System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 制备免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件的方法及应用技术_技高网

制备免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件的方法及应用技术

技术编号:42733036 阅读:1 留言:0更新日期:2024-09-18 13:30
本发明专利技术公开了制备免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件的方法及应用,其中,该方法包括:在不锈钢片表面形成金膜,以便得到复合基板;将所述复合基板与多巴胺接触,进行氧化自聚合反应,以便使多巴胺结合到所述复合基板的表面,以便得到多巴胺修饰的基板;将所述多巴胺修饰的基板与式I所述的聚合物进行加成反应,以便聚合物与多巴胺结合,得到聚合物修改的基板;将所述聚合物修改的基板与链霉亲和素进行点击反应,以便使所述链霉亲和素结合到所述聚合物上,得到结合链霉亲和素的基板;以及将所述结合链霉亲和素的基板与结合生物素的靶向结合玉米赤霉烯酮类化合物的单克隆抗体接触,进行所述链霉亲和素与所述生物素结合反应,以便使所述单克隆抗体结合到所述基板上,获得所述免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件。该制备方法具有绿色,简便,高效,条件温和的特点,并且制备得到的质谱元件对玉米赤霉烯酮类化合物的特异性好,吸附量大。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分析化学领域,具体地,涉及用于一种免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件的制备。


技术介绍

1、存在于食品基质中的玉米赤霉烯酮及其代谢物对人和动物是有害的。因此,有必要准确、快速地监测玉米赤霉烯酮及其代谢物水平。质谱(ms)由于高灵敏度和高选择性,可以同时监测多个分析物。然而,使用商用质谱离子源进行检测时,基质和靶标往往共电离,导致明显的离子抑制或增强,检测结果不准确。因此,有必要提高质谱离子源对目标分析的选择性和灵敏度。在复杂基质中,现有的离子源电离基板往往存在非特异性吸附强,选择差的缺陷。

2、聚乙二醇(peg)及其衍生物具有较好的亲水性和生物相容性。一方面,peg可为基板表面提供抗污性。peg可以通过水化作用帮助界面抵抗来自基质中蛋白质的非特异性吸附。另一方面,peg具有易修饰的特点,不同结构的peg衍生物可以被设计出来。因此peg及其衍生物可以作为识别分子的固定的良好的工具。

3、由此,利用peg及其衍生物的离子源电离基板有待研究。


技术实现思路

1、本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此,本专利技术的一个目的在于制备免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件的方法。本专利技术实施例的制备方法首先采用氧化自聚合的方式在不锈钢基板表面修饰了聚多巴胺作为修饰的基础,进而采用新型的4臂peg衍生物(nh2hcl-4armpeg10k-(mtz)3)(即式i所示化合物)作为连接分子。其中,该分子中的氨基可以通过加成反应与不锈钢基板表面的聚多巴胺相连接。此外,分子中的四嗪基团可以通过点击反应快速的与链霉亲和素偶联。本专利技术实施例制备的质谱元件作为能够识别目标化合物及其代谢物的广谱性抗体用作识别工具,并通过生物素-链霉亲和素相互作用将抗体修饰于基板表面。本专利技术中多臂结构的peg可以提供更多的修饰位点,提高sa的修饰量,且长臂结构可以促进抗体与目标之间的相互作用。

2、根据本专利技术的一个方面,本专利技术提供了一种制备免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件的方法。根据本专利技术的实施例,该方法包括:

3、在不锈钢片表面形成金膜,以便得到复合基板;

4、将所述复合基板与多巴胺接触,进行氧化自聚合反应,以便使多巴胺结合到所述复合基板的表面,以便得到多巴胺修饰的基板;

5、将所述多巴胺修饰的基板与式i所述的聚合物进行加成反应,以便聚合物与多巴胺结合,得到聚合物修改的基板,其中,式i所述的聚合物结构如下:

6、

7、其中,n为自然数;

8、将所述聚合物修改的基板与链霉亲和素进行点击反应,以便使所述链霉亲和素结合到所述聚合物上,得到结合链霉亲和素的基板;以及将所述结合链霉亲和素的基板与结合生物素的靶向结合玉米赤霉烯酮类化合物的单克隆抗体接触,进行所述链霉亲和素与所述生物素结合反应,以便使所述单克隆抗体结合到所述基板上,获得所述免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件。

9、根据本专利技术实施例的制备免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件的方法,采用氧化自聚合的方式在不锈钢基板表面修饰聚多巴胺,具有绿色,简便,高效,条件温和的特点,从而可以解决传统表面修饰技术的缓慢,有机试剂消耗多,表面修饰的位点少等不足,并且,聚多巴胺表面的儿茶酚基团可以为进一步修饰提供丰富的位点;式i所示的聚合物具有氨基和四嗪两种官能团,氨基可以在常温下与儿茶酚发生加成反应从而简便的与聚多巴胺相连接,四嗪基团可以与sa-tco发生快速的无铜的点击反应从而将链霉亲和素(sa)修饰于基板表面,与传统的表面修饰生物分子的技术相比,该策略无需活化基团,绿色快速高效,并且,该聚合物能够提供亲水性和空间位阻,从而有助于基板抵抗来自基质中的非特异性吸附,与单链结构的peg相比,本专利技术中用到的聚合物的长臂和多支结构可以偶联更多的sa,从而可以偶联更多的抗体以富集足够多的目标物,并提高分析的灵敏度。

