【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及食品科学和食品加工，尤其是涉及一种蛋白质-多酚共价加合物及其制备方法与应用。
技术介绍
1、蛋白质是食品乳液中常见的一类天然乳化剂，其兼具高表面活性、生物相容性及营养性，被广泛用于脂溶性生物活性物质乳液的构建。多酚类物质是存在于植物体中食用安全性较高的一类生物活性物质，因其卓越的抗氧化特性被广泛应用于营养健康食品的开发。现已有研究表明，蛋白质与多酚相互作用所形成的产物具有比原蛋白质更强的乳化特性，同时通过相互作用将多酚与蛋白质结合，使得互作产物具有较强的抗氧化性，可以用于设计抗氧化型乳化剂。蛋白质与多酚的相互作用包括非共价相互作用与共价相互作用。与非共价相互作用产物相比，蛋白质-多酚共价相互作用产物更为稳定，在食品加工中应用前景更广。
2、相关技术中，蛋白质-多酚共价加合物的制备方法主要有三种。一为将多酚类物质与蛋白质混合而后再给予氧化环境(碱性ph、添加过渡金属离子、添加氧化酶等)，此时，多酚类物质先被氧化形成相应的醌类物质，而后与蛋白质侧链亲核基团反应生成共价加和物。该方法的反应过程通常需要24小时以上，耗时过长，且反应体系ph单一，无法测定及控制反应体系中醌类物质的生成量，因此无法控制最终目的产物多酚-蛋白质共价加和物的质量。二为利用控制电位电解库伦技术将4-甲基邻苯二酚氧化生成4-甲基邻苯二醌，而后将获得的4-甲基邻苯二醌与蛋白质混合反应获得共价加合物。该方法要求制备得到的多酚足够稳定，4-甲基邻苯二醌是目前已知的唯一能够利用该技术制备的醌类物质，绿原酸、咖啡酸、迷迭香酸等多酚类物质所氧化生成的
3、因此，有必要提供一种高效、可控的适用于多种多酚的蛋白质-多酚共价加合物的制备方法。
技术实现思路
1、本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一种蛋白质-多酚共价加合物的制备方法，能够有效降低醌类物质副反应及其对电极的阻塞效应，高效制备得到蛋白质-多酚共价加合物。
2、本专利技术还提供上述制备方法制得的蛋白质-多酚共价加合物。
3、本专利技术还提供上述蛋白质-多酚共价加合物的制备方法或上述蛋白质-多酚共价加合物的应用。
4、根据本专利技术的第一方面实施例的一种蛋白质-多酚共价加合物的制备方法，包括以下步骤：
5、s1、利用控制电位电解库伦法对工作电极进行负电压电解处理；
6、s2、采用包含第一电解液、第一参比电极、第一对电极和经步骤s1处理的所述工作电极的第一三电极体系，利用控制电位电解库伦法进行正电压电解处理，即得蛋白质-多酚共价加合物；
7、所述第一电解液包括多酚、含有游离巯基的蛋白质；
8、所述正电压电解处理的电解电压为多酚氧化峰峰值电位+(0.02v～0.11v)。
9、根据本专利技术实施例的制备方法，至少具有如下有益效果：
10、实施例的制备方法利用蛋白质的游离巯基与醌类物质反应效率较高的特点，筛选含有游离巯基的蛋白质与多酚构建共混体系，利用控制电位电解库伦法将体系中多酚氧化形成相应的醌类物质，而后体系中共存的具有游离巯基的蛋白质将与醌类物质迅速反应形成多酚-蛋白质共价加合物，有效降低醌类物质副反应及其对电极的阻塞效应。若正电压电解处理的电解电压过低，则多酚不能够被氧化，得不到相应的醌类物质，进而也无法合成相应的蛋白质-多酚共价加合物；若正电压电解处理的电解电压过高，则电解体系中其他物质也可能被氧化，进而干扰制备过程，且电压过高，电解体系产物易吸附在电极表面形成钝化层，降低电极活性，影响反应效率。
11、该制备方法可用于制备多种多酚与蛋白质的共价加合物，克服了现有电化学技术仅能制备4-甲基邻苯二酚与蛋白质的共价加合物的弱点；同时，通过控制制备过程通过体系的电量值可实现反应体系中醌类物质产量的控制，克服了现有碱法、酶法、过渡金属离子氧化法等技术无法控制反应体系醌类物质产量进而无法调控多酚-蛋白质共价加合物质量的缺点。此外，该制备方法不仅工艺简单，且制备过程反应时间短，具有良好的重复性和便捷性，制备成本较低，在多酚共价改性蛋白质领域具有较好的应用前景。
12、根据本专利技术的一些实施例，所述蛋白质包括β-乳球蛋白、牛血清白蛋白、乳清分离蛋白、卵清蛋白、酪蛋白、花生蛋白、大豆分离蛋白中的至少一种。
13、根据本专利技术的一些实施例，所述多酚包括咖啡酸、绿原酸、迷迭香酸、芦丁、槲皮素、木犀草素、阿魏酸、没食子酸、表没食子儿茶素没食子酸酯中的至少一种。
14、根据本专利技术的一些实施例，所述游离巯基与所述多酚的摩尔比为1：0.5～20。例如：可以为1：0.5、1：1、1：2、1：3、1：4、1：5、1：6、1：7、1：8、1：9、1：10、1：11、1：12、1：13、1：14、1：15、1：16、1：17、1：18、1：19或1：20。
