【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及中药现代化，具体涉及草血竭提取物及其制备方法、检测方法及应用。
技术介绍
1、草血竭(拳参)为蓼科蓼属植物，多年生草本，产地为云南、四川。性味苦，辛，微涩，微温。具有散血止血、下气止痛、收敛止泻的功效。可用于治疗慢性胃炎，胃、十二指肠溃疡，食积，症瘕积聚，月经不调，浮肿，跌打损伤，外伤出血等病症。
2、传统中药饮片临床使用以汤剂为主，汤剂的活性成分是中药临床有效性的物质基础，草血竭提取物以水为溶剂，经现代工业提取、浓缩、干燥、制粒而制成，作为新的饮片形式代替传统饮片供临床辨证论治、随证加减、配方使用。
3、目前，草血竭作为地方习用药材，目前尚无国家药材标准，虽然云南、四川等地方中药材标准有收载，但较为粗疏，难以有效评价草血竭提取物及其制剂等的质量，不能为控制中药提取物终端产品的质量提供参考。且关于草血竭的化学成分研究报道较少，现有技术中也没有针对草血竭提取物的含量测定方法，因此，有必要开发草血竭提取物的检测分析方法，以对草血竭汤剂的质量控制与标准研究进行规范，并为草血竭标汤质量标准的建立提供科学依据。
技术实现思路
1、本专利技术旨在提供草血竭提取物及其制备方法、检测方法及应用，以对草血竭提取物的质量控制与标准研究进行规范，并为草血竭提取物的质量标准的建立提供科学依据。
2、为了解决上述现有技术问题，本专利技术采用的技术方案如下：
3、第一方面，本专利技术提供一种制备草血竭提取物的方法，其中，所述方法包括：
5、将分离出的液体进行浓缩得到浓缩液，再将所述浓缩液进行冷冻干燥得到草血竭提取物。
6、优选地，其中，第一次煎煮加入5-7倍量的水，煮沸后保持沸腾30-60min；第二次煎煮加入4-5倍量的水，煮沸后保持沸腾20-40min；优选地，两次煎煮中，煮沸用火力为500-600w，保持沸腾用火力为200-300w；和/或，
7、所述固液分离是采用100～300目筛网。
8、优选地，其中，浓缩温度为50～65℃，优选为63～65℃；和/或真空度为-0.05～-0.1mpa，优选为-0.080～-0.090mpa；优选浓缩至液体密度为1.05～1.09g/ml。
9、优选地，其中，所述冷冻干燥包括预冻、一次干燥和二次干燥，优选地，所述预冻为在-50～-48℃下保持3～6h，进一步优选为3～4h，更优选地，所述预冻为在-50℃下保持3h；
10、和/或，优选地，所述一次干燥是在-45～0℃和真空下维持30～50h；
11、和/或，优选地，所述二次干燥是在10～30℃和真空下保持5～8h；
12、和/或，更为优选地，所述真空为0.2mbar以下。
13、优选地，其中，所述浓缩液的出膏率为0.5～6.2％，
14、第二方面，本专利技术提供所述的方法制备得到的草血竭提取物。
15、第三方面，本专利技术提供所述的草血竭提取物在制备草血竭提取物制剂上的应用。
16、第四方面，本专利技术提供一种草血竭提取物中没食子酸含量和/或没食子酸转移率的检测方法，包含下述步骤：
17、(1)对照品溶液的制备：
18、称取没食子酸对照品，加75％乙醇制成每1ml含46μg没食子酸对照品的溶液；
19、(2)供试品溶液的制备：
20、称取权利要求1～5任一项所述的方法获得的草血竭提取物，加入溶剂进行提取，草血竭提取物与溶剂的重量体积比为0.034：25，g/ml；
21、(3)高效液相色谱分析
22、吸取对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪进行没食子酸含量和/或没食子酸转移率的分析，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-0.1磷酸溶液为流动相，进行等度洗脱。
23、优选地，其中，步骤(2)中，所述溶剂选自于水、稀乙醇、体积浓度75％乙醇、乙醇、体积浓度50％甲醇、体积浓度75％甲醇和甲醇中的一种，优选为体积浓度75％乙醇。
24、优选地，其中，步骤(2)中，所述提取采用回流、溶解或超声中的一种进行提取，优选为回流提取。
25、优选地，其中，步骤(2)中，所述提取的提取时间30-60min，优选为45min。
26、优选地，其中，步骤(3)中，乙腈和0.1磷酸溶液的体积比为4：96；优选地，所述高效液相色谱分析还包括：流动相流速为0.25ml/min；柱温为25℃；检测波长为270nm。
27、优选地，其中，所述草血竭提取物没食子酸含量指标为12.15mg/g～27.81mg/g，没食子酸的转移率波动范围为25.49％～47.33％。
28、第五方面，本专利技术提供一种草血竭提取物的特征图谱的构建方法，包含下述步骤：
29、(1)参照物溶液的制备：
30、称取草血竭对照品，加超纯水制成每25ml中含有1g对照品的溶液；
31、(2)供试品溶液的制备：
32、取草血竭提取物，加水进行提取，草血竭提取物与溶剂的重量体积比为0.15：25，g/ml；
33、(3)超高效液相色谱分析
34、吸取对照品溶液和供试品溶液注入超高效液相色谱仪，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相a，以0.1％乙酸溶液为流动相b进行梯度洗脱，得到草血竭提取物的特征图谱；所述梯度洗脱过程如下：
35、0-5min：6％流动相a，94％流动相b；
36、5-9min：流动相a从6％增至7％，流动相b从94％降至93％；
37、9-16min：流动相a从7％增至11％，流动相b从93％降至89％；
38、16-19min：流动相a从11％增至13％，流动相b从89％降至87％；
39、19-22min：流动相a从13％增至14％，流动相b从87％降至86％；
40、22-23min：流动相a从14％增至100％，流动相b从86％降至0％；
41、23-28min：100％流动相a；
42、28-28.1min：流动相a从100％降至6％，流动相b从0％增至94％；
