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【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药领域,具体涉及具有延缓皮肤光老化和抑制炎症功效的中华枸杞水提物制备与应用。
技术介绍
1、已有宁夏枸杞提取物制备方法:将宁夏枸杞捣碎,在80℃、料液比1∶80(g/ml)、提取时间3h条件下,提取3次。合并提取液,并采用多级闪蒸器浓缩。浓缩得到的提取物经冷冻干燥后置-20℃冰箱中,保存备用,使用前生理盐水溶解(胡馨予,卢文倩,孙晓琪,等.宁夏枸杞水提物对四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠的降糖作用[j].食品与生物技术学报,2019,38(03):91-96.)。
2、已有黑果枸杞提取物制备方法:将黑果枸杞于40℃鼓风干燥箱中烘干12h,粉碎,过60目筛;使用全自动溶剂萃取仪进行萃取:萃取温度为50℃,萃取压力8mpa,萃取时间5min,循环2次,乙醇浓度70%,涡旋浓缩模块对萃取完成后的样品溶液进行定量浓缩,得到黑果枸杞提取萃取浓缩液;将浓缩液在-80℃冰箱中预冻24h,真空冷冻干燥48h得到黑果枸杞提取物,将提取物研磨成粉末,粉末细腻,紫黑色,该提取物花青素含量为39.19mg/g(王青霞,李建颖,杨航.黑果枸杞提取物泡腾片的制备及其质量评价[j].天然产物研究与开发,2019,31(06):1030-1037.doi:10.16333/j.1001-6880.2019.6.017.)。
3、已有黑果枸杞水提液制备方法:取洗净晾干的样品50g充分破碎后盛于烧杯中,按固液比1∶5(g/ml)加入蒸馏水,于25℃左右浸提12h后移取上清液待用,再加入蒸馏水冷浸,如此反复3次,将3次所得浸提液合并,于
4、已有黑果枸杞醇提液制备方法:取洗净晾干的样品50g充分破碎后盛于烧杯中,按固液比1∶5(g/ml)加入95%的乙醇,于25℃左右浸提12h后移取上清液待用,再加入乙醇冷浸,反复3次,将3次所得浸提液混合,真空浓缩,得到一定体积的浓缩液,加95%的乙醇并定容至50ml,得到质量浓度为1g/ml的黑果枸杞乙醇提取液(向延菊,白红进,张美娥,等.黑果枸杞果实提取物的抑菌效果研究[j].食品研究与开发,2016,37(01):26-29.)。
5、现有技术的缺点如下:
6、冷冻干燥优点:枸杞含糖量较高,真空冷冻干燥技术可以最大限度保持枸杞果中的活性成分,提高样品品质,经预实验发现此方法适用于本次实验,因此选择真空冷冻干燥法对超声后的浓缩水提物进行干燥处理备用。
7、超声波提取优点:超声波提取法可以加速萃取效率,具有高效率、省时、操作简单、节能环保等优势,利用此方法选出适合的温度、时间、料液比以及功率进行超声提取,最大限度提取出活性成分,防止活性成分流失或被破坏。
8、旋转蒸发仪浓缩优点:可以快速且温和地对样品进行蒸馏,操作简单。在液体样品与蒸发瓶间的向心力和摩擦力的作用,液体样品在蒸发瓶内表面形成一层液体薄膜,受热面积大;样品旋转所产生的作用力可以有效抑制样品的沸腾。
技术实现思路
1、本专利技术在超声提取前后运用两次冷冻干燥,避免反复浸提,通过本专利技术方法获得的中华枸杞水提物具有良好的延缓皮肤光老化和抑制炎症的功效。在以下实验中取得了良好的效果:hacat细胞活力、ros水平、炎症因子il-1、il-6、nf-кb、胞内tnf-α、mmp水平、3d模型细胞活力及组织形态效果。
2、本专利技术提供一种具有延缓皮肤光老化和抑制炎症功效的中华枸杞水提物的制备方法,其包括如下步骤:
3、s1将中华枸杞鲜果剪碎后速冻;
4、s2进行冷冻干燥;
5、s3磨粉后过筛得到枸杞粉;
6、s4枸杞粉与水按进行超声提取有效物质即可。
7、优选地,s1中的鲜果是选择完整、表皮无破损、颜色及尺寸在正常范围内的鲜果,摘除根茎,清洗晾干备用;s1中的速冻为液氮速冻。
8、另外优选地,s2中冷冻干燥是经过-40℃至-50℃,压强80-120pa,冷冻干燥至果实为酥脆状态,例如冷冻干燥25-35小时,具体如30小时。
9、在具体实施方式中,s3中磨粉过50目筛。
10、还优选地,s4中超声条件为:60 -100%超声功率下,按1:25至1:40g/ml料液比,温度为60-70℃。
11、进一步优选地,s4中超声条件为:80%超声功率下,按1:35g/ml料液比,温度为65℃。
12、还优选地,s4中超声时间为20-30min,例如25min。
13、任选地,还包括浓缩步骤,具体采用旋转蒸发仪浓缩、冷冻干燥,磨粉成品。
14、本专利技术还提供所述的制备方法得到的具有延缓皮肤光老化和抑制炎症功效的中华枸杞水提物。
