【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种全人源内源基因递送系统。具体来说，本专利技术涉及一种包含人源内源包膜蛋白、人源内源囊壳蛋白和目的基因的全人源内源基因递送系统，该系统具有安全、高效的优点，可以应用于crispr系统、基因疗法、疫苗制造等。
技术介绍
1、生物学核苷酸递送系统被应用于一系列疾病的基因疗法中，以消除遗传疾病或恢复缺乏的基因表达。源自自身失活的hiv-1的慢病毒系统被认为是通过将病毒rna基因组整合到宿主染色质中，实现在宿主细胞中稳定长期基因表达的有效基因转移系统。慢病毒的转导依赖于由包膜糖蛋白-细胞外受体相互作用介导的病毒-细胞膜融合。水疱性口炎g糖蛋白(vsvg)是在多种慢病毒包装系统中最广泛使用的包膜元件，因其理想的病毒颗粒稳定性和对源自不同原始组织类型的宿主细胞的出色基因转导效率而被广泛使用。然而，在体内研究中，慢病毒系统显示出显著的免疫原性，已有报告显示出意外的免疫反应。此外，慢病毒基因组对宿主dna的非位点特异性整合也为慢病毒系统的进一步应用带来了风险和限制，这需要改进具有较低免疫原性或整合活性的基因递送系统。
2、最近，病毒样颗粒(vlps)被引入基因疗法领域，用于设计和构建安全、特异和高效的mrna传递系统。人父系表达基因10(hpeg10)具有类似囊壳的性质，并在非蛋白编码序列而是5’/3’utr区域识别自己的mrna，因此形成囊壳-mrna vlp样结构。hpeg10 mrna utr区域的特异性识别和整个mrna片段的包装进入hpeg10囊壳，允许将蛋白编码序列替换为目的基因(goi)，从而使hpeg
3、总的来说，尽管现在存在需求，但到目前为止还没有开发出由高度或完全人源内源元件组成的基因递送系统。因此，本专利技术的技术问题可以看作是提供一种手段和方法，允许以完全人源内源的方式进行安全和高效的基因传递。通过下文中和权利要求中描述的实施例解决了这个技术问题。
4、专利技术概述
5、本专利技术涉及基因递送系统、其生产方法和使用。
6、在第一方面，本专利技术提供了一种全人源内源基因递送系统，包括人源内源包膜蛋白、人源内源囊壳蛋白和目的基因。
7、在一个具体实施例中，人源内源包膜蛋白可以从由herv-k、herv-h、herv-w、herv-frd、herv-e和其变体组成的群组中选择。更具体地，herv-k可以从由herv-k108、herv-k109、herv-k113、herv-k115组成的群组中选择；herv-h可以从由herv-h/env59、herv-h/env60、herv-h/env62组成的群组中选择；herv-w可以是ervw-1；herv-frd可以是ervfrd-1。
8、在一个具体实施例中，人源内源包膜蛋白可以是c端截短的ervfrd-1。优选地，c端截短的ervfrd-1具有如seq id nos.:2-7中所述的氨基酸序列，或者具有至少90％同源性的变体。更具体地，c端截短的ervfrd-1是tervfrd-1del515，其具有如seq id no.:2所述的氨基酸序列，或其变体；c端截短的ervfrd-1是tervfrd-1del514，其具有如seq id no.:3所述的氨基酸序列，或其变体；c端截短的ervfrd-1是tervfrd-1del513，具有如seq id no.:4所述的氨基酸序列，或其变体；c端截短的ervfrd-1是tervfrd-1del512，具有如seq idno.:5所述的氨基酸序列，或其变体；c端截短的ervfrd-1是tervfrd-1del511，具有如seqid no.:6所述的氨基酸序列，或其变体；c端截短的ervfrd-1是tervfrd-1del510，具有如seq id no.:7所述的氨基酸序列，或其变体。
9、在一个具体实施例中，人源内源囊壳蛋白从由hpeg10、harc和其变体组成的群组中选择。
10、在一个具体实施例中，人源内源囊壳蛋白是具有如seq id no.:8所述的氨基酸序列的hpeg10，或其变体。
11、在一个具体实施例中，目的基因包括dna或rna，优选地为rna。更具体地，目的基因包括但不限于mrna、circle rna、grna、sirna、mirna、shrna、aso(反义寡核苷酸)、rnascaffold和非编码rna。
12、在第二方面，本专利技术提供了一种用于生产本专利技术的全人源内源基因递送系统的包装系统，该系统包括至少包含人源内源包膜蛋白cds的包膜质粒、包含人源内源囊壳蛋白cds的包装质粒和包含目的基因的转移质粒。
13、在一个具体实施例中，人源内源包膜蛋白可以从由herv-k、herv-h、herv-w、herv-frd、herv-e和其变体组成的组中选择。更具体地，herv-k可以从由herv-k108、herv-k109、herv-k113、herv-k115组成的群组中选择；herv-h可以从由herv-h/env59、herv-h/env60、herv-h/env62组成的群组中选择；herv-w可以是ervw-1；herv-frd可以是ervfrd-1。
