【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，具体涉及一种h5-re11疫苗毒株血凝素蛋白的单克隆抗体及其识别表位的应用。
技术介绍
1、禽流感是由a型流感病毒引起的一种禽类传染病，亚型众多、宿主广泛且危害严重。根据流感病毒粒子表面糖蛋白血凝素(ha)和神经氨酸酶(na)的抗原性和基因特性，a型流感病毒可分为18种ha亚型和11种na亚型。在众多亚型中，h5亚型高致病性禽流感病毒的危害最大。据统计，自2004年起，我国有超过3600万只家禽因防控h5亚型禽流感被扑杀，给家禽养殖业造成了巨大的经济损失。h5亚型禽流感病毒不仅能够造成禽类大量死亡，还能够突破种间屏障感染人类。据世界卫生组织(who)统计，截止到2024年2月26日，已有887人感染h5n1亚型禽流感病毒，462人死亡，死亡率高达52％。
2、目前，疫苗免疫是防控禽流感的最有效手段。流感病毒在流行过程中，极易发生变异形成新的抗原群。为了防控h5亚型禽流感，国家禽流感参考实验室每隔几年就需要更新疫苗株，以匹配最新的流行毒株，使疫苗达到最佳的保护效果。针对当前流行的2.3.4.4分支h5亚型禽流感病毒抗原性特点，国家禽流感参考实验室更新了h5-re8、h5-re11、h5-re13和h5-re14系列疫苗。但是，疫苗的更新总是滞后于病毒的进化，如果能够开发出一种针对2.3.4.4分支h5亚型禽流感病毒的广谱性疫苗，将极大提高疫苗免疫防护水平，降低h5亚型禽流感变异病毒引发疫情发生的频率。
技术实现思路
1、本专利技术公开了一种h5-re1
2、本专利技术的技术方案如下：
3、分泌h5-re11疫苗毒株血凝素蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，所述杂交瘤细胞株是杂交瘤细胞株2d7，所述杂交瘤细胞株2d7保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmcc no.45926，保藏时间为2024年4月24日；或者，所述杂交瘤细胞株是杂交瘤细胞株3c8，所述杂交瘤细胞株3c8保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmcc no.45927，保藏时间为2024年4月24日。
4、h5-re11疫苗毒株血凝素蛋白的单克隆抗体，所述单克隆抗体为2d7，所述单克隆抗体2d7由杂交瘤细胞株2d7分泌产生，所述杂交瘤细胞株2d7的保藏编号为cgmccno.45926，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏时间为2024年4月24日，所述单克隆抗体2d7的重链可变区核苷酸序列如seq id no.1所示，重链可变区氨基酸序列如seq id no.2所示，轻链可变区核苷酸序列如seq id no.3所示，轻链可变区氨基酸序列如seq id no.4所示；或者所述单克隆抗体为单克隆抗体3c8，所述单克隆抗体3c8由杂交瘤细胞株3c8分泌产生，所述杂交瘤细胞株3c8保藏编号为cgmcc no.45927，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏时间为2024年4月24日，所述单克隆抗体3c8的重链可变区核苷酸序列如seq id no.5所示，重链可变区氨基酸序列如seq idno.6所示，轻链可变区核苷酸序列如seq id no.7所示，轻链可变区氨基酸序列如seq idno.8所示。
5、进一步的，所述单克隆抗体2d7识别的关键抗原表位为h5-re11血凝素蛋白131位点的谷氨酰胺和136位点的精氨酸，所述单克隆抗体3c8识别的关键抗原表位为h5-re11血凝素蛋白172位点的丙氨酸。
6、所述h5-re11疫苗毒株血凝素蛋白的单克隆抗体在制备h5亚型禽流感疫苗中的应用。
7、一种人工重组禽流感病毒，所述人工重组禽流感病毒命名为禽流感病毒h5-re11+3，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmcc no.45965，保藏时间为2024年4月24日。
8、一种用于防治h5亚型禽流感病毒的疫苗，所述疫苗中包含所述人工重组禽流感病毒h5-re11+3。
9、有益效果：本专利技术公开了两株可分泌h5-re11疫苗毒株血凝素蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，所述杂交瘤细胞株通过免疫小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞进行融合得到。经鉴定，血凝素蛋白的131,136和172位点是两株单克隆抗体识别的关键抗原表位。本专利技术基于上述单克隆抗体识别的关键抗原表位构建了一株人工重组病毒h5-re11+3，与h5-re11疫苗毒株相比，人工重组病毒h5-re11+3具有良好的交叉反应性，与2.3.4.4分支h5-re8、h5-re11、h5-re13和h5-re14系列疫苗毒株血清反应良好。人工重组病毒h5-re11+3是一种广谱性疫苗，以其作为免疫原制备疫苗免疫鸡后将对2.3.4.4分支h5-re8、h5-re11、h5-re13和h5-re14对应的野生型病毒攻击产生良好的免疫保护，具有良好的开发应用前景。
