【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中药鉴别，特别是涉及一种用于薄层色谱的分析模型及其建立方法和应用。
技术介绍
1、薄层色谱技术始于20世纪50年代，并在上世纪80年代快速推广应用。薄层色谱法是评价中药饮片真伪和中成药投料真实性的重要方法，具有操作简便、经济快速、应用广泛等优点，在中药质量标准的方法体系中具有不可替代的作用。
2、目前，薄层色谱结果评价的标准规定为：供试品色谱中，在与对照药材或对照品薄层色谱相应位置显相同颜色的斑点。但在实际应用中，由于标准规定描述较为模糊，缺乏客观、可量化的规定数值，检验人员需要依靠肉眼观察感官评价薄层色谱特征斑点的颜色等各种信息，而不同检测人员对标准的理解和评价尺度不同，因此容易造成检验结论的差异。
技术实现思路
1、针对目前薄层色谱评价标准较为模糊，缺乏客观、可量化的规定数值，常存在不同检验人员的感官评价有差异的问题，本专利技术提供一种用于薄层色谱的分析模型的建立方法，采用该方法得到的分析模型，能够以客观量化的评价方式，降低人工主观评价的结果偏差。
2、一方面，本专利技术提供了一种用于薄层色谱的分析模型的建立方法，包括斑点有无判断模型的建立方法，所述斑点有无判断模型的建立方法包括以下步骤：
3、薄层色谱图收集：收集中药品种合格品及不合格品的薄层色谱图，所述不合格品的薄层色谱图存在特征斑点的缺失，并进行特征斑点缺失和存在的记录，所述薄层色谱图包括在差异实验条件下的若干薄层色谱图，所述差异实验条件包括至少两种湿度条件、至少两种温度条
4、标准色相确定：采集所有合格品薄层色谱图中各特征斑点在hsb体系中的h值，以各合格品薄层色谱图中对应的特征斑点的h值范围作为该特征斑点的标准h值范围；
5、颜色体系及通道确定：采集所有薄层色谱图中各特征斑点所对应区域分别在rgb颜色空间中的r通道、g通道、b通道，在hsb颜色空间中的h通道、s通道、b通道和在cie-lab颜色空间中l通道、a通道、b通道中的通道数值，将所有薄层色谱图随机分为测试组和验证组，得到测试组中缺失特征斑点的通道数值范围和测试组中存在特征斑点的通道数值范围，以测试组中存在特征斑点的通道数值范围最小值为分析阈值，将验证组中特征斑点通道数值与所述分析阈值进行对比，当该特征斑点通道数值大于所述分析阈值时判定为特征斑点存在，将此判定结果与所述特征斑点缺失和存在的记录进行对比验证，以判定准确率高的通道作为该特征斑点的分析通道，并以该分析通道的分析阈值作为该特征斑点的通道判定标准；
6、建立斑点有无判断模型：所述通道判断标准与所述标准h值范围共同组成斑点有无判断标准，即得。
7、本专利技术人考虑以数字化标准规范斑点有无的识别过程，由于不同薄层色谱斑点体现出不同的颜色，而不同深浅色调的斑点难以用统一化数字标准规范，后考虑通过对比不同颜色空间中不同通道数值，以找到能够准确识别判断特定斑点有无的颜色空间通道。但后续在实践中发现，仅采用单一判断标准，容易导致明显不同色调的斑点(可能预示着成分有变化)被判定为合格，因此，经过摸索和调整，加入hsb体系中的h值作为判断前提，即首先要色调符合要求，才利用颜色空间的通道数值判断斑点有无，如h值不在标准范围，即表示色调与标准不同，则不能认为是合格斑点，即可判定为合格斑点的“缺失”。
8、通过通道判断标准与所述标准h值范围共同组成的斑点有无判断标准，能够利用数字模型准确实现斑点的判断，降低人工主观评价的结果偏差。
9、在其中一些方案中，所述特征斑点通过采用对照品或对照药材以相同条件进行薄层层析得到的对照斑点位置确定。
10、在其中一些方案中，所述特征斑点通过预设rf值区间确定，当一斑点落入所述预设rf值区间，则认为该斑点为此区间的特征斑点，所述预设rf值范围通过若干合格品薄层色谱图中对应的该特征斑点rf值范围划定。
