【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
技术介绍
1、已开发出各种技术来对蛋白质进行工程化以使其与通常不会结合的靶标结合。例如，可生成文库以筛选具有所需结合或酶活性的工程化蛋白质。
技术实现思路
1、我们已开发了若干种方法来发现具有新颖结合位点的多肽，特别是包括结合位点的β-折叠部分的那些多肽。这些方法包括开发β-折叠文库，以及采用“有限可靠性”方法来减少可产生具有非所需特征的蛋白质的氨基酸的频率的文库。我们已使用这些类型的文库来发现与诸如cd98重链(cd98hc)和转铁蛋白受体(tfr)的靶标结合的多肽，如下文详述。我们也开发了使用cd98hc多肽的递送方法(例如跨血脑屏障)，特别是脑中的细胞外靶标。
2、在一个方面中，本公开提供了一种将非天然结合位点工程化至多肽中的方法，所述方法包括：
3、(a)生成多肽文库，其中所述多肽的至少一部分包括至少七个随机化位置，其中10％-60％的随机化位置具有被限于排除以下氨基酸中的一者或多者：cys、trp、met、arg或gly，但包括各位置处的至少八个氨基酸的多样性；
4、(b)使所述文库与靶蛋白接触；
5、(c)选择与所述靶蛋白结合的文库成员；以及
6、(d)分离所选的文库成员，从而将非天然结合位点工程化至所述多肽中。
7、在一些实施方案中，方法包括使用从第一步骤(d)分离的文库成员重复步骤(b)-(d)。在一些实施方案中，文库包括至少8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、
8、在一些实施方案中，各多肽包括β-折叠并且随机化位置中的至少三者存在于单一β-折叠中。在某些实施方案中，随机化位置中的至少三者存在于形成β-折叠的至少两条β-链内。在某些实施方案中，随机化位置中的至少三者存在于形成β-折叠的至少一条β-链内。在一些实施方案中，随机化位置中的至少三者在β-折叠的一侧形成表面。在特定实施方案中，随机化位置中的至少三者为表面暴露的。在一些实施方案中，β-折叠包括具有有限多样性的至少一个位置。在某些实施方案中，β-折叠包括具有有限多样性的至少两个位置。在某些实施方案中，具有有限多样性的至少两个位置由不具有有限多样性的位置间隔开。在一些实施方案中，β-折叠包括不具有有限多样性的至少两个位置。在某些实施方案中，不具有有限多样性的至少两个位置由具有有限多样性的位置间隔开。在特定实施方案中，分离是相对于多肽的一级氨基酸序列或是相对于氨基酸在蛋白质结构中的空间三维定位。
9、在一些实施方案中，具有有限多样性的位置由简并密码子编码。在某些实施方案中，简并密码子中的至少一者为nhk。在一些实施方案中，不具有有限多样性的位置由简并密码子nnk编码。
10、在一些实施方案中，多肽含有免疫球蛋白样折叠。在某些实施方案中，多肽包括免疫球蛋白(igg)结构域。在某些实施方案中，igg结构域是来自igg、iga、ige、igm或igd家族。在某些实施方案中，igg结构域选自igg1、igg2、igg3或igg4分子。在特定实施方案中，igg结构域包括vh、ch1、ch2、ch3、vl或cl结构域。在一些实施方案中，随机化位置为表面可及的。在特定实施方案中，随机化位置选自表1b中所列的那些位置中的任一者。在某些实施方案中，多肽包括纤连蛋白或本文所描述的任何其他蛋白质骨架。
11、在另一方面中，本公开提供了一种多肽文库，其中所述多肽的至少一部分包括至少七个随机化位置，其中10％-60％的随机化位置具有被限于排除以下氨基酸中的一者或多者：cys、trp、met、arg或gly，但包括各位置处的至少八个氨基酸的多样性。
12、在一些实施方案中，文库包括至少8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20个或更多个随机化位置。在一些实施方案中，各多肽的一级氨基酸序列包含由不具有有限多样性的位置间隔开的具有有限多样性的位置。