15、根据本专利技术的一些实施例，所述蛋白质的反应浓度为5mg/ml～15mg/ml。例如：可以为5mg/ml、6mg/ml、7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml、10mg/ml、11mg/ml、12mg/ml、13mg/ml、14mg/ml或15mg/ml。
16、根据本专利技术的一些实施例，所述多酚的反应浓度为0.08mmol/l～2.00mmol/l。例如：可以为0.08mmol/l、0.1mmol/l、0.15mmol/l、0.20mmol/l、0.40mmol/l、0.60mmol/l、0.80mmol/l、1.00mmol/l、1.20mmol/l、1.40mmol/l、1.60mmol/l、1.80mmol/l或2.00mmol/l。
17、如无特殊说明，所述多酚氧化峰峰值电位均为与步骤s2中所述多酚的氧化峰峰值电位。
18、根据本专利技术的一些实施例，所述正电压电解处理的电解过程电量q＝nfn；其中，n为每分子多酚在氧化还原过程中转移的电子数，f为法拉第常数(96500c/mole)，n为期望转化为醌类物质的多酚摩尔数。所述电解过程电量与多酚初始浓度有关，同时也和期望的醌类物质产量有关。通过在玻璃碳网状电极表面施加正电压引发多酚的电子转移，通过控制电解过程的电量值，可控制多酚氧化成醌程度。由此能计算出体系中醌类物质的实时产率，进而计算得到醌类物质的产量，实现反应体系醌类物质的产量控制。
19、根据本专利技术的一些实施例，所述正电压电解处理至达设定的电解过程电量结束。所述电解过程电量为0本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种蛋白质-多酚共价加合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述蛋白质包括β-乳球蛋白、牛血清白蛋白、乳清分离蛋白、卵清蛋白、酪蛋白、花生蛋白、大豆分离蛋白中的至少一种；
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述游离巯基与所述多酚的摩尔比为1：0.5～20；
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述正电压电解处理的电解过程电量Q＝nFN；其中，n为每分子多酚在氧化还原过程中转移的电子数，F为法拉第常数，N为期望转化为醌类物质的多酚摩尔数；
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述氧化峰峰值电位的测试方法包括如下步骤：
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S1包括：采用包含第二电解液、第二参比电极、第二对电极、所述工作电极的第二三电极体系进行负电压电解处理至电流效率下降至20％以下。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述第二参比电极包括银/饱和氯化银；
8.权利要求1至7任一项所述的制备
9.权利要求1至7任一项所述的制备方法或权利要求8所述的蛋白质-多酚共价加合物在制备抗氧化剂或乳化剂中的应用。
10.权利要求1至7任一项所述的制备方法或权利要求8所述的蛋白质-多酚共价加合物在食品领域中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种蛋白质-多酚共价加合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述蛋白质包括β-乳球蛋白、牛血清白蛋白、乳清分离蛋白、卵清蛋白、酪蛋白、花生蛋白、大豆分离蛋白中的至少一种；
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述游离巯基与所述多酚的摩尔比为1：0.5～20；
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述正电压电解处理的电解过程电量q＝nfn；其中，n为每分子多酚在氧化还原过程中转移的电子数，f为法拉第常数，n为期望转化为醌类物质的多酚摩尔数；
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述氧化峰峰值电位的...
【专利技术属性】
技术研发人员：李玉婷，叶锦顺，温金曲，翁振钊，刘晓珍，余祥英，刘丰源，闫景坤，李琳，
申请(专利权)人：东莞理工学院，
类型：发明
国别省市：
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