11、可以理解的，上述确定特征斑点位置的方式，可根据具体情况选择，如考虑实现全数字化评估，避免使用对照品或对照药材，以降低检测成本或保护珍稀药材，通过若干合格品薄层色谱图中对应的该特征斑点rf值范围划定，具有明显的优势。
12、在其中一些方案中，所述通道数值经过校准，所述校准方法为：将提取得到的通道数值减去对应通道的背景值，即得。
13、在其中一些方案中，所述标准色相确定步骤中，将色调相同的特征斑点归为同一色调组，该同一色调组的各特征斑点具有共同的标准h值范围，所述共同的标准h值范围为合格品薄层色谱图中该组所有特征斑点的h值范围。优选的，判断色调是否相同的方法为：将薄层色谱图分发给至少3名检验人员，独立观察并判断特征斑点色调，当所有检验人员均判断为色调相同，则判定为色调相同，当至少1个检验人员判断结果和其他检验人员不一致，则判定为色调不相同，并进行重新分组，直至所有检验人员均对同一色调组特征斑点判断为色调相同。
14、在其中一些方案中，所述判定准确率通过以下方法计算得到：以验证组中判定结果和所述特征斑点缺失和存在的记录一致的斑点数除以验证组中总特征斑点数，即得所述判定准确率。
15、在其中一些方案中，所述特征斑点缺失和存在的判断方法为：将薄层色谱图分发给至少2名检验人员，独立观察并判断特征斑点存在或缺失，当所有检验人员均判断为存在，或至少1名检验人员判断结果和其他检验人员不一致，则判定为斑点存在，当所有检验人员均判断为缺失，则判定为斑点缺失；优选的，所述特征斑点存在包括明显可见或隐约可见，所述明显可见的标准为：当所有检验人员均判断为存在，则该特征斑点结果判定为明显可见；所述隐约可见的标准为：当至少1名检验人员判断结果和其他检验人员不一致，则该特征斑点结果判定为隐约可见。
16、在其中一些方案中，上述用于薄层色谱的分析模型的建立方法符合以下条件中的至少一种：
17、(1)所述中药品种包括中药饮片和/或中药制剂；
18、(2)所述差异实验条件还包括以下条件的至少一种：至少两种规格的薄层板、至少两个实验日期、至少两个展开时间、至少两位操作人员；
19、(3)所述特征斑点符合以下要求：
20、a：特征斑点在该中药品种的样品色谱图和对照药材或对照品色谱图中均存在，且位置对应；
21、b：特征斑点形状规则、边界清晰且稳定存在；
22、c：特征斑点的比移值为0.05～0.8，优选0.1～0.8，更优选0.2～0.8；以及
23、d：特征斑点不受阴性干扰，具有专属性。
24、在其中一些方案中，该用于薄层色谱的分析模型的建立方法还包括间距比判断模型的建立方法，所述间距比判断模型的建立方法包括以下步骤：
25、间距比判断模型建立：以中药品种合格品的薄层色谱图组成标准图谱库，挑选所述合格品的薄层色谱图中具有代表性的至少两个斑点作为分析斑点，加入或不加入原点组成特征斑点，将特征斑点进行分组，得到三个特征斑点为一组的特征斑点组，每个本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种用于薄层色谱的分析模型的建立方法，其特征在于，包括斑点有无判断模型的建立方法，所述斑点有无判断模型的建立方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，所述特征斑点通过采用对照品或对照药材以相同条件进行薄层层析得到的对照斑点位置确定；
3.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，所述通道数值经过校准，所述校准方法为：将提取得到的通道数值减去对应通道的背景值，即得；
4.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，符合以下条件中的至少一种：
