘蓝型油菜bnmate12靶位点的crispr/cas9敲除重组质粒；
13、(3)利用电击法将带有敲除甘蓝型油菜bnmate12靶位点的重组质粒转化农杆菌；
14、(4)将带有转化质粒的农杆菌采用转基因方法转化目标植物，得到甘蓝型油菜bnmate12突变体本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种甘蓝型油菜BnMATE12基因，其特征在于，所述甘蓝型油菜BnMATE12基因包含BnMATE12基因两个拷贝的DNA片段，所述的DNA片段的序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示。
2.含有权利要求1所述的甘蓝型油菜BnMATE12基因编辑靶位点的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因细胞系。
3.权利要求1所述甘蓝型油菜BnMATE12基因或权利要求2所述的甘蓝型油菜BnMATE12基因编辑靶位点的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因细胞系在改良植物种子油脂品质中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述油脂品质包括亚油酸和/或亚麻酸的含量。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述植物种子为甘蓝型油菜种子。
6.一种改良植物种子油脂品质的转基因植物培育方法，其特征在于，包括以下步骤：
7.根据权利要求6所述的培育方法，其特征在于，所述转基因植物的种子亚油酸和亚麻酸含量明显区别于所述目标植物。
8.根据权利要求6或7所述的培育方法，其特征在于，包括下
9.根据权利要求8所述的培育方法，其特征在于，以SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11、SEQID NO:12和SEQ ID NO:13两对引物分别扩增甘蓝型油菜BnMATE12两个拷贝BnaA.MATE12和BnaC.MATE12的靶位点SEQ ID NO:3，利用PCR和测序进行DNA扩增和突变分析。
10.根据权利要求6-9任一项所述的培育方法得到的转基因植物。
...【技术特征摘要】
1.一种甘蓝型油菜bnmate12基因，其特征在于，所述甘蓝型油菜bnmate12基因包含bnmate12基因两个拷贝的dna片段，所述的dna片段的序列如seq id no:1和seq id no:2所示。
2.含有权利要求1所述的甘蓝型油菜bnmate12基因编辑靶位点的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因细胞系。
3.权利要求1所述甘蓝型油菜bnmate12基因或权利要求2所述的甘蓝型油菜bnmate12基因编辑靶位点的表达盒、重组载体、重组微生物或转基因细胞系在改良植物种子油脂品质中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述油脂品质包括亚油酸和/或亚麻酸的含量。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述植物种子为甘蓝型油菜...
【专利技术属性】
技术研发人员：蒋金金，朱昊天，王幼平，陈鑫，谢涛，仕加玉，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：
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