15、本专利技术也提供所述的具有延缓皮肤光老化和抑制炎症功效的中华枸杞水提物在制备延缓皮肤光老化产品,或抑制炎症的产品中的用途,所述产品是药品,化妆品、保健品、食品或食品添加剂。
16、通过本实验方法获得的中华枸杞水提物具有良好的延缓皮肤光老化和抑制炎症的功效。将中华枸杞与宁夏枸杞、黑果枸杞水提物进行实验对比,完成了hacat细胞活力、ros水平、炎症因子il-1、il-6、nf-кb、胞内tnf-α,3d模型细胞活力及组织形态效果实验,
17、中华枸杞水提物可以保护uvb诱导的hacat细胞炎症损伤(图1,2,3):(1)经中华枸杞水提物保护干预后,hacat数量基本无变化,细胞生长曲线处于一般水平;(2)1mg/ml中华枸杞水提物保护uvb光损伤72h hacat细胞中的ros荧光强度较弱,中华枸杞水提物具有较好的抑制ros上升的效果;(3)经中华枸杞水提物处理,可以显著抑制il-1,il-6,nf–κb,胞内tnf-α的表达;(4)经125μg/ml中华枸杞水提物处理的3d模型形态变化较小,晒伤细胞数量减少效果最显著,中华枸杞水提物可以修复3d epikutis模型中的细胞损伤。
18、中华枸杞水提物可以保护uvb诱导的hff-1细胞光老化损伤(图4):(1)31.25μg/ml中华枸杞水提物保护uvb光损伤72h hff-1细胞,在第60h超过uvb刺激组,具有一定保护光老化功效性;(2)中华枸杞水提物处理组的hff-1细胞中ros含量显著下降,sod,cat活性显著增加;(3)经中华枸杞水提物处理后,细胞内col-ⅰ含量和col-ⅰ基因相对表达量显著上调;(4)经中华枸杞水提物干预,显著降低了mmp-9含量;(5)经中华枸杞水提物保护后显著下调p38 mapk、c-fos和c-jun基因表达量,推测中华枸杞水提物对mapk调本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.具有延缓皮肤光老化和抑制炎症功效的中华枸杞水提物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,S1中的鲜果是选择完整、表皮无破损、颜色及尺寸在正常范围内的鲜果,摘除根茎,清洗晾干备用;S1中的速冻为液氮速冻。
3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,S2中冷冻干燥是经过-40℃至 -50℃,压强80-120Pa,冷冻干燥至果实为酥脆状态,例如冷冻干燥25-35小时,具体如30小时。
4.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,S3中磨粉过50目筛。
5.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,S4中超声条件为:60 -100%超声功率下,按1:25至1:40 g/ ml料液比,温度为60-70℃。
6.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,S4中超声条件为:80 %超声功率下,按1:35 g/ ml料液比,温度为65℃。
7.如权利要求6所述的制备方法,其特征在于,S4中超声时间为20-30min,例如25min。
8.如权利要求1至7任一项所述的制
9.如权利要求1至8任一项所述的制备方法得到的具有延缓皮肤光老化和抑制炎症功效的中华枸杞水提物。
10.如权利要求9所述的具有延缓皮肤光老化和抑制炎症功效的中华枸杞水提物在制备延缓皮肤光老化产品,或抑制炎症的产品中的用途,所述产品是药品,化妆品、保健品、食品或食品添加剂。
...【技术特征摘要】
1.具有延缓皮肤光老化和抑制炎症功效的中华枸杞水提物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,s1中的鲜果是选择完整、表皮无破损、颜色及尺寸在正常范围内的鲜果,摘除根茎,清洗晾干备用;s1中的速冻为液氮速冻。
3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,s2中冷冻干燥是经过-40℃至 -50℃,压强80-120pa,冷冻干燥至果实为酥脆状态,例如冷冻干燥25-35小时,具体如30小时。
4.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,s3中磨粉过50目筛。
5.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,s4中超声条件为:60 -100%超声功率下,按1:25至1:40 g/ ml料液比,温度为6...
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