【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物应用，具体涉及一株产阿魏酸酯酶的粘液乳杆菌q2、菌悬液及制备方法和应用。
技术介绍
1、粗饲料是反刍动物重要的饲料来源，提高粗饲料消化率对反刍动物生产性能具有重要意义。饲草的消化能很大程度上取决于干物质或纤维的消化率。因此，提高粗饲料的品质和消化率一直是畜牧业关注的重要问题。
2、秸秆类粗饲料一直是畜牧业常用的原料，但由于其含有大量木质纤维素成分，在后续酶解消化或瘤胃消化的过程中具有一定的限制，在反刍动物中表现为消化率较低，对反刍动物的生产性能具有不利影响。
3、大量研究表明，植物细胞壁的酚类物质是抑制牧草消化率的主要因素。阿魏酸是植物细胞壁中广泛存在的主要酚类成分之一。其在细胞壁中主要与多糖以酯键共价交联，并以醚键或脂键与木质素组分共价交联在一起，形成阿魏酸酯键。
4、现有增加木质纤维素消化率的方法包括物理机械加工、化学处理和生物处理方式。机械加工是饲料生产中一个关键的步骤，因为它影响饲料的物理特性，易使家畜具有明显饱腹感，限制采食量。许多研究已经报道了机械处理对奶牛日粮如干草、秸秆或青贮饲料颗粒大小的影响。饲料粒度在家畜饲粮中至关重要，因为饲料中必须含有足够的物理有效中性洗涤纤维，其能刺激家畜咀嚼和分泌唾液，减少胃肠道饱腹感，但不降低消化率。化学处理主要是通过化学反应对木质纤维素的结构直接进行破坏。主要分为酸处理、碱处理。生物处理包括添加外源酶以及细菌接种处理。
5、饲喂前在纤维日粮中施用外源纤维素酶，部分中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维被水解并释放糖类和游离单体
技术实现思路
1、为获得一种产生阿魏酸酯酶的微生物，本专利技术提供了一株产阿魏酸酯酶的粘液乳杆菌q2、菌悬液及制备方法和应用，本专利技术分离获得的粘液乳杆菌q2具有产生阿魏酸酯酶的特性。
2、本专利技术提供了一株产阿魏酸酯酶的粘液乳杆菌q2，所述粘液乳杆菌于2024年01月29日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：cctcc no:m2024254。
3、所述的粘液乳杆菌q2是从瘤胃中分离得到，因此在瘤胃中的定植的可能性远高于其他外源菌株。因此，具有重大意义。
4、本专利技术还提供了一种菌悬液，所述菌悬液含有所述的粘液乳杆菌q2。
5、本专利技术还提供了所述菌悬液的制备方法，挑取粘液乳杆菌q2单菌落至mrs液体培养基中，37℃～38℃厌氧培养12h～16h，7000r/min～8000r/min离心5min～10min，收集菌体并用无菌生理盐水洗涤后重悬于去离子水中，获得菌悬液。
6、进一步地，离心条件为：8000r/min离心5min。
7、本专利技术还提供了一种发酵液，由所述的菌悬液发酵获得。
8、本专利技术还提供了所述发酵液的制备方法，按照2％～3％的接种量将菌悬液接种至液体发酵产酶培养基中，37℃～38℃厌氧发酵2d～2.5d，获得发酵液；
9、所述液体发酵产酶培养基为：mrs培养基不加葡萄糖，灭菌降温至58℃～62℃加入含有二甲基甲酰胺的阿魏酸甲酯溶液。
10、进一步地，所述液体发酵产酶培养基为：mrs培养基不加葡萄糖，灭菌降温至60℃左右加入含有1％w/v二甲基甲酰胺的50ml/l阿魏酸甲酯溶液。
11、进一步地，所述菌悬液接种量为2％，发酵条件为37℃厌氧发酵2d。
12、本专利技术还提供了一种生产阿魏酸酯酶的方法，将所述的粘液乳杆菌q2培养离心后用去离子水重悬获得菌悬液，然后将菌悬液接种到液体发酵产酶培养基中厌氧发酵获得发酵液，离心后取上清液为粗酶液。
13、本专利技术还提供了一种所述的产阿魏酸酯酶的粘液乳杆菌q2、所述的菌悬液或所述的发酵液在制备阿魏酸酯酶中的应用。
14、本专利技术还提供了一种所述的产阿魏酸酯酶的粘液乳杆菌q2、所述的菌悬液或所述的发酵液在食品
中的应用。
15、与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
16、1、本专利技术分离、筛选获得一种粘液乳杆菌q2，保藏编号为：cctcc no:m2024254，在固体平板上培养出现透明圈，透明圈直径为7.94±1.60mm，通过检测发现，透明圈为产生的阿魏酸酯酶，通过粘液乳杆菌q2发酵获得粗酶液，检测发现其阿魏酸酯酶活性为0.50±0.10mu/ml。
17、本专利技术分离获得的粘液乳杆菌q2是一种乳酸菌，是从瘤胃中分离得到，因此在瘤胃中的定植的可能性远高于其他外源菌株。乳酸菌作为一种肠道益生菌能起到平衡作用，其产生的阿魏酸酯酶对摄入的饲料产生作用，能够起到调节肠道和促进消化的作用。
