【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物检测领域，涉及一种小分子荧光探针，具体涉及多色荧光响应rna适配体探针及其用途。
技术介绍
1、荧光rna适配体是利用小分子荧光探针为配体并且通过进行数富集进行配体进化(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,selex)技术对1014～1015条rna序列进行筛选，得到一系列能够诱导小分子荧光探针发射荧光的rna序列。rna适配体能够与小分子荧光探针特异性地相互作用，形成一个荧光复合物。
2、rna适配体和小分子荧光探针复合物的发光具有荧光响应性，即小分子荧光探针本身不发光，只有在与rna适配体结合时才发光。这种条件性发光特点可有效克服在生物体内一直发光而导致的高背景的问题。此外，由于rna适配体和小分子荧光探针是非共价结合，因此通过对小分子进行改造，可使其发射不同荧光。
3、在过去的十年中，研究人员开发了多种基于rna适配体的荧光体系，但其荧光颜色覆盖了大部分在绿色或者黄色的可见光谱，但由于光波长较短，穿透性差，无法有效用于组织或者活体成像方面的用途。
4、由于在近红外光谱范围内，生物体、生物组织、水都有较低的吸收和低自荧光，辐射穿透生物组织时的损耗低，利于光子在生物体内传播。此外，近红外光自身荧光低、低光漂白和低光毒性，与紫外光和可见激发光相比，在生物成像中具有明显的优势。
5、此外，由于rna适配体和小分子荧光探针复合物具有高灵敏度，低成本，操作便捷，结果可视化等优点，被广泛开发为
6、综上所述，在现有的报道中，基于rna适配体的荧光体系少有能达到红色甚至是近红外光谱范围，或因其荧光强度和量子产率较低，无法较好的应用于生物成像。因此，急需开发具有更长波谱范围的rna适配体和小分子荧光探针复合物，用于生物传感器的开发，从而实现生物体内rna或小分子代谢物的成像研究。
技术实现思路
1、为了解决上述问题，本专利技术的目的在于提供一种多色荧光响应rna适配体探针，该多色荧光响应rna适配体探针可以结合生物传感器分子，从而用于组织成像或者活体成像的检测。
2、本专利技术的另一目的在于提供多色荧光响应rna适配体探针在制备特异性检测细胞环境中非编码rna、代谢物，以及监测细胞中代谢物的合成的成像用复合体中的用途。
3、为了实现上述目的，本专利技术提供一种多色荧光响应rna适配体探针，该探针如式(i)所示：
4、
5、其中，d为单环芳亚基、单环杂芳亚基、单环芳基、或单环杂芳基中的一种或者两种稠合组成的具有2-3个环结构的芳香亚基；
6、a为醛基、氰基、酮羰基、羧基、酯基、羟肟基、单环芳亚基、单环杂芳亚基、单环芳基、或单环杂芳基中的一种或者两种稠合组成的具有2-3个环结构的芳香亚基；
7、r为氢、甲基、三氟甲基、5-甲基苯并咪唑、1-10个碳的直链或支链烷基或改性烷基。
8、如上所述地，所述d和a中的芳香环上的氢原子独立地被卤原子、羟基、氨基、伯氨基、仲胺基、甲氧基、硝基、醛基、羧基、氰基、1-8个碳的直链或支链烷基和改性烷基取代。
9、如上所述地，所述的改性烷基链中的任意碳原子被卤原子、氧原子、硫原子、羟基、氨基、伯氨基、仲胺基、甲氧基、硝基、醛基、羧基、氰基、含氧杂环、含氮杂环、不饱和双键、三键中的至少一种基团取代。
10、优选地，所述d为所述a为
11、优选地，所述r为
12、本专利技术还提供上述的多色荧光响应rna适配体探针在制备细胞环境中或生物体内用于发光的荧光复合体中的用途。
13、本专利技术还提供上述的多色荧光响应rna适配体探针在制备特异性检测细胞环境中非编码rna、代谢物，以及监测细胞中代谢物的合成的荧光复合体中的用途。