5.根据权利要求1-4任一项所述的建立方法，其特征在于，还包括间距比判断模型的建立方法，所述间距比判断模型的建立方法包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的建立方法，其特征在于，符合以下条件中的至少一种：
7.根据权利要求6所述的建立方法，其特征在于，间距比判断模型建立步骤中，沿溶剂展开方向对所述特征斑点进行编号，按照以下规则分组：
8.一种薄层色谱分析模型，其特征在于，采用权利要求1-7任一项所述的用于薄层色谱的分析模型的建立方法建立
9.一种薄层色谱检测分析方法，其特征在于，取待测中药品种的薄层色谱图，采集其中各特征斑点在HSB体系中的H值以及分析通道数值，代入权利要求1-4任一项所述的建立方法得到的斑点有无判断模型，与所述斑点有无判断标准进行比较，得到斑点有无判断结果。
10.根据权利要求9所述的薄层色谱检测分析方法，其特征在于，取待测中药品种的薄层色谱图，按照权利要求5-7任一项所述的间距比判断模型的建立方法，计算相应的间距比RPf，与所述评价标准范围进行比较，得到间距比评价结果。
11.一种肉桂薄层色谱分析模型，其特征在于，通过以下方法建立：
12.根据权利要求11所述的肉桂薄层色谱分析模型，其特征在于，还包括间距比判断模型建立，所述间距比判断模型通过以下方法建立：沿溶剂展开方向，从原点依次向溶剂前沿方向对原点和各斑点进行编号，以第1、2、3、4个斑点为分析斑点，将第1、2、3个斑点分为首组，将第2、3、4个斑点分为末组，首组中以第3个斑点作为定位斑点，末组中以第2个斑点作为定位斑点，首组中，计算该第3个斑点分别与第1个斑点和第2个斑点之间的距离L-31和L-32，计算最小距离L-32与最大距离L-31之间的比值，记为间距比RPf1，末组中，计算该第2个斑点分别与第3个斑点和第4个斑点之间的距离L-23和L-24，计算最小距离L-23与最大距离L-24之间的比值，记为间距比RPf2，以该间距比RPf1和RPf2为评价指标，根据所述标准图谱库中不同薄层色谱图中各特征斑点组的间距比RPf1和RPf2，建立间距比RPf1和RPf2的评价标准范围。
13.一种肉桂薄层色谱检测分析方法，其特征在于，包括以下步骤：取按照权利要求11所述的薄层色谱检测步骤中相同方法得到的待测肉桂样品薄层色谱图，将其特征斑点的H值及L通道数值与所述标准H值范围和B通道判断标准进行比较，得到斑点有无结果；
14.一种舒胸片薄层色谱分析模型，其特征在于，以其中川芎为指标药材，通过以下方法建立：
15.根据权利要求14所述的舒胸片薄层色谱分析模型，其特征在于，还包括间距比判断模型，所述间距比判断模型通过以下方法建立：沿溶剂展开方向，从原点依次向溶剂前沿方向对原点和各斑点进行编号，以第4、5、6个斑点为分析斑点，并以此三个分析斑点作为特征斑点分组，以第4个斑点作为定位斑点，计算该第4个斑点分别与第5个斑点和第6个斑点之间的距离L-45和L-46，计算最小距离L-45与最大距离L-46之间的比值，记为间距比RPf3，以该间距比RPf3为评价指标，根据所述标准图谱库中不同薄层色谱图中各特征斑点组的间距比RPf3，建立间距比RPf3的评价标准范围。
16.一种舒胸片薄层色谱检测分析方法，其特征在于，包括以下步骤：取按照权利要求14所述的薄层色谱检测步骤中相同方法得到的待测舒胸片样品薄层色谱图，将其特征斑点的H值及B通道数值与所述标准H值范围和B通道判断标准进行比较，得到斑点有无结果；
17.一种心宁片薄层色谱分析模型，其特征在于，以其中三七为指标药材，通过以下方法建立：
18.根据权利要求17所述的心宁片薄层色谱分析模型，其特征在于，还包括间距比判断模型，所述间距比判断模型通过以下方法建立：沿溶剂展开方向，从原点依次向溶剂前沿方向对原点和各斑点进行编号，以第2、4、5、6、8、9个斑点为分析斑点，将第2、4、5个斑点分为首组，将第6、8、9个斑点分为末组，第4、5、6个斑点为中间组，首组中...