18、2、粘液乳杆菌q2具有产阿魏酸酯酶的功能，因此可利用该菌产生的阿魏酸酯酶，对农业废弃物，如秸秆等进行发酵，从而获取农业废弃物中的阿魏酸，阿魏酸具有抗氧化性能，能够用于化妆品、保健品等产品的制造。
19、3、根据植物细胞壁中木质纤维素的结构特点，阿魏酸酯酶可打破其中的阿魏酸酯键，从而破环细胞壁，得以提升反刍动物的消化率，达到高效利用粗饲料的目的。因此，本专利技术的粘液乳杆菌q2可通过以下两种方式实现应用：
20、①将该菌株喷洒在粗饲料(如秸秆)上，通过密封等方式形成厌氧环境，通过一定时间的发酵，使菌株通过乳杆菌和阿魏酸酯酶的双重特性，达到改善饲料品质，提高动物对粗饲料利用率的目的。
21、②将该菌株对动物进行直接饲喂，发挥其分离自瘤胃的优势，使其在瘤胃定植，在瘤胃中产生影响，以提升动物的消化率和改善瘤胃健康。
22、生物材料保藏信息说明
23、q2，在本申请中称作粘液乳杆菌q2，已于2024年01月29日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：cctcc no:m 2024254，保藏单位地址是中国.武汉.武汉大学，邮编：430072，分类命名为：粘液乳杆菌q2limosilactobacillus mucosae q2。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一株产阿魏酸酯酶的粘液乳杆菌Q2，其特征在于，所述粘液乳杆菌于2024年01月29日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO:M2024254。
2.一种菌悬液，其特征在于，所述菌悬液含有权利要求1所述的粘液乳杆菌Q2。
3.一种权利要求2所述菌悬液的制备方法，其特征在于，挑取粘液乳杆菌Q2单菌落至MRS液体培养基中，37℃～38℃厌氧培养12h～16h，7000r/min～8000r/min离心5min～10min，收集菌体并用无菌生理盐水洗涤后重悬于去离子水中，获得菌悬液。
4.根据权利要求3所述的菌悬液的制备方法，其特征在于，离心条件为：8000r/min离心5min。
5.一种发酵液，其特征在于，由权利要求2所述的菌悬液发酵获得。
6.一种权利要求5所述发酵液的制备方法，其特征在于，按照2-3％的接种量将菌悬液接种至液体发酵产酶培养基中，37℃～38℃厌氧发酵2d～2.5d，获得发酵液；
7.根据权利要求6所述的发酵液的制备方法，其特征在于，所述菌悬液接种量为2％～3％，发酵条件
8.一种生产阿魏酸酯酶的方法，其特征在于，将权利要求1所述的粘液乳杆菌Q2培养离心后用去离子水重悬获得菌悬液，然后将菌悬液接种到液体发酵产酶培养基中厌氧发酵获得发酵液，离心后取上清液为粗酶液。
9.一种权利要求1所述的产阿魏酸酯酶的粘液乳杆菌Q2、权利要求2所述的菌悬液或权利要求5所述的发酵液在制备阿魏酸酯酶中的应用。
10.一种权利要求1所述的产阿魏酸酯酶的粘液乳杆菌Q2、权利要求2所述的菌悬液或权利要求5所述的发酵液在食品技术领域中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一株产阿魏酸酯酶的粘液乳杆菌q2，其特征在于，所述粘液乳杆菌于2024年01月29日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：cctcc no:m2024254。
2.一种菌悬液，其特征在于，所述菌悬液含有权利要求1所述的粘液乳杆菌q2。
3.一种权利要求2所述菌悬液的制备方法，其特征在于，挑取粘液乳杆菌q2单菌落至mrs液体培养基中，37℃～38℃厌氧培养12h～16h，7000r/min～8000r/min离心5min～10min，收集菌体并用无菌生理盐水洗涤后重悬于去离子水中，获得菌悬液。
4.根据权利要求3所述的菌悬液的制备方法，其特征在于，离心条件为：8000r/min离心5min。
5.一种发酵液，其特征在于，由权利要求2所述的菌悬液发酵获得。
6.一种权利要求5所述发酵...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈勇，邱明新，刘建成，刘孟健，王蕾，李露宇，陈炳龙，
申请(专利权)人：新疆农业大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。