【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及免疫组织化学技术(ihc)、免疫细胞化学技术(icc)等，特别涉及一种新型通用型免疫组化抗原修复液及其制作方法。
技术介绍
1、在病理诊断
，免疫组织化学技术、免疫细胞化学技术具有重要的辅助诊断作用，在临床应用中备受重视。其中，免疫组化技术是利用抗体和抗原之间高度特异性结合的原理，先用抗体将组织或细胞中的目的蛋白作为抗原特异性结合，再借助化学的方法将抗体结合的部位显示出来，以达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性，定位或定量的研究。而组织或细胞在进行免疫组化之前，往往会应用一些试剂(如多聚甲醛)对新鲜组织或细胞进行处理固定，组织固定过程中，甲醛与组织或细胞中的甲醛与蛋白质发生交联，形成醛交联蛋白，这种化合物封闭了抗原，使之无法表达出来。为了使免疫组化过程中更好地暴露出抗原，将其很好地显示出来，世界上公认的方法就是必须进行抗原修复。
2、抗原修复在组织或细胞免疫组化技术过程中具有极其重要的作用，是各染色技术中不可或缺的一步，通过恢复抗原的活性，可以得到准确可靠的实验结果，抗原修复结果的好坏直接决定各种染色技术结果的染色质量。至今为止，抗原修复有许多种方法，在这些方法中，有的是根据抗体的要求来进行，有的是根据抗原的表达程度来进行。常用的有热修复和酶消化修复两类，由于酶消化过程中，酶的作用极易受温度影响，如果消化不足，则无法充分暴露出抗原位点，过度的消化又会破坏组织结构，影响最后阳性信号的判读，因此在后续的发展中，酶消化法渐渐被热修复技术所替代，目前已非主要方法，比较常用的为热修复，其修复效果最为有效，且
3、热修复的基本原理是：使蛋白质处于水相环境中，加热使蛋白水解过程加速，从而打开因固定交联而形成的化学连接，暴露原先被遮蔽的抗原决定簇。决定热修复的修复效果的因素有很多，如修复液的种类、修复液ph以及修复温度等。最常用的抗原修复液有两种：柠檬酸钠缓冲液(ph＝6)和edta缓冲液(ph＝8或9)。柠檬酸钠缓冲液能够适配大部分的抗体，但由于其ph较低，整体修复效果不佳；普通edta修复液相对修复效果更强，但阳性增强的同时也会提高非特异背景，且配制普通edta修复液时，由于edta为酸性物质，通常需要用氢氧化钠调节ph，氢氧化钠为强碱，用于调节ph时，使用量不好控制，且在使用时若不小心就会对实验人员造成伤害，以及腐蚀实验室等。
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题是提供一种新型通用型抗原修复液及其制作方法，其解决柠檬酸修复效果不佳以及普通edta修复背景过重等问题。
2、本专利技术所要解决的技术问题是通过以下技术方案来实现的：
3、一种新型通用型抗原修复液，每1000ml所述新型通用型抗原修复液中包括：tris1.0～2.0g，edta-2na和/或egta0.1～0.5g，1-氨基-2-丁醇或其同分异构体50～1000μl，余量为水。
4、优选地，每1000ml所述新型通用型抗原修复液中包括：tris 1.5～1.8g，edta-2na和/或egta 0.2～0.4g，1-氨基-2-丁醇或其同分异构体200μl，余量为水。
5、优选地，所述同分异构体包括：4-氨基-1-丁醇、o-丁基羟胺、n-叔丁基羟胺、n,n二甲基羟胺、dl-2-氨基-1-丁醇、(r)-1-氨基丁-2-醇、(±)-2-氨基-1-丁醇、3-(甲氨基)-1-丙醇、n,n二甲基乙醇胺、(r)-(-)-2-氨基-1-丁醇、(s)-(+)-2-氨基-1-丁醇、(s)-1-(甲氨基)-2-丙醇、1-氨基-2-甲基-2-丙醇、dl-2-氨基-2-丁醇、2-氨基-2-甲基-1-丙醇、(r)-3-氨基丁醇、(s)-3-氨基丁醇、2-乙氧基乙胺、3-氨基正丁醇、3-甲氧基丙胺、3-胺-丁-2-醇、n-甲基乙胺、2-甲氧基-n-甲基乙胺等的任意组合。
6、优选地，所述水为去离子水。
7、一种新型通用型抗原修复液的制备方法，包括以下步骤：
8、(1)按配方量称取tris，用500ml蒸馏水将其完全溶解；
9、(2)按配方量称取edta-2na或egta，将其完全溶解于步骤(1)的溶液中；
10、(3)按配方量量取1-氨基-2-丁醇或其同分异构体溶于步骤(2)的溶液中；
11、(4)最后，用水定容至1000ml。
12、优选地，所述水为去离子水。
13、优选地，所述同分异构体包括：4-氨基-1-丁醇、o-丁基羟胺、n-叔丁基羟胺、n,n二甲基羟胺、dl-2-氨基-1-丁醇、(r)-1-氨基丁-2-醇、(±)-2-氨基-1-丁醇、3-(甲氨基)-1-丙醇、n,n二甲基乙醇胺、(r)-(-)-2-氨基-1-丁醇、(s)-(+)-2-氨基-1-丁醇、(s)-1-(甲氨基)-2-丙醇、1-氨基-2-甲基-2-丙醇、dl-2-氨基-2-丁醇、2-氨基-2-甲基-1-丙醇、(r)-3-氨基丁醇、(s)-3-氨基丁醇、2-乙氧基乙胺、3-氨基正丁醇、3-甲氧基丙胺、3-胺-丁-2-醇、n-甲基乙胺、2-甲氧基-n-甲基乙胺等的任意组合。
14、一种新型通用型抗原修复液在免疫组织化学、免疫细胞化学
中的应用。
