【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物检测，具体而言，涉及一种用于丙型肝炎核心抗原检测试剂盒。
技术介绍
1、丙型肝炎病毒（hepatitis c virus，hcv）是一种血源性病毒，持续感染可发展为慢性丙型肝炎、肝硬化、肝癌，同时还可引起许多其他相关的肝外并发症，尤其是代谢紊乱和心血管疾病。慢性丙肝除了干扰素有确切的疗效外，尚没有其它有效的治疗方法。丙型肝炎在经治疗恢复后血清抗体水平较低，没有免疫保护作用，加之目前尚无保护性疫苗可用，再次感染的可能性较高。
2、因此，研发高质量的hcv核心抗原检测试剂，早期诊断hcv及其感染性疾病，及时干预对患者病情控制及预后具有重要意义，同时还具有重要的临床意义和经济价值。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于克服现有技术中存在的问题，提供一种用于丙型肝炎核心抗原检测试剂盒及其制备方法。根据本专利技术的方法制备得到的试剂盒具有灵敏度高、检出率高的特点。
2、本专利技术的目的及解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
3、本专利技术的一个方面提供了一种用于丙型肝炎核心抗原检测试剂盒，所述试剂盒包括以下组分：
4、磁微粒体系：磁微粒与抗hcv-cag抗体连接物的0.1～0.2 m ph=7.4～7.8的pbs缓冲液；
5、酶标记体系：hrp 标记的抗hcv-cag抗体的0.1～0.2 m ph=7. 4～7.8的pbs缓冲液；
6、发光底物i：2.0～4.0 mmol/l鲁米诺与0.2～0.
7、发光底物ii：5～10 mmol/l的双氧水。
8、在本专利技术的一个优选实施例中，所述磁微粒的制备方法包括以下步骤：
9、将磁性纳米颗粒超声分散于n,n-二甲基甲酰胺中，再加入柠檬酸，于600～1000w功率下微波处理10～30min，之后经过过滤、洗涤和干燥得到改性磁性纳米颗粒；
10、将改性磁性纳米颗粒置于含硼混合液超声处理8～10h，期间持续通入臭氧，之后经过过滤、洗涤和干燥，得到氧化硼掺杂的改性磁性纳米颗粒；
11、将壳聚糖溶于体积分数3～5%的盐酸溶液中，得到质量分数为5～10%的酸化壳聚糖溶液，然后加入氧化硼掺杂的改性磁性纳米颗粒搅拌均匀，加入交联单体和引发剂在100～150℃下搅拌反应6～10h，待反应结束后静置10～12h，之后经过过滤、洗涤后得到直径为1~5μm的磁微粒。
12、在本专利技术的一个优选实施例中，所述磁性纳米颗粒选自fe3o4、fe2o3、feo中的任一种。
13、在本专利技术的一个优选实施例中，所述柠檬酸按照与磁性纳米颗粒的质量比为1～2：10的量加入。
14、在本专利技术的一个优选实施例中，所述含硼混合液为五硼酸铵和硼酸溶解于水后得到的溶液，其中，所述五硼酸铵、硼酸与水按照质量比3：（5～10）：100的量加入。
15、在本专利技术的一个优选实施例中，所述氧化硼掺杂的改性磁性纳米颗粒按照与壳聚糖质量比1：1～2的量加入。
16、在本专利技术的一个优选实施例中，所述交联单体选自n，n’-亚烷基双(甲基)丙烯酰胺、二丙烯酸乙二醇酯或三羟甲基丙烷三丙烯酸酯中的任一种。
17、在本专利技术的一个优选实施例中，所述引发剂选自异丙苯过氧化氢、叔丁基过氧化氢、过氧化二叔丁基中的任一种。
18、在本专利技术的一个优选实施例中，所述交联单体按照与壳聚糖质量比1～3：1的量加入；所述引发剂的加入量为交联单体质量的0.3～0.5%。
19、在本专利技术的一个优选实施例中，所述试剂盒还包括阳性标准品和阴性标准品，所述阳性标准品包括hcv-cag抗原，所述阴性标准品包括bsa。
20、在本专利技术的一个优选实施例中，所述试剂盒还包括样本稀释液和清洗浓缩液。
21、在本专利技术的一个优选实施例中，所述样本稀释液组成为：磷酸氢二钠 1.974g/l，磷酸二氢钾 0.2245g/l，bsa 0.5g/l，pc-300 0.1%；
22、所述清洗浓缩液组成为：磷酸氢二钠 39.48g/l，磷酸二氢钾 4.49g/l，氯化钠18g/l，吐温-20 0.5%。
23、借由上述技术方案，本专利技术至少具有下列优点：
24、1、本专利技术通过采用磁微粒化学发光技术将免疫磁珠体系、免疫反应体系以及化学发光体系相结合得到用于检测hcv核心抗原的试剂盒体系，其具有高灵敏度、高特异性，又具有操作简便、快速的特点。
25、2、本专利技术的磁微粒为本申请自主研发产品，具有磁性高、吸附性好的优点，能够实现与抗hcv-cag抗体的高效结合，增加与抗hcv-cag抗体的结合数量，从而提高检测的准确率和灵敏度。
26、3、本专利技术所用的磁微粒是以磁性纳米颗粒为原料经过羧基化改性、氧化硼掺杂之后再进行壳聚糖的聚合包覆得到的复合磁微粒。本专利技术的磁微粒具有多个活性结合位点，能够促进与抗hcv-cag抗体的结合及增加与抗hcv-cag抗体的结合数量，从而在实际用于hcv-cag抗原检测的时候提高检测灵敏度和准确度。
27、上述说明仅是本专利技术技术方案的概述，为了能够更清楚了解本专利技术的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本专利技术的较佳实施例详细说明如后。
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1.一种用于丙型肝炎核心抗原检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括以下组分：
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述磁性纳米颗粒选自Fe3O4、Fe2O3、FeO中的任一种。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述柠檬酸按照与磁性纳米颗粒的质量比为1～2：10的量加入。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述含硼混合液为五硼酸铵和硼酸溶解于水后得到的溶液，其中，所述五硼酸铵、硼酸与水按照质量比3：（5～10）：100的量加入。
5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述氧化硼掺杂的改性磁性纳米颗粒按照与壳聚糖质量比1：1～2的量加入。
6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述交联单体选自N，N’-亚烷基双(甲基)丙烯酰胺、二丙烯酸乙二醇酯或三羟甲基丙烷三丙烯酸酯中的任一种。
7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述引发剂选自异丙苯过氧化氢、叔丁基过氧化氢、过氧化二叔丁基中的任一种。
8.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述交联单体按照与壳
9.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括阳性标准品和阴性标准品，所述阳性标准品包括HCV-cAg抗原，所述阴性标准品包括BSA。
...【技术特征摘要】
1.一种用于丙型肝炎核心抗原检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括以下组分：
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述磁性纳米颗粒选自fe3o4、fe2o3、feo中的任一种。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述柠檬酸按照与磁性纳米颗粒的质量比为1～2：10的量加入。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述含硼混合液为五硼酸铵和硼酸溶解于水后得到的溶液，其中，所述五硼酸铵、硼酸与水按照质量比3：（5～10）：100的量加入。
5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述氧化硼掺杂的改性磁性纳米颗粒按照与壳聚糖质量比1：1～2的量加...
【专利技术属性】
技术研发人员：王晓阳，曹力欢，粟茂飚，曾杭，
申请(专利权)人：湖南迪格洛斯生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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