43、28.1-30min：6％流动相a，94％流动相b。
44、优选地，其中，步骤(3)中，所述超高效液相色谱分析还包括：流速为每分钟0.25ml；柱温为25℃；检测波长为270nm，理论塔板数按没食子酸峰计应不低于2000。
45、第六方面，本专利技术提供所述的检测方法获得的没食子酸含量和/或没食子酸转移率在草血竭提取物及其制剂质量评价中的应用。
46、第七方面，本专利技术提供所述的构建方法得到的特征图谱在草血竭提取物及其制剂质量评价中的应用。
47、本专利技术的有益效果如下：
48、1、本专利技术采用草本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种制备草血竭提取物的方法，其中，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中，第一次煎煮加入5-7倍量的水，煮沸后保持沸腾30-60min；第二次煎煮加入4-5倍量的水，煮沸后保持沸腾20-40min；优选地，两次煎煮中，煮沸用火力为500-600W，保持沸腾用火力为200-300W；和/或，
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，浓缩温度为50～65℃，优选为63～65℃；和/或真空度为-0.05～-0.1MPa，优选为-0.080～-0.090MPa；优选浓缩至液体密度为1.05～1.09g/ml。
4.根据权利要求1～3任一项所述的方法，其中，所述冷冻干燥包括预冻、一次干燥和二次干燥，优选地，所述预冻为在-50～-48℃下保持3～6h，进一步优选为3～4h，更优选地，所述预冻为在-50℃下保持3h；
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中，所述浓缩液的出膏率为0.5～6.2％。
6.权利要求1-5中任一项所述的方法制备得到的草血竭提取物。
7.权利要求6所述的草血竭提取物在制备草血
8.一种草血竭提取物中没食子酸含量和/或没食子酸转移率的检测方法，其特征在于，包含下述步骤：
9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，其中，步骤(2)中，所述溶剂选自于水、稀乙醇、体积浓度75％乙醇、乙醇、体积浓度50％甲醇、体积浓度75％甲醇和甲醇中的一种，优选为体积浓度75％乙醇。
10.根据权利要求8或9所述的检测方法，其特征在于，其中，步骤(2)中，所述提取采用回流、溶解或超声中的一种进行提取，优选为回流提取。
11.根据权利要求10所述的检测方法，其特征在于，其中，步骤(2)中，所述提取的提取时间30-60min，优选为45min。
12.根据权利要求8～11任一项所述的检测方法，其特征在于，步骤(3)中，乙腈和0.1磷酸溶液的体积比为4：96；优选地，所述高效液相色谱分析还包括：流动相流速为0.25ml/min；柱温为25℃；检测波长为270nm。
13.根据权利要求8-12任一项所述的检测方法，其特征在于，其中，所述草血竭提取物没食子酸含量指标为12.15mg/g～27.81mg/g，没食子酸的转移率波动范围为25.49％～47.33％。
14.一种草血竭提取物的特征图谱的构建方法，其特征在于，包含下述步骤：
15.根据权利要求14所述的构建方法，其特征在于，其中，步骤(3)中，所述超高效液相色谱分析还包括：流速为每分钟0.25ml；柱温为25℃；检测波长为270nm，理论塔板数按没食子酸峰计应不低于2000。
16.权利要求8-13中任一项所述的检测方法获得的没食子酸含量和/或没食子酸转移率在草血竭提取物及其制剂质量评价中的应用。
17.权利要求14或15所述的构建方法得到的特征图谱在草血竭提取物及其制剂质量评价中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种制备草血竭提取物的方法，其中，所述方法包括：
2.根据权利要求1所述的方法，其中，第一次煎煮加入5-7倍量的水，煮沸后保持沸腾30-60min；第二次煎煮加入4-5倍量的水，煮沸后保持沸腾20-40min；优选地，两次煎煮中，煮沸用火力为500-600w，保持沸腾用火力为200-300w；和/或，
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，浓缩温度为50～65℃，优选为63～65℃；和/或真空度为-0.05～-0.1mpa，优选为-0.080～-0.090mpa；优选浓缩至液体密度为1.05～1.09g/ml。
4.根据权利要求1～3任一项所述的方法，其中，所述冷冻干燥包括预冻、一次干燥和二次干燥，优选地，所述预冻为在-50～-48℃下保持3～6h，进一步优选为3～4h，更优选地，所述预冻为在-50℃下保持3h；
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中，所述浓缩液的出膏率为0.5～6.2％。
6.权利要求1-5中任一项所述的方法制备得到的草血竭提取物。
7.权利要求6所述的草血竭提取物在制备草血竭提取物制剂上的应用。
8.一种草血竭提取物中没食子酸含量和/或没食子酸转移率的检测方法，其特征在于，包含下述步骤：
9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，其中，步骤(2)中，所述溶剂选自于水、稀乙醇、体积浓度75％乙醇、乙醇、体积浓度50％甲醇、体积浓度75％甲醇和甲醇中的一...
【专利技术属性】
技术研发人员：娄涛涛，何燕玲，梁玉婷，安加文，向家俊，李慧馨，孙宜春，
申请(专利权)人：国药集团同济堂贵州制药有限公司，
类型：发明
国别省市：
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