14、在一个具体实施例中，人源内源包膜蛋白可以是c端截短的ervfrd-1。优选地，c端截短的ervfrd-1具有如seq id nos.:2-7中所述的氨基酸序列，或者具有至少90％同源性的变体。更具体地，c端截短的ervfrd-1是tervfrd-1del515，具有如seq id no.:2所述的氨基酸序列，或其变体；c端截短的ervfrd-1是tervfrd-1del514，具有如seq id no.:3所述的氨基酸序列，或其变体；c端截短的ervfrd-1是tervfrd-1del513，具有如seq id no.:4所述的氨基酸序列，或其变体；c端截短的ervfrd-1是tervfrd-1del512，具有如seq id no.:5所述的氨基酸序列，或其变体；c端截短的ervfrd-1是tervfrd-1del511，具有如seq id no.:6所述的氨基酸序列，或其变体；c端截短的ervfr本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种全人源内源基因递送系统，包括(1)人源内源包膜蛋白，(2)人源内源囊壳蛋白，和(3)目的基因。
2.根据权利要求1所述的全人源内源基因递送系统，其中所述人源内源包膜蛋白选自由hERV-K、hERV-H、hERV-W、hERV-FRD、hERV-E和其变体组成的群组。
3.根据权利要求1或2中所述的全人源内源基因递送系统，其中所述的人源内源包膜蛋白是c-末端截断的ERVFRD-1。
4.根据权利要求1至3中任何一项所述的全人源内源基因递送系统，其中所述的人源内源囊壳蛋白选自由hPEG10、hArc和其变体组成的群组。
5.根据权利要求1至4中任何一项所述的全人源内源基因递送系统，其中所述的人源内源囊壳蛋白是具有SEQ ID NO.:8中列出的氨基酸序列的hPEG10，或者具有至少90％同源性的SEQ ID NO.:8的变体。
6.根据权利要求1至5中任何一项所述的全人源内源基因递送系统，其中所述的目的基因是DNA或RNA，优选地是RNA，更优选地是mRNA。
7.一种包装系统，其用于生产根据权利要求1-
8.一种试剂盒，其用于生产根据权利要求1-6中任何一项所述的全人源内源基因递送系统，包括根据权利要求7所述的包装系统，和一个包装细胞系。
9.一种生产权利要求1至6中任何一项所述的全人源内源基因递送系统的方法，包括以下步骤：
10.根据权利要求1-6中任何一项所述的全人源内源基因递送系统，其用于将Cas9mRNA和gRNA递送给受试者以实现基因编辑和基因治疗，或者用于携带表达肿瘤抗原和病毒抗原的mRNA疫苗，或者表达细胞重编程因子以用于制造多能干细胞、修饰细胞功能，或者用于细胞免疫疗法以传递嵌合抗原受体mRNA，或者用于基因疗法以表达完整的mRNA、小RNA和RNP。
11.根据权利要求1-6中任何一项所述的全人源内源基因递送系统的用途，其将Cas9mRNA和gRNA递送给受试者以实现基因编辑和基因治疗，或者用于携带表达肿瘤抗原和病毒抗原的mRNA疫苗，或者表达细胞重编程因子以用于制造多能干细胞、修饰细胞功能，或者用于细胞免疫疗法以传递嵌合抗原受体mRNA，或者用于基因疗法以表达完整的mRNA、小RNA和RNP。
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种全人源内源基因递送系统，包括(1)人源内源包膜蛋白，(2)人源内源囊壳蛋白，和(3)目的基因。
2.根据权利要求1所述的全人源内源基因递送系统，其中所述人源内源包膜蛋白选自由herv-k、herv-h、herv-w、herv-frd、herv-e和其变体组成的群组。
3.根据权利要求1或2中所述的全人源内源基因递送系统，其中所述的人源内源包膜蛋白是c-末端截断的ervfrd-1。
4.根据权利要求1至3中任何一项所述的全人源内源基因递送系统，其中所述的人源内源囊壳蛋白选自由hpeg10、harc和其变体组成的群组。
5.根据权利要求1至4中任何一项所述的全人源内源基因递送系统，其中所述的人源内源囊壳蛋白是具有seq id no.:8中列出的氨基酸序列的hpeg10，或者具有至少90％同源性的seq id no.:8的变体。
6.根据权利要求1至5中任何一项所述的全人源内源基因递送系统，其中所述的目的基因是dna或rna，优选地是rna，更优选地是mrna。
7.一种包装系统，其用于生产根据权利要求1-6中任何一项所述的全人源内源基因递送系统，包括至少(1)包含人源内源包膜蛋白...
【专利技术属性】
技术研发人员：王成，王锡衍，
申请(专利权)人：北京因诺惟康医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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