【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物工程，尤其涉及一种重组iii型人源化胶原蛋白及其编码基因和应用。
技术介绍
1、天然胶原蛋白具有一种复杂的、特征性的三螺旋结构，该结构由三条多肽链通过链间氢键连接形成。该三螺旋结构是以3个氨基酸残基为基本重复序列的左手螺旋，这3个氨基酸通常为gly-x-y。同时，生物体通过复杂的酶促体系对胶原蛋白进行复杂的修饰，未经修饰的多肽链将无法形成正确的三螺旋结构，从而缺乏胶原蛋白应有的生物学功能。上述特征对人们采用基因工程的方法制备有功能胶原蛋白产生了较大的限制。
2、进一步地，天然胶原蛋白通常不溶于水，需要通过化学手段处理后才能被人体利用。生产胶原蛋白的传统方法是利用酸、碱或酶法处理猪、马、牛、鸡或鱼的骨骼和皮肤等组织，获得胶原蛋白及其衍生物。利用上述方法提取的胶原蛋白及其衍生物往往已经失活，无法发挥其生物学功能。其次，提取自其他动物的胶原蛋白无法与人体相容，具有较大的过敏甚至免疫排斥的风险。第三，由于动物种属和来源的不固定，导致各批次间胶原蛋白及其衍生物的质量难以统一。最后，动物源提取物的病毒携带风险也难以避免。总之，提取自动物组织的胶原蛋白及其衍生物的应用也相对有限。因此，本领域需要基于基因工程手段合成具有生物活性的胶原蛋白。
技术实现思路
1、本专利技术旨在解决上述问题，本专利技术提供了一种重组iii型人源化胶原蛋白及其编码基因和应用。本专利技术对天然胶原蛋白的氨基酸序列进行截短、重复，通过大量实验筛选出可溶的且保留天然胶原蛋白功效的肽段作为起始序列。
2、一方面，本专利技术提供了一种重组胶原蛋白，所述重组胶原蛋白具有如seq id no:1所示的氨基酸序列。
3、本专利技术的重组胶原蛋白(重组iii型人源化胶原蛋白sm279)，与现有的重组胶原蛋白存在以下区别：
4、1、重组iii型人源化胶原蛋白sm279的稳定性显著高于现有的重组胶原蛋白，体现在两方面：一方面，重组iii型人源化胶原蛋白sm279的纯度较高，sds-page表征为单一清晰条带，无显著降解条带、杂蛋白条带，而同类型的市售重组胶原蛋白在胶图上表现出多条降解条带；另一方面，重组iii型人源化胶原蛋白sm279溶液在4、25、45℃三个温度下加压1个月后，胶图仍保持单一条带，未发生明显的降解；
5、2、重组iii型人源化胶原蛋白sm279促细胞增殖、粘附和迁移活性高；促细胞增殖方面，重组iii型人源化胶原蛋白sm279具有更低的起效浓度(8μg/ml)、更高且更稳定的促细胞增殖效果；促细胞黏附方面，仅有重组iii型人源化胶原蛋白sm279具有促细胞黏附活性，而同类型的市售重组胶原蛋白没有该功能，有些甚至抑制了细胞粘附率；促细胞迁移方面，只有重组iii型人源化胶原蛋白sm279具有最低的起效浓度(2μg/ml)、以及更高且更稳定的促细胞迁移效果；
6、3、重组iii型人源化胶原蛋白sm279具有良好的抗衰活性，在样本浓度100μg/ml条件下，只有重组iii型人源化胶原蛋白sm279产生了极显著的抗衰活性(抗衰基因col-α1的表达量增加30％)，而同类型的市售重组胶原蛋白不具有明显抗衰活性。
7、另一方面，本专利技术提供了一种多核苷酸，所述多核苷酸编码所述的重组胶原蛋白。
8、在一些方式中，所述多核苷酸具有如seq id no:2所示的核苷酸序列。
9、另一方面，本专利技术提供了一种重组表达载体，包括所述多核苷酸。
10、另一方面，本专利技术提供了一种宿主细胞，包括所述的多核苷酸，或包括所述重组表达载体。
11、另一方面，本专利技术提供了一种重组胶原蛋白的制备方法，培养所述的宿主细胞。
12、另一方面，本专利技术提供了一种重组胶原蛋白用于制备保健品、化妆品或医美产品的用途，所述重组胶原蛋白具有如seq id no:1所示的氨基酸序列。
13、本专利技术所述的医美产品是指用于医疗美容领域的产品，与普通的日常护肤品、美容院护肤品是不同级别的。一些常用的医美产品，包括医美面膜、敷料等。这些产品的使用都是需要由专业的医护人员来进行的，或是进行相关指导。医美产品，例如敷料可应用于对皮炎、湿疹、敏感肌肤及光子嫩肤、激光美容、果酸活肤等术后皮肤屏障功能受损者。
14、在一些方式中，本专利技术所述的化妆品是指皮肤用化妆品。
15、另一方面，本专利技术提供了一种重组胶原蛋白用于制备抗衰产品、修护产品或抗氧化产品的用途，所述重组胶原蛋白具有如seq id no:1所示的氨基酸序列。