15、一种新型通用型抗原修复液在免疫组织化染色技术中的应用。
16、本专利技术上述技术方案，具有如下有益效果：
17、(1)本专利技术的抗原修复液成分中的氨基化合物可使抗原修复更彻底；
18、(2)本专利技术提供的抗原修复液成分中的氨基化合物具有保护蛋白质和细胞膜完整性的作用，可使ihc/icc切片结果细胞形态完好；
19、(3)本专利技术提供的抗原修复液成分中的氨基化合物具有稳定溶液ph的作用，在配制抗原修复液时不需要再调节ph；
20、(4)本专利技术提供的抗原修复液成分中的egta专一性强，用于抗原修复时，修复效果更好；
21、(5)本专利技术提供的抗原修复液用于免疫组化染色时，切片染色结果强度较佳的同时背景干净。
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1.一种新型通用型抗原修复液，其特征在于，每1000mL所述新型通用型免疫组化抗原修复液中包括：Tris 1.0～2.0g；EDTA-2Na和/或EGTA0.1～0.5g；1-氨基-2-丁醇或其同分异构体50～1000μL；余量为水。
2.根据权利要求1所述的新型通用型抗原修复液，其特征在于，每1000mL所述新型通用型免疫组化抗原修复液中包括：Tris 1.5～1.8g；EDTA-2Na和/或EGTA 0.2～0.4g；1-氨基-2-丁醇或其同分异构体200μL，余量为水。
3.根据权利要求2所述的新型通用型抗原修复液，其特征在于，所述同分异构体包括：4-氨基-1-丁醇、O-丁基羟胺、N-叔丁基羟胺、N,N二甲基羟胺、DL-2-氨基-1-丁醇、(R)-1-氨基丁-2-醇、(±)-2-氨基-1-丁醇、3-(甲氨基)-1-丙醇、N,N二甲基乙醇胺、(R)-(-)-2-氨基-1-丁醇、(S)-(+)-2-氨基-1-丁醇、(S)-1-(甲氨基)-2-丙醇、1-氨基-2-甲基-2-丙醇、DL-2-氨基-2-丁醇、2-氨基-2-甲基-1-丙醇、(R)-3-氨基丁醇、
4.根据权利要求2所述的新型通用型抗原修复液，其特征在于，所述EDTA-2Na和EGTA的重量比为1:1。
5.根据权利要求1所述的新型通用型抗原修复液，其特征在于，所述水为去离子水。
6.根据权利要求1-5任一所述的新型通用型抗原修复液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
7.根据权利要求4所述的新型通用型抗原修复液的制备方法，其特征在于，所述同分异构体包括：4-氨基-1-丁醇、O-丁基羟胺、N-叔丁基羟胺、N,N二甲基羟胺、DL-2-氨基-1-丁醇、(R)-1-氨基丁-2-醇、(±)-2-氨基-1-丁醇、3-(甲氨基)-1-丙醇、N,N二甲基乙醇胺、(R)-(-)-2-氨基-1-丁醇、(S)-(+)-2-氨基-1-丁醇、(S)-1-(甲氨基)-2-丙醇、1-氨基-2-甲基-2-丙醇、DL-2-氨基-2-丁醇、2-氨基-2-甲基-1-丙醇、(R)-3-氨基丁醇、(S)-3-氨基丁醇、2-乙氧基乙胺、3-氨基正丁醇、3-甲氧基丙胺、3-胺-丁-2-醇、N-甲基乙胺、2-甲氧基-N-甲基乙胺中的一种或多种组合。
8.根据权利要求1-5任一所述的新型通用型抗原修复液在免疫组织化学(IHC)、免疫细胞化学(ICC)中的应用。
9.根据权利要求8所述的新型通用型抗原修复液在免疫组化染色中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种新型通用型抗原修复液，其特征在于，每1000ml所述新型通用型免疫组化抗原修复液中包括：tris 1.0～2.0g；edta-2na和/或egta0.1～0.5g；1-氨基-2-丁醇或其同分异构体50～1000μl；余量为水。
2.根据权利要求1所述的新型通用型抗原修复液，其特征在于，每1000ml所述新型通用型免疫组化抗原修复液中包括：tris 1.5～1.8g；edta-2na和/或egta 0.2～0.4g；1-氨基-2-丁醇或其同分异构体200μl，余量为水。
3.根据权利要求2所述的新型通用型抗原修复液，其特征在于，所述同分异构体包括：4-氨基-1-丁醇、o-丁基羟胺、n-叔丁基羟胺、n,n二甲基羟胺、dl-2-氨基-1-丁醇、(r)-1-氨基丁-2-醇、(±)-2-氨基-1-丁醇、3-(甲氨基)-1-丙醇、n,n二甲基乙醇胺、(r)-(-)-2-氨基-1-丁醇、(s)-(+)-2-氨基-1-丁醇、(s)-1-(甲氨基)-2-丙醇、1-氨基-2-甲基-2-丙醇、dl-2-氨基-2-丁醇、2-氨基-2-甲基-1-丙醇、(r)-3-氨基丁醇、(s)-3-氨基丁醇、2-乙氧基乙胺、3-氨基正丁醇、3-甲氧基丙胺、3-胺-丁-2-醇、n-甲基乙胺、2-甲氧基-n-甲基乙胺中的一种或多种组合。
4.根...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈赞烽，李妙君，鲁璐淋，林齐心，
申请(专利权)人：福州迈新生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：
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