【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及食品，具体涉及一种莱鲍迪苷m的纯化方法。
技术介绍
1、过量摄入高热量糖(如葡萄糖、果糖和蔗糖等)会导致肥胖、糖尿病、心脑血管疾病和高血压等慢性疾病。因此，低热量、高甜度的甜味剂受到不少消费者的青睐。其中人工甜味剂如糖精、安赛蜜、三氯蔗糖和阿斯巴甜等已被广泛应用于食品领域。然而许多的研究表明，人工甜味剂的大量使用存在潜在的健康风险，因此，植物来源的天然甜味剂越来越受到广泛的关注和应用。其中，来源于植物甜叶菊的甜菊糖苷已成为了天然甜味剂中最受欢迎的甜味剂。
2、甜叶菊(stevia rebaudiana)是一种南美灌木，属于菊科泽兰属，原产于巴拉圭和巴西边境的高山草甸，也被称为“巴拉圭草”，在当地甜叶菊叶子作为天然甜味剂的使用历史已有几百年。目前，已从甜叶菊中分离出60余种甜菊糖苷，包括甜菊糖、莱鲍迪苷a(rebaud ios ide a)、莱鲍迪苷d(rebaud ios ide d)、莱鲍迪苷m(rebaud ios ide m)和甜菊双糖苷等。由于它们具有安全性高、甜度高和性质稳定等特点，通过了美国食品药物管理局(food and drug admin i strat ion，fda)公认安全(genera l ly recogn i zed assafe，gras)级别的安全认证，获得了联合国粮农组织(food and agr i cu l ture organi zat i on of the un ited nat i ons，fao)和世界卫生组织(wor l d hea l th orga
3、莱鲍迪苷m是甜菊糖苷中口感非常接近蔗糖的成分之一，同时莱鲍迪苷m的性质稳定，不容易与其他物质反应。也不会被口腔内的微生物代谢，不会引起龋齿。莱鲍迪苷m的甜度是蔗糖的300倍，被认为是高热量糖的理想替代品，具有广阔的应用前景。但是目前采用发酵法生产的莱鲍迪苷m的品质较差，主要是纯度低，严重制约了其在食品生产中的应用。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于解决现有技术中存在的莱鲍迪苷m纯度低的问题，提供一种可以得到纯度在98％以上的高品质莱鲍迪苷m的纯化方法。
2、为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案如下：一种莱鲍迪苷m的纯化方法，包括以下步骤：
3、s1、莱鲍迪苷固液混合物中加入0.01～1％的蜗牛酶，所述莱鲍迪苷固液混合物中包括重组菌或/和重组菌的菌体蛋白或/和酶或/和其他杂蛋白，充分搅拌后，过滤，收集滤饼，烘干粉碎得莱鲍迪苷m粗品；
4、s2、将正癸酸与乙醇、水在60～70℃条件下均匀混合，正癸酸、乙醇、水在超分子溶剂的体积比15％-20％：45％-55％：25％-40％，静置1h以上，将上相取出即得超分子溶剂；
5、s3、在60～70℃条件下，在莱鲍迪苷m的粗品中加入所述超分子溶剂，所述超分子溶剂的体积为莱鲍迪苷m的7～15倍，充分搅拌后过滤取滤液，降至室温，过滤收集滤饼并烘干得到纯化后的莱鲍迪苷m；
6、s4、将纯化后的莱鲍迪苷m置于50～120℃的环境中1h以上，然后冷却至室温，用水洗涤，烘干得到莱鲍迪苷m精品。
7、作为优选，重组大肠杆菌破碎液在50～80℃催化莱鲍迪苷a后，过滤取滤液，冷却至室温得到所述莱鲍迪苷固液混合物。
8、作为优选，所述蜗牛酶的添加量为0.1～0.5％。
9、作为优选，所述s2步骤中正癸酸、乙醇、水在超分子溶剂的体积比16％-18％：47％-54％：28％-38％。
10、作为优选，所述s2步骤中静置时间为2～4h。
11、作为优选，所述s2步骤中的温度为65～68℃。
12、作为优选，所述s3步骤中的温度为65～68℃。
13、作为优选，所述s4步骤中所述莱鲍迪苷m的静置温度为60～80℃。
14、作为优选，所述s4步骤中所述莱鲍迪苷m的静置时间为1.5～4h。
15、作为优选，所述s4步骤中所述水的温度为0～4℃。
16、本专利技术所具有的有益效果：本专利技术先用蜗牛酶将菌体或/和菌体蛋白或/和酶进行酶解，酶解产物部分溶于水，部分在本专利技术限定的超分子溶剂中的溶解性极差。用上述超分子溶剂对莱鲍迪苷m粗品萃取、重结晶，该超分子溶剂对莱鲍迪苷m的溶解性很好，对其它杂质(特别是蜗牛酶酶解后的蛋白碎片)溶解性非常差，因此使用该超分子溶剂可以达到除杂目的。经多步纯化处理后莱鲍迪苷m精品的纯度为98％以上，颜色为纯白或几乎纯白。本专利技术的纯化方法显著提高了莱鲍迪苷m的整体品质，适合工业化生产应用。
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1.一种莱鲍迪苷M的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种莱鲍迪苷M的纯化方法，其特征在于，重组大肠杆菌破碎液在50～80℃催化莱鲍迪苷A后，过滤取滤液，冷却至室温得到所述莱鲍迪苷固液混合物。
3.根据权利要求1所述的一种莱鲍迪苷M的纯化方法，其特征在于，所述蜗牛酶的添加量为0.1～0.5％。
4.根据权利要求1所述的一种莱鲍迪苷M的纯化方法，其特征在于，所述S2步骤中正癸酸、乙醇、水在超分子溶剂的体积比16％-18％：47％-54％：28％-37％。
5.根据权利要求1所述的一种莱鲍迪苷M的纯化方法，其特征在于，所述S2步骤中静置时间为2～4h。
6.根据权利要求1所述的一种莱鲍迪苷M的纯化方法，其特征在于，所述S2步骤中的温度为65～68℃。
7.根据权利要求1所述的一种莱鲍迪苷M的纯化方法，其特征在于，所述S3步骤中的温度为65～68℃。
8.根据权利要求1所述的一种莱鲍迪苷M的纯化方法，其特征在于，所述S4步骤中所述莱鲍迪苷M的静置温度为60～80℃。
<...【技术特征摘要】
1.一种莱鲍迪苷m的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种莱鲍迪苷m的纯化方法，其特征在于，重组大肠杆菌破碎液在50～80℃催化莱鲍迪苷a后，过滤取滤液，冷却至室温得到所述莱鲍迪苷固液混合物。
3.根据权利要求1所述的一种莱鲍迪苷m的纯化方法，其特征在于，所述蜗牛酶的添加量为0.1～0.5％。
4.根据权利要求1所述的一种莱鲍迪苷m的纯化方法，其特征在于，所述s2步骤中正癸酸、乙醇、水在超分子溶剂的体积比16％-18％：47％-54％：28％-37％。
5.根据权利要求1所述的一种莱鲍迪苷m的纯化方法，其特征在于，所述s2步骤中静置时...
【专利技术属性】
技术研发人员：樊兵，王顺治，李克敬，
申请(专利权)人：杭州力文所生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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