【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物分析领域，具体涉及一种基于鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒的药物分析系统。
技术介绍
1、类器官3d培养是一种新兴的用来研究组织成体干细胞生长、分化、器官形成的体外研究系统。肠道类器官的3d培养是将分离的肠道隐窝或干细胞植入含有多种生长因子的基质胶中，在基质3d支撑下生成具有肠道上皮样结构的微型空心球体，这些球体被称为肠道类器官。此外，还可以利用肿瘤干细胞或肿瘤前体细胞得到肠肿瘤类器官。这些肠道类器官被广泛应用于炎症性肠病、肠道损伤再生、肠癌等多种肠道疾病的研究。
2、目前许多用作细胞系的细胞为永生化细胞，即在理化刺激、基因突变、病毒感染等外界刺激下，可以在体外无限增殖的不衰老细胞株。因此，虽然二维培养的细胞系具有可操作性高、培养周期短和高通量等优点，但是当其应用至药物筛选时，某个具体细胞系对某种药物的敏感性，难以代表其他细胞系，更是难以代表人体组织。此外，二维培养的细胞系还无法模拟正常组织和肿瘤组织的三维生长环境，因此难以模拟药物的浸润过程，这也说明基于二维培养的细胞系产生的药物筛选结果参考价值较低。
3、与传统的二维细胞培养相比，类器官来源于机体自身组织或干细胞，是通过体外3d培养形成的具有原始组织及器官的三维（3d）结构模型，在组织结构、细胞类型和功能等方面与来源组织高度相似，即类器官可以表现出接近生理状态的细胞组成和生理功能。因此，类器官在药物筛选中展现出特有的优势，能够更加准确地评价药物在体内的作用效果以及药物的毒副作用，从而提高药物开发的效率和药物临床试验的成功率。
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技术实现思路
1、第一方面，本专利技术提供了一种基于鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒的药物分析系统，其特征在于，所述系统包括：
2、a）鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒；
3、b）构建的肠道类器官，所述肠道类器官包括正常肠类器官；
4、c）铂类药物；
5、其中所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒的浓度包括5 – 20 μg/ml，所述构建的肠道类器官为类器官细胞悬液的形式，所述类器官细胞悬液的细胞密度包括1 - 5×104个肠道类器官细胞/ml；所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒先于或与所述铂类药物同时加入到所述构建的肠道类器官中。
6、在一些实施例中，所述肠道类器官的传代代次为p6代至p15代。
7、在一些实施例中，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒的平均粒径为50-120 nm。
8、在一些实施例中，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒与所述肠道类器官的比例为1 – 5 μg/100个肠道类器官细胞。
9、在一些实施例中，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒的浓度为10 μg/ml。
10、在一些实施例中，所述铂类药物的浓度包括0.01 – 1000 μm。
11、在一些实施例中，所述铂类药物包括顺铂或奥沙利铂。
12、在一些实施例中，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒通过以下方法制备得到：
13、s101 当鼠李糖乳杆菌培养悬液的菌种密度达到2×109 cfu/ml时，将所述培养悬液在2000 g下离心10~15分钟，得到上清液a；
14、s102 将所述上清液a在5000 g下离心20~30分钟，得到上清液b；
15、s103 将所述上清液b在10000 g下离心30~40分钟，得到上清液c；
16、s104 将所述上清液c使用0.45 μm过滤器过滤，将过滤后的所述上清液c在10000~150000 g下超速离心70分钟，得到沉淀d；
17、s105 将所述沉淀d重悬并使用0.22 μm过滤器过滤，得到滤液e，将所述滤液e在10000~150000 g下超速离心70~120分钟，得到沉淀f，即所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒。
18、在一些实施例中，所述类器官细胞悬液通过将所述构建的肠道类器官进行消化后获得。
19、在一些实施例中，所述铂类药物的浓度包括0.01 – 1 μm。
20、在一些实施例中，所述正常肠类器官源自健康肠组织中的肠道干细胞或隐窝。
21、在一些实施例中，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒、所述铂类药物和所述构建的肠道类器官至少共培养24小时。
22、在一些实施例中，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒先于所述铂类药物6-8小时加入到所述构建的肠道类器官中。
23、在一些实施例中，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒、所述铂类药物和所述构建的肠道类器官共培养72-120小时。
24、第二方面，本专利技术提供了一种鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒在制备药物分析系统中的用途，所述系统包括：
25、a）鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒；
26、b）构建的肠道类器官，所述肠道类器官包括正常肠类器官；
27、c）铂类药物；
28、其中所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒的浓度包括5 – 20 μg/ml，所述构建的肠道类器官为类器官细胞悬液的形式，所述类器官细胞悬液的细胞密度包括1 - 5×104个肠道类器官细胞/ml；所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒先于或与所述铂类药物同时加入到所述构建的肠道类器官中。
29、在一些实施例中，所述肠道类器官的传代代次为p6代至p15代。
30、在一些实施例中，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒的平均粒径为50-120 nm。
31、在一些实施例中，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒与所述肠道类器官的比例为1 – 5 μg/100个肠道类器官细胞。
32、在一些实施例中，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒的浓度为10 μg/ml。
33、在一些实施例中，所述铂类药物的浓度包括0.01 – 1000 μm。
34、在一些实施例中，所述铂类药物包括顺铂或奥沙利铂。
35、在一些实施例中，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒通过以下方法制备得到：
36、s101 当鼠李糖乳杆菌培养悬液的菌种密度达到2×109 cfu/ml时，将所述培养悬液在2000 g下离心10~15分钟，得到上清液a；
37、s102 将所述上清液a在5000 g下离心20~30分钟，得到上清液b；
38、s103 将所述上清液b在10000 g下离心30~40分钟，得到上清液c；
39、s104 将所述上清液c使用0.45 μm过滤器过滤，将过滤后的所述上清液c在10000~150000 g下超速离心70分钟，得到沉淀d；
40、s105 将所述沉淀d重悬并使用0.22 μm过滤器过滤，得到滤液e，将所述滤液e在10000~150000 g下超速离心70~120分钟，得到沉淀f，即所述鼠李糖乳杆菌来源本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种基于鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒的药物分析系统，其特征在于，所述系统包括：
2.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒的平均粒径为50 – 120 nm。
3.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒与所述肠道类器官的比例为1 – 5 μg/100个肠道类器官细胞。
4.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒的浓度为10 μg/mL。
5.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述铂类药物的浓度包括0.01 – 1000 μM。
6.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒通过以下方法制备得到：
7.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述类器官细胞悬液通过将所述构建的肠道类器官进行消化后获得。
8.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述正常肠类器官源自健康肠组织中的肠道干细胞或隐窝。
9.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒、所述铂类药物和所
10.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述铂类药物的浓度包括0.01 – 1 μM。
...【技术特征摘要】
1.一种基于鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒的药物分析系统，其特征在于，所述系统包括：
2.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒的平均粒径为50 – 120 nm。
3.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒与所述肠道类器官的比例为1 – 5 μg/100个肠道类器官细胞。
4.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述鼠李糖乳杆菌来源的纳米颗粒的浓度为10 μg/ml。
5.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述铂类药物的浓度包括0.01 – 1000 μm。<...
【专利技术属性】
技术研发人员：闫芳，马福军，周永双，袁丽，曹治兴，冯蕾，艾娇，杨兴尧，王凌霄，任燕，
申请(专利权)人：成都市第五人民医院，
类型：发明
国别省市：
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