10、【生物保藏信息】
11、杂交瘤细胞株2d7，分类命名为杂交瘤细胞株，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmccno.45926，保藏时间为2024年4月24日。
12、杂交瘤细胞株3c8，分类命名为杂交瘤细胞株，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmccno.45927，保藏时间为2024年4月24日。
13、禽流感病毒h5-re11+3，分类命名为禽流感病毒，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmccno.45965，保藏时间为2024年4月24日。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.分泌H5-Re11疫苗毒株血凝素蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于，所述杂交瘤细胞株是杂交瘤细胞株2D7，所述杂交瘤细胞株2D7保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNo.45926，保藏时间为2024年4月24日；或者，所述杂交瘤细胞株是杂交瘤细胞株3C8，所述杂交瘤细胞株3C8保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.45927，保藏时间为2024年4月24日。
2.H5-Re11疫苗毒株血凝素蛋白的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体为2D7，所述单克隆抗体2D7由杂交瘤细胞株2D7分泌产生，所述杂交瘤细胞株2D7的保藏编号为CGMCCNo.45926，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏时间为2024年4月24日，所述单克隆抗体2D7的重链可变区核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，轻链可
3.根据权利要求2所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体2D7识别的关键抗原表位为H5-Re11血凝素蛋白131位点的谷氨酰胺和136位点的精氨酸，所述单克隆抗体3C8识别的关键抗原表位为H5-Re11血凝素蛋白172位点的丙氨酸。
4.权利要求2所述的H5-Re11疫苗毒株血凝素蛋白的单克隆抗体在制备H5亚型禽流感疫苗中的应用。
5.一种人工重组禽流感病毒，其特征在于，所述人工重组禽流感病毒命名为禽流感病毒H5-Re11+3，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.45965，保藏时间为2024年4月24日。
6.一种用于防治H5亚型禽流感病毒的疫苗，其特征在于，所述疫苗中包含权利要求5中所述的人工重组禽流感病毒H5-Re11+3。
...【技术特征摘要】
1.分泌h5-re11疫苗毒株血凝素蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于，所述杂交瘤细胞株是杂交瘤细胞株2d7，所述杂交瘤细胞株2d7保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmccno.45926，保藏时间为2024年4月24日；或者，所述杂交瘤细胞株是杂交瘤细胞株3c8，所述杂交瘤细胞株3c8保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmcc no.45927，保藏时间为2024年4月24日。
2.h5-re11疫苗毒株血凝素蛋白的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体为2d7，所述单克隆抗体2d7由杂交瘤细胞株2d7分泌产生，所述杂交瘤细胞株2d7的保藏编号为cgmccno.45926，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏时间为2024年4月24日，所述单克隆抗体2d7的重链可变区核苷酸序列如seq id no.1所示，重链可变区氨基酸序列如seq id no.2所示，轻链可变区核苷酸序列如seq id no.3所示，轻链可变区氨基酸序列如seq id no.4所示；或者所述单克隆抗体为单克隆抗体3c8，所述单克隆抗体3c8由杂交瘤细胞株3c8分泌产生，所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：邓国华，崔鹏飞，陈化兰，孔晖晖，施建忠，王秀荣，
申请(专利权)人：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心，
类型：发明
国别省市：
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