【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，具体涉及hpcal1在结肠癌诊断及治疗中的应用。
技术介绍
1、结肠癌(colorectal cancer，crc)是全球第三大常见恶性肿瘤，占全球每年确诊癌症和癌症相关死亡病例的10％。手术和化疗仍然是结肠癌患者的首选。早期患者一般采用手术治疗，晚期患者最常见的方式是药物治疗。随着基因测序技术和精准靶向药物的开发，结肠癌患者的生存期有所提升。例如：靶向表皮生长因子(egfr)的药物西妥昔单抗和帕尼单抗可显著提高晚期结直肠癌患者的生存率；靶向braf的抑制剂康奈非尼在延长结肠癌患者生存期方面也显现出显著的效果。然而，仍然会有一部分获得性耐药的患者对目前的治疗方法不敏感或无效。结肠癌的发生发展是一个复杂的过程，受到多种异常信号分子的调控，目前我国在结肠癌的诊断与治疗方面还存在着以下问题：(1)早期诊断率低；(2)肿瘤的耐药性严重限制已有药物的疗效；(3)术后复发和转移率高；(4)临床上大多数ⅲ、ⅳ期结肠癌患者尚缺乏有效的靶向和免疫治疗药物，临床主流抗癌药物多依靠进口；(5)目前药物的研发远不能满足结肠癌的临床需求，还有潜在的有效药物作用靶点尚未发现，临床对结肠癌的新药研发还有巨大空间。因此，迫切需要我们寻找新的结肠癌肿瘤标记物，研究清楚其中的分子机制，为结肠癌的治疗提供新的治疗靶点、新的治疗方法。
2、海马钙结合蛋白样蛋白1(hippocalcin-like protein 1，hpcal1),又名bdr1、hlp2、vilip-3是神经元特异性钙结合蛋白家族的一员，最早发现在视网膜和大脑中表达
技术实现思路
1、针对现有技术中存在的问题和不足，本专利技术的目的旨在提供hpcal1在结肠癌诊断及治疗中的应用。
2、为实现专利技术目的，本专利技术采用的技术方案如下：
3、本专利技术第一方面提供了一种可用于结肠癌辅助诊断的生物标志物，所述生物标志物为hpcal1基因或蛋白。
4、通过western blot检测hpcal1蛋白在结肠癌组织和癌旁正常组织中的表达情况，发现hpcal1蛋白在结肠癌的癌组织中的表达水平显著高于癌旁正常组织；说明hpcal1蛋白在结肠癌组织中均有不同程度的表达上调。
5、通过western blot检测hpcal1蛋白在结肠癌细胞系sw480、sw620、rko、hct116以及正常肠上皮细胞ncm460中的表达情况，发现hpcal1蛋白在结肠癌细胞系sw480、sw620、rko、hct116中的表达水平显著高于正常肠上皮细胞ncm460；说明hpcal1蛋白在结肠癌细胞系中均有不同程度的表达上调。
6、本专利技术第二方面提供了hpcal1基因或蛋白的检测试剂在制备用于结肠癌辅助诊断的产品中的应用。
7、根据上述的应用，优选地，所述产品通过rt-pcr、实时定量pcr、原位杂交、northern blot、western blot、芯片、高通量测序平台、免疫组织化学或酶联免疫吸附检测样本中hpcal1基因或蛋白的表达水平。
8、根据上述的应用，优选地，所述产品含有与hpcal1蛋白或hpcal1蛋白的肽段特异性结合的抗体，或含有特异性扩增hpcal1基因的引物，或含有特异性检测hpcal1基因的探针。
9、根据上述的应用，优选地，所述抗体为单克隆抗体、多克隆抗体或单域抗体。
10、根据上述的应用，优选地，所述产品的检测样本为细胞、组织或血清；
11、根据上述的应用，优选地，所述产品为芯片、制剂或试剂盒。
12、本专利技术第三方面提供了hpcal1基因或蛋白作为筛选预防、缓解或/和治疗结肠癌药物的药物靶标的应用。
13、本专利技术第四方面提供了抑制hpcal1基因或蛋白表达和/或功能的物质在如下任一中的应用：
14、(a1)制备用于预防、缓解或/和治疗结肠癌的产品中的应用；
15、(a2)制备用于抑制肿瘤生长的产品中的应用；所述肿瘤为结肠癌；
16、(a3)制备用于抑制结肠癌细胞增殖的产品中的应用；
17、(a4)制备用于抑制结肠癌细胞迁移的产品中的应用。
18、根据上述的应用，优选地，所述抑制hpcal1表达和/或功能的物质包括特异靶向hpcal1基因的shrna或特异靶向hpcal1基因的sirna或hpcal1蛋白的抑制剂。
19、根据上述的应用，优选地，所述特异靶向hpcal1基因的shrna为shrna1或shrna2，shrna1、shrna2均由正义链和反义链组成。
20、其中，所述shrna1正义链的核苷酸序列为：
21、5’-ccggccctggacagttgcagagaggatcctctctgcaactgtccag ggtttttg-3’(如序列表中序列1所示)，
22、shrna1反义链的核苷酸序列为：
23、5’-aattcaaaaaccctggacagttgcagagaggatcctctctgcaact gtccaggg-3’(如序列表中序列2所示)；