10、另外,根据本专利技术上述实施例的制备免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件的方法,还可以具有如下附加的技术特征:

11、根据本专利技术的实施例,所述金膜的厚度为15-25nm。

12、根据本专利技术的实施例,所述不锈钢片为三角形。

13、根据本专利技术的实施例,式i所述的聚合物的分子量为9000-11000da。

14、根据本专利技术的实施例,所述链霉亲和素为反式环辛烯-链霉亲和素。

15、根据本专利技术的实施例,式i所述的聚合物、所述反式环辛烯-链霉亲和素与所述结合玉米赤霉烯酮类化合物的单克隆抗体的质量比为35-45:3-5:1,优选地,为40:4:1。

16、根据本专利技术的实施例,式i所述的聚合物的溶剂为tris-hcl缓冲液,ph=8.5。

17、根据本专利技术的实施例,所述氧化自聚合反应是在室温条件下进行的,时间为5-7小时。

18、根据本专利技术的实施例,所述加成反应是在室温条件下进行的,时间为3-4小时。

19、根据本专利技术的实施例,所述点击反应是在室温条件下进行的,时间为15-25分钟。

20、根据本专利技术的实施例,所述结合反应是在室温条件下进行的,时间为1.5-2.5小时。

21、根据本专利技术的实施例,所述玉米赤霉烯酮类化合物为玉米赤霉烯酮(zen),α-玉米赤霉烯醇(α-zel),β-玉米赤霉烯醇(β-zel),α-玉米赤霉醇(α-zal)和β-玉米赤霉醇(β-zal)中的至少一种。

22、根据本专利技术的另一方面,本专利技术提供了一种免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件。根据本专利技术的实施例,所述质谱元件是利用前述的制备免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件的方法制备得到的。由此,该质谱元件对玉米赤霉烯酮类化合物的特异性好,吸附量大,并且,吸附速度快。

23、根据本专利技术的实施例,所述质谱元件的水接触角为5-10°。

24、根据本专利技术的另一方面,本专利技术提供了一种质谱仪。根据本专利技术的实施例,该质谱仪包括:质谱检测器,所述质谱检测器包括进样口;以及前述免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件,所述质谱元件与所述进样口相对设置。由此,检测速度快,灵敏度高。

25、根据本专利技术的实施例,所述质谱元件的顶角与所述进样口相对设置。

26、根据本专利技术的实施例,所述质谱检测器为敞开式电离质谱。

27、根据本专利技术的另一方面,本专利技术提供了前述免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件和前述质谱仪在检测玉米赤霉烯酮类化合物含量中的用途。由此,该质谱元件对玉米赤霉烯酮类化合物的特异性好,吸附量大,并且,吸附速度快。

28、根据本专利技术的实施例,所述玉米赤霉烯酮类化合物为玉米赤霉烯酮(zen),α-玉米赤霉烯醇(α-zel),β-玉米赤霉烯醇(β-zel),α-玉米赤霉醇(α-zal)和β-玉米赤霉醇(β-zal)中的至少一种。

29、本专利技术的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出,部分将从下面的描述中变得明显,或通过本专利技术的实践本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种制备免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件的方法,包括:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述金膜的厚度为15-25nm,

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述链霉亲和素为反式环辛烯-链霉亲和素,

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述氧化自聚合反应是在室温条件下进行的,时间为5-7小时;

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述玉米赤霉烯酮类化合物为玉米赤霉烯酮(ZEN),α-玉米赤霉烯醇(α-ZEL),β-玉米赤霉烯醇(β-ZEL),α-玉米赤霉醇(α-ZAL)和β-玉米赤霉醇(β-ZAL)中的至少一种。

6.一种免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件,其特征在于,所述质谱元件是利用权利要求1-5任一项所述的制备免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件的方法制备得到的。

7.根据权利要求6所述的质谱元件,其特征在于,所述质谱元件的水接触角为5-10°。

8.一种质谱仪,其特征在于,包括:

9.根据权利要求8所述的质谱仪,其特征在于,所述质谱元件的顶角与所述进样口相对设置。

10.根据权利要求8所述的质谱仪,其特征在于,所述质谱检测器为敞开式电离质谱。

...

【技术特征摘要】

1.一种制备免疫分离电离玉米赤霉烯酮的质谱元件的方法,包括:

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述金膜的厚度为15-25nm,

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述链霉亲和素为反式环辛烯-链霉亲和素,

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述氧化自聚合反应是在室温条件下进行的,时间为5-7小时;

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述玉米赤霉烯酮类化合物为玉米赤霉烯酮(zen),α-玉米赤霉烯醇(α-zel),β-玉米赤霉烯醇(β-zel),α-玉米赤霉醇(α-za...

【专利技术属性】
技术研发人员:张峰陈凤明杨敏莉王秀娟
申请(专利权)人:中国检验检疫科学研究院
类型:发明
国别省市:

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