【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种催化琼脂糖同时生产新琼三糖和d-塔格糖的方法，属于生物催化。
技术介绍
1、琼胶寡糖是琼脂糖水解后的产物，不同聚合度的新琼寡糖的生物活性和功能具有一定差异，其中新琼三糖（na3）是较为少见的新琼寡糖，其生物活性和功能研究是当前的研究热点。
2、d-塔格糖是一种功能性单糖，是半乳糖的酮糖形式，属于低热量功能甜味剂。
3、多酶级联反应是指一种生物催化反应，通过多种酶的反应协同作用，将一个底物转化为最终产物。目前尚未见到利用多酶级联反应同时生产新琼三糖和d-塔格糖的相关报道。
技术实现思路
1、针对上述现有技术，本专利技术提供了一种催化琼脂糖同时生产新琼三糖和d-塔格糖的方法，属于生物催化
2、本专利技术是通过以下技术方案实现的：
3、一种催化琼脂糖同时生产新琼三糖和d-塔格糖的方法，如下：以琼脂糖为底物，利用α-琼胶酶agaa33、β-半乳糖苷酶bgad和l-阿拉伯糖异构酶calai同步级联催化琼脂糖反应生产新琼三糖和d-塔格糖；其中，所述α-琼胶酶agaa33的氨基酸序列如seq id no.1所示，所述β-半乳糖苷酶bgad的氨基酸序列如seq id no.2所示，所述l-阿拉伯糖异构酶calai的氨基酸序列如seq id no.3所示。
4、进一步地，具体步骤如下：向琼脂糖溶液中加入6 u/ml的α-琼胶酶agaa33、12 u/ml的β-半乳糖苷酶bgad、10 u/ml的l-阿拉伯糖异构酶
5、本专利技术的催化琼脂糖同时生产新琼三糖和d-塔格糖的方法，以来源广泛的琼脂糖为底物，加入α-琼胶酶agaa33、β-半乳糖苷酶bgad和l-阿拉伯糖异构酶calai配制多酶级联反应体系，通过多酶级联反应将底物转化为新琼三糖和d-塔格糖，多酶级联反应催化途径包括：在α-琼胶酶agaa33作用下琼脂糖转化为琼四糖；在β-半乳糖苷酶bgad作用下琼四糖转化为新琼三糖和d-半乳糖；在l-阿拉伯糖异构酶calai作用下d-半乳糖异构化为d-塔格糖。本专利技术还对反应过程中的各影响因素进行了优化，包括反应温度、ph值、各酶的加酶量、反应时间等，提高了催化效率。
6、本专利技术的催化琼脂糖同时生产新琼三糖和d-塔格糖的方法，反应条件温和，对环境友好，不但能高效制备新琼三糖，还可将价值较低的d-半乳糖转化为稀有糖d-塔格糖，完善了琼胶寡糖的制备体系，提高了资源利用率，符合琼脂糖深加工高值化综合利用的要求，具有良好的工业化应用前景。
7、本专利技术使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。
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1.一种催化琼脂糖同时生产新琼三糖和D-塔格糖的方法，其特征在于：以琼脂糖为底物，利用α-琼胶酶AgaA33、β-半乳糖苷酶BgaD和L-阿拉伯糖异构酶CaLAI同步级联催化琼脂糖反应生产新琼三糖和D-塔格糖；其中，所述α-琼胶酶AgaA33的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述β-半乳糖苷酶BgaD的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述L-阿拉伯糖异构酶CaLAI的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.根据权利要求1所述的一种催化琼脂糖同时生产新琼三糖和D-塔格糖的方法，其特征在于：向琼脂糖溶液中加入6 U/mL的α-琼胶酶AgaA33、12 U/mL的β-半乳糖苷酶BgaD、10U/mL的L-阿拉伯糖异构酶CaLAI、5 mmol/L的Ca2+和2.5 mmol/L的Mn2+，在40℃下反应24 h；所述琼脂糖溶液的浓度为3 mg/mL，琼脂糖溶液的溶剂为pH 8.0的Tris-HCl 缓冲液。
【技术特征摘要】
1.一种催化琼脂糖同时生产新琼三糖和d-塔格糖的方法，其特征在于：以琼脂糖为底物，利用α-琼胶酶agaa33、β-半乳糖苷酶bgad和l-阿拉伯糖异构酶calai同步级联催化琼脂糖反应生产新琼三糖和d-塔格糖；其中，所述α-琼胶酶agaa33的氨基酸序列如seq id no.1所示，所述β-半乳糖苷酶bgad的氨基酸序列如seq id no.2所示，所述l-阿拉伯糖异构酶calai的氨基酸序列如seq id no.3所示...
【专利技术属性】
技术研发人员：董浩，毛相朝，徐晓涵，薛长湖，孙建安，
申请(专利权)人：中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：
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