【技术特征摘要】
1.一种用于薄层色谱的分析模型的建立方法，其特征在于，包括斑点有无判断模型的建立方法，所述斑点有无判断模型的建立方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，所述特征斑点通过采用对照品或对照药材以相同条件进行薄层层析得到的对照斑点位置确定；
3.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，所述通道数值经过校准，所述校准方法为：将提取得到的通道数值减去对应通道的背景值，即得；
4.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，符合以下条件中的至少一种：
5.根据权利要求1-4任一项所述的建立方法，其特征在于，还包括间距比判断模型的建立方法，所述间距比判断模型的建立方法包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的建立方法，其特征在于，符合以下条件中的至少一种：
7.根据权利要求6所述的建立方法，其特征在于，间距比判断模型建立步骤中，沿溶剂展开方向对所述特征斑点进行编号，按照以下规则分组：
8.一种薄层色谱分析模型，其特征在于，采用权利要求1-7任一项所述的用于薄层色谱的分析模型的建立方法建立得到。
9.一种薄层色谱检测分析方法，其特征在于，取待测中药品种的薄层色谱图，采集其中各特征斑点在hsb体系中的h值以及分析通道数值，代入权利要求1-4任一项所述的建立方法得到的斑点有无判断模型，与所述斑点有无判断标准进行比较，得到斑点有无判断结果。
10.根据权利要求9所述的薄层色谱检测分析方法，其特征在于，取待测中药品种的薄层色谱图，按照权利要求5-7任一项所述的间距比判断模型的建立方法，计算相应的间距比rpf，与所述评价标准范围进行比较，得到间距比评价结果。
11.一种肉桂薄层色谱分析模型，其特征在于，通过以下方法建立：
12.根据权利要求11所述的肉桂薄层色谱分析模型，其特征在于，还包括间距比判断模型建立，所述间距比判断模型通过以下方法建立：沿溶剂展开方向，从原点依次向溶剂前沿方向对原点和各斑点进行编号，以第1、2、3、4个斑点为分析斑点，将第1、2、3个斑点分为首组，将第2、3、4个斑点分为末组，首组中以第3个斑点作为定位斑点，末组中以第2个斑点作为定位斑点，首组中，计算该第3个斑点分别与第1个斑点和第2个斑点之间的距离l-31和l-32，计算最小距离l-32与最大距离l-31之间的比值，记为间距比rpf1，末组中，计算该第2个斑点分别与第3个斑点和第4个斑点之间的距离l-23和l-24，计算最小距离l-23与最大距离l-24之间的比值，记为间距比rpf2，以该间距比rpf1和rpf2为评价指标，根据所述标准图谱库中不同薄层色谱图中各特征斑点组的间距比rpf1和rpf2，建立间距比rpf1和rpf2的评价标准范围。
13.一种肉桂薄层色谱检测分析方法，其特征在于，包括以下步骤：取按照权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员：马双成，苏畅，王淑红，王冰，谷丽菲，关潇滢，王晓炜，康帅，郭巧技，李君瑶，江玲玲，
申请(专利权)人：深圳市药品检验研究院深圳市医疗器械检测中心，
类型：发明
国别省市：
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