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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物试剂,具体涉及到一种麦胚蛋白提取物及其应用。
技术介绍
1、无血清培养基在细胞培养和生物
中具有重要意义。传统上,细胞培养依赖于动物血清作为提供营养和生长因子的关键成分。然而,动物血清的使用存在诸多问题,如成分变异性大、可能引入病原体和影响实验结果的可重复性。因此,减少培养基中血清的使用量成为了一个研究热点。这类培养基通过合成或天然非动物来源的成分来支持细胞生长,旨在提供更加一致和可控的培养环境。
2、目前,市场上低血清培养基存在的问题是:成本较高,限制了其在大规模生产和广泛应用上的可行性;由于血清含量低,培养基中营养成分可能无法完全替代血清中的生物活性成分,导致细胞生长和功能表现不理想;另外,还可能在安全性方面存在隐患。
技术实现思路
1、本专利技术目的是提供一种麦胚蛋白提取物,在显著降低了血清使用量的前提下,来源安全,成本低,能够显著促进raw264.7细胞的增殖。
2、本专利技术的再一目的是提供所述麦胚蛋白提取物在在制备细胞培养基方面的用途,显著降低了血清使用量,且能够显著促进raw264.7细胞的增殖。
3、本专利技术的目的采用如下技术方案实现:
4、一种麦胚蛋白提取物,采用包括如下步骤的方法制备:从麦胚粉末中提取麦胚蛋白,然后采用sephedex g-25葡聚糖凝胶进行层析,取洗脱体积为0.4-0.8个柱体积和/或1.20-1.70个柱体积的组分,得到所述麦胚蛋白提取物。
5、在本专利技术
6、在本专利技术中,所述麦胚粉末是过100目筛后得到的。
7、在本专利技术中,所述提取液是在15-25mm的hepes-koh缓冲液中添加终浓度为90-110mm的醋酸钾、0.8-1.2mm的醋酸镁、1.8-2.2mm的cacl2和0.8-1.2mm的dtt所得。
8、在本专利技术中,每克麦胚粉末中加入3-6毫升提取液。
9、在本专利技术中,采用sephedex g-25葡聚糖凝胶进行层析中,洗脱液为水,流速为0.8-2ml/min。
10、本专利技术还提供采用所述方法制备得到的麦胚蛋白提取物。
11、本专利技术还提供所述的麦胚蛋白提取物在制备细胞培养基方面的用途。
12、在本专利技术中,所述细胞为raw264.7细胞。
13、在本专利技术中,麦胚蛋白提取物在所述细胞培养基中的含量为0.1-0.2g/l。
14、本专利技术提供了一种以麦胚为原料,通过葡聚糖凝胶层析技术对麦胚蛋白进行分离纯化的制备方法。该方法获得的麦胚蛋白提取物对raw264.7细胞表现出显著的促增殖活性,增强了麦胚蛋白的应用价值,并为相关生物医药领域的研究与开发提供了新的材料。
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1.一种麦胚蛋白提取物,其特征在于采用包括如下步骤的方法制备:从麦胚粉末中提取麦胚蛋白,然后采用Sephedex G-25葡聚糖凝胶进行层析,取洗脱体积为0.4-0.8个柱体积和/或1.20-1.70个柱体积的组分,得到所述麦胚蛋白提取物。
2.根据权利要求1所述麦胚蛋白提取物,其特征在于采用提取液从麦胚粉末中提取麦胚蛋白,所述提取液为pH 7-8的缓冲液溶液。
3.根据权利要求2所述麦胚蛋白提取物,其特征在于所述麦胚粉末是过100目筛后得到的。
4.根据权利要求3所述麦胚蛋白提取物,其特征在于所述提取液是在15-25mM的HEPES-KOH缓冲液中添加终浓度为90-110mM的醋酸钾、0.8-1.2mM的醋酸镁、1.8-2.2mM的CaCl2和0.8-1.2mM的DTT所得。
5.根据权利要求4所述麦胚蛋白提取物,其特征在于每克麦胚粉末中加入3-6毫升提取液。
6.根据权利要求5所述麦胚蛋白提取物,其特征在于采用Sephedex G-25葡聚糖凝胶进行层析中,洗脱液为水,流速为0.8-2mL/min。
7.
8.权利要求7所述的麦胚蛋白提取物在制备细胞培养基方面的用途。
9.根据权利要求8所述用途,其特征在于所述细胞为RAW264.7细胞。
10.根据权利要求9所述用途,其特征在于麦胚蛋白提取物在所述细胞培养基中的含量为0.1-0.2g/L。
...【技术特征摘要】
1.一种麦胚蛋白提取物,其特征在于采用包括如下步骤的方法制备:从麦胚粉末中提取麦胚蛋白,然后采用sephedex g-25葡聚糖凝胶进行层析,取洗脱体积为0.4-0.8个柱体积和/或1.20-1.70个柱体积的组分,得到所述麦胚蛋白提取物。
2.根据权利要求1所述麦胚蛋白提取物,其特征在于采用提取液从麦胚粉末中提取麦胚蛋白,所述提取液为ph 7-8的缓冲液溶液。
3.根据权利要求2所述麦胚蛋白提取物,其特征在于所述麦胚粉末是过100目筛后得到的。
4.根据权利要求3所述麦胚蛋白提取物,其特征在于所述提取液是在15-25mm的hepes-koh缓冲液中添加终浓度为90-110mm的醋酸钾、0.8-1.2mm的醋酸镁、1.8...
【专利技术属性】
技术研发人员:沈新春,王佳雨,周婉玥,张凯茵,汪芳,宋海昭,
申请(专利权)人:南京财经大学,
类型:发明
国别省市:
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