24、所述shrna2正义链的核苷酸序列为：
25、5’-ccggcgcagcgagatgctggagaggatcctctccagcatctcgctg cgtttttg-3’(如序列表中序列3所示)，
26、shrna2反义链的核苷酸序列为：
27、5’-aattcaaaaacgcagcgagatgctggagaggatcctctccagcatc tcgctgcg-3’(如序列表中序列4所示)。
28、本专利技术第五方面提供了一种预防、缓解或/和治疗结肠癌的药物，所述药物中含有抑制hpcal1表达和/或功能的物质。
29、根据上述的药物，优选地，所述抑制hpcal1表达和/或功能的物质包括特异靶向hpcal1基因的shrna或特异靶向hpcal1基因的sirna或hpcal1蛋白的抑制剂。
30、根据上述的药物，优选地，所述特异靶向hpcal1基因的shrna为shrna1或shrna2，shrna1、shrna2均由正义链和反义链组成。
31、其中，所述shrna1正义链的核苷酸序列为：
32、5’-ccggccctggacagttgcaga本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.HPCAL1基因或蛋白的检测试剂在制备用于结肠癌辅助诊断的产品中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品通过RT-PCR、实时定量PCR、原位杂交、Northern Blot、Western Blot、芯片、高通量测序平台、免疫组织化学或酶联免疫吸附检测样本中HPCAL1基因或蛋白的表达水平。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产品含有与HPCAL1蛋白或HPCAL1蛋白的肽段特异性结合的抗体，或含有特异性扩增HPCAL1基因的引物，或含有特异性检测HPCAL1基因的探针。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抗体为单克隆抗体、多克隆抗体或单域抗体。
5.根据权利要求1-4任一所述的应用，其特征在于，所述产品的检测样本为细胞、组织或血清；所述产品为芯片、制剂或试剂盒。
6.HPCAL1基因或蛋白作为筛选预防、缓解或/和治疗结肠癌药物的药物靶标的应用。
7.抑制HPCAL1基因或蛋白表达和/或功能的物质在如下任一中的应用：
8.根据权利要求7所述的应用，
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述特异靶向HPCAL1基因的shRNA为shRNA1或shRNA2，shRNA1、shRNA2均由正义链和反义链组成；所述shRNA1正义链的核苷酸序列如序列表中序列1所示，shRNA1反义链的核苷酸序列如序列表中序列2所示；所述shRNA2正义链的核苷酸序列如序列表中序列3所示，shRNA2反义链的核苷酸序列如序列表中序列4所示。
10.一种预防、缓解或/和治疗结肠癌的药物，其特征在于，所述药物中含有抑制HPCAL1表达和/或功能的物质；所述抑制HPCAL1表达和/或功能的物质包括特异靶向HPCAL1基因的shRNA或特异靶向HPCAL1基因的siRNA或HPCAL1蛋白的抑制剂。
...【技术特征摘要】
1.hpcal1基因或蛋白的检测试剂在制备用于结肠癌辅助诊断的产品中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品通过rt-pcr、实时定量pcr、原位杂交、northern blot、western blot、芯片、高通量测序平台、免疫组织化学或酶联免疫吸附检测样本中hpcal1基因或蛋白的表达水平。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述产品含有与hpcal1蛋白或hpcal1蛋白的肽段特异性结合的抗体，或含有特异性扩增hpcal1基因的引物，或含有特异性检测hpcal1基因的探针。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抗体为单克隆抗体、多克隆抗体或单域抗体。
5.根据权利要求1-4任一所述的应用，其特征在于，所述产品的检测样本为细胞、组织或血清；所述产品为芯片、制剂或试剂盒。
6.hpcal1基因或蛋白作为筛选预防、缓解或/和治疗结肠癌药物的药物靶标的应用。
7.抑制hpcal1基因或...
【专利技术属性】
技术研发人员：程琳娜，陈丽娟，梁俊婷，张惠阳，陈文超，朱尊民，黄翠，
申请(专利权)人：河南省人民医院，
类型：发明
国别省市：
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