14、如上所述地，所述复合体由所述多色荧光响应rna适配体探针和含有squash的序列组成；其中，该含有squash的序列为seq id no.1、seq id no.2或seq idno.3所示序列。
15、如上所述地，所述复合体在红色及近红外光谱区发光。
16、本专利技术的有益效果在于：
17、本专利技术提供一种多色荧光响应rna适配体探针及其用途。该多色荧光响应rna适配体探针通过结合含有squash的序列，从而在红色及近红外光谱区域示踪非编码rna或小分子代谢物，且不需要昂贵的仪器设备；灵敏度高，信噪比高，能够在单细胞水平示踪靶标物；特异性好，检测方法方便快捷。本专利技术提供的生物传感器分子能够较好的区分靶标物和非靶标物；应用广泛，近红外光自身荧光低、低光漂白和低光毒性，与紫外光和可见激发光相比，在活体成像中具有明显的优势，对于研究疾病的生物学机制和病理进展具有重要意义，并为疾病的治疗和诊断提供关键信息。
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1.多色荧光响应RNA适配体探针，其特征在于，该探针如式(I)所示：
2.如权利要求1所述的多色荧光响应RNA适配体探针，其特征在于，所述D和A中的芳香环上的氢原子独立地被卤原子、羟基、氨基、伯氨基、仲胺基、甲氧基、硝基、醛基、羧基、氰基、1-8个碳的直链或支链烷基和改性烷基取代。
3.如权利要求1所述的多色荧光响应RNA适配体探针，其特征在于，所述的改性烷基链中的任意碳原子被卤原子、氧原子、硫原子、羟基、氨基、伯氨基、仲胺基、甲氧基、硝基、醛基、羧基、氰基、含氧杂环、含氮杂环、不饱和双键、三键中的至少一种基团取代。
4.如权利要求2所述的多色荧光响应RNA适配体探针，其特征在于，所述D为所述A为
5.如权利要求1所述的多色荧光响应RNA适配体探针，其特征在于，所述R为
6.如权利要求1至5任一项所述的多色荧光响应RNA适配体探针在制备细胞环境中或生物体内用于发光的荧光复合体中的用途。
7.如权利要求1至5任一项所述的多色荧光响应RNA适配体探针在制备特异性检测细胞环境中或生物体内非编码RNA、代谢物，以及监
8.如权利要求6或7所述的用途，其特征在于，所述复合体由所述多色荧光响应RNA适配体探针和含有Squash的序列组成；其中，该含有Squash的序列为Seq ID No.1、Seq ID No.2或Seq ID No.3所示序列。
9.如权利要求6或7所述的用途，其特征在于，所述复合体在红色及近红外光谱区发光。
...【技术特征摘要】
1.多色荧光响应rna适配体探针，其特征在于，该探针如式(i)所示：
2.如权利要求1所述的多色荧光响应rna适配体探针，其特征在于，所述d和a中的芳香环上的氢原子独立地被卤原子、羟基、氨基、伯氨基、仲胺基、甲氧基、硝基、醛基、羧基、氰基、1-8个碳的直链或支链烷基和改性烷基取代。
3.如权利要求1所述的多色荧光响应rna适配体探针，其特征在于，所述的改性烷基链中的任意碳原子被卤原子、氧原子、硫原子、羟基、氨基、伯氨基、仲胺基、甲氧基、硝基、醛基、羧基、氰基、含氧杂环、含氮杂环、不饱和双键、三键中的至少一种基团取代。
4.如权利要求2所述的多色荧光响应rna适配体探针，其特征在于，所述d为所述a为
5.如权利要求1所述的多色荧光响应...
【专利技术属性】
技术研发人员：李幸，陈威，徐存，
申请(专利权)人：中国科学院动物研究所，
类型：发明
国别省市：
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