16、细胞增殖、黏附和迁移是抗炎、凝血、伤口愈合、血管新生等生理过程的基础。基于本专利技术的重组胶原蛋白sm279的促细胞增殖、黏附和迁移活性，本专利技术的重组胶原蛋白sm279可用于化妆品、保健品和医美产品领域。进一步的，本专利技术的重组胶原蛋白sm279还具有抗衰活性，可以发挥抗氧化、抗衰老的有益作用，进一步拓宽了本专利技术的重组胶原蛋白sm279在化妆品和保健品领域的应用。
17、另一方面，本专利技术提供了一种重组胶原蛋白用于制备促细胞增殖、黏附和迁移活性的试剂的用途，所述重组胶原蛋白具有如seq id no:1所示的氨基酸序列。
18、另一方面，本专利技术提供了一种组合物，包括所述的重组胶原蛋白、可接受的赋形剂。
19、在一些方式中，所述组合物是保健品、化妆品或生物医学产品。
20、在一些方式中，所述组合物是抗衰产品。
21、在一些方式中，所述组合物是修护产品。
22、在一些方式中，所述组合物是抗氧化产品。
23、所述赋形剂选自但不限于溶剂、增溶剂、助溶剂、助悬剂、稳定剂、乳化剂、增稠剂、基质材料、粘合剂、抗氧剂、防腐剂、ph调节剂、润湿剂、保湿剂、香料、推进剂、珠光剂、表面活性剂、配合剂、甜味剂、着色剂、增味剂和/或其组合。
24、本专利技术的有益效果在于：
25、1、本专利技术提供了一种全新的重组胶原蛋白，以具有为细胞提供营养物质功能并维持皮肤弹性的人iii型胶原蛋白作为序列模板，针对性地选择了促进结构稳定的氨基酸占比较高的序列片段，命名为重组iii型人源化胶原蛋白sm279，同时sm279序列中包含整合素和肝素等多个结合位点，能够促进细胞增殖、黏附和迁移，还具有抗衰的功效。将sm279与适宜的原、辅料配合使用时，可制成保健品、化妆品和医美产品等。
26、2、重组iii型人源化胶原蛋白sm279的稳定性显著高于现有的重组胶原蛋白，一是胶图中没本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种重组胶原蛋白，其特征在于，所述重组胶原蛋白具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。
2.一种多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码权利要求1所述的重组胶原蛋白。
3.如权利要求2所述多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸具有如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。
4.一种重组表达载体，其特征在于，包括权利要求2所述多核苷酸。
5.一种宿主细胞，其特征在于，包括如权利要求2或3所述的多核苷酸，或包括权利要求4所述重组表达载体。
6.一种重组胶原蛋白的制备方法，其特征在于，培养权利要求5所述的宿主细胞。
7.一种重组胶原蛋白用于制备保健品、化妆品或医美产品的用途，其特征在于，所述重组胶原蛋白具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。
8.一种重组胶原蛋白用于制备抗衰产品、修护产品或抗氧化产品的用途，其特征在于，所述重组胶原蛋白具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。
9.一种重组胶原蛋白用于制备促细胞增殖、黏附和迁移活性的试剂的用途，其特征在于，所述重组胶原蛋白具有
10.一种组合物，其特征在于，包括如权利要求1所述的重组胶原蛋白、可接受的赋形剂。
...【技术特征摘要】
1.一种重组胶原蛋白，其特征在于，所述重组胶原蛋白具有如seq id no:1所示的氨基酸序列。
2.一种多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸编码权利要求1所述的重组胶原蛋白。
3.如权利要求2所述多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸具有如seq id no:2所示的核苷酸序列。
4.一种重组表达载体，其特征在于，包括权利要求2所述多核苷酸。
5.一种宿主细胞，其特征在于，包括如权利要求2或3所述的多核苷酸，或包括权利要求4所述重组表达载体。
6.一种重组胶原蛋白的制备方法，其特征在于，培养权利要求5所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄虎，陶侃，孙璞，张瑶，马鹏程，魏静，朱蕙林，
申请(专利权)人：上海中翊日化有限公司，
类型：发明
国别省市：
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