13、在一些实施方案中，各多肽包括β-折叠并且随机化位置中的至少三者存在于单一β-折叠中。在某些实施方案中，随机化位置中的至少三者存在于形成β-折叠的至少两条β-链内。在某些实施方案中，随机化位置中的至少三者存在于形成β-折叠的至少一条β-链内。在一些实施方案中，随机化位置中的至少三者在β-折叠的一侧形成表面。在特定实施方案中，随机化位置中的至少三者为表面暴露的。在一些实施方案中，β-折叠包括具有有限多样性的至少一个位置。在某些实施方案中，β-折叠包括具有有限多样性的至少两个位置。在某些实施方案中，具有有限多样性的至少两个位置由不具有有限多样性的位置间隔开。在特定实施方案中，分离是相对于多肽的一级序列或是相对于氨基酸在蛋白质结构中的空间三维定位。在一些实施方案中，β-折叠包括不具有有限多样性的至少两个位置。在某些实施方案中，不具有有限多样性的至少两个位置由具有有限多样性的位置间隔开。在特定实施方案中，分离是相对于多肽的一级序列或是相对于氨基酸在蛋白质结构中的空间三维定位。
14、在一些实施方案中，多肽含有免疫球蛋白样折叠。在某些实施方案中，多肽包括免疫球蛋白(igg)结构域。在某些实施方案中，igg结构域是来自igg、iga、ige、igm或igd家族。在某些实施方案中，igg结构域选自igg1、igg2、igg3或igg4分子。在特定实施方案中，igg结构域包括vh、ch1、ch2、ch3、vl或cl结构域。在一些实施方案中，随机化位置为表面可及的。在特定实施方案中，随机化位置选自表1b中所列的那些位置中的任一者。在某些实施方案中，多肽包括纤连蛋白或本文所描述的任何其他蛋白质骨架。
15、在另一方面中，本公开提供了一种包含免疫球蛋白的恒定结构域或可变结构域的非cdr部分的多肽，所述免疫球蛋白在β-折叠中具有至少三个经修饰的位置，其中：
16、(i)经修饰的位置位于形成所述β-折叠的至少两条β-链中；
17、(ii)经修饰的位置形成能够与抗原结合的结合位点的至少一部分；并且
18、(iii)β-折叠不与不具有经修饰的位置的抗原结合。
19、在一些实施方案中，恒定结构域包含fc多肽。在一些实施方案中，至少两条β-链选自由以下组成的组：氨基酸位置124-128、139-147、155-157、179-178、199-203、208-214、239-243、258-265、274-278、301-307、319-324、332-336、347-351、363-372、378-383、391-393、406-412、423-428和437-441，其中位置是根据eu编号确定的。在某些实施方案中，位置为表面可及的。在特定实施方案中，位置选自表1b中所列的那些位置。
20、在一些实施方案中，经修饰的位置在β-折叠上形成连续表面。在一本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种多肽，其包含与CD98hc蛋白特异性结合的经修饰的恒定结构域。
2.如权利要求1所述的多肽，其中所述经修饰的恒定结构域包含与所述CD98hc蛋白特异性结合的经修饰的CH3结构域。
3.如权利要求2所述的多肽，其中所述经修饰的CH3结构域为Fc多肽的一部分。
4.如权利要求1至3中任一项所述的多肽，其中所述CD98hc蛋白是人CD98hc蛋白。
5.如权利要求1至4中任一项所述的多肽，其中所述CD98hc蛋白与LAT1(SLC7A5)、LAT2(SLC7A8)、y+LAT1(SLC7A7)、y+LAT2(SLC7A6)、Asc-1(SLC7A10)或xCT(SLC7A11)形成复合物。
6.如权利要求5所述的多肽，其中所述CD98hc蛋白与LAT1(SLC7A5)形成复合物。
7.如权利要求1至6中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的恒定结构域包含与SEQ IDNO:28-45中的任一者的序列的氨基酸111-217具有至少85％、90％或95％序列同一性的序列。
8.一种多肽，其包含与CD98
9.一种多肽，其包含与CD98hc蛋白特异性结合的经修饰的CH3结构域，其中所述经修饰的CH3结构域包含由根据EU编号的380、382、384、385、386、387、421、422、424、426、428、436、438、440和442组成的一组氨基酸位置中的至少十一、十二、十三、十四或十五个取代。
10.如权利要求9所述的多肽，其中所述经修饰的CH3结构域包含与SEQ ID NO:28-43中的任一者的序列的氨基酸111-217具有至少85％、90％或95％序列同一性的序列，其中所述经修饰的CH3结构域包含由以下组成的一组氨基酸位置中的至少十一、十二、十三、十四或十五个取代：位置380处的L、位置382处的N、位置384处的R、H或Q、位置385处的F或Y、位置386处的V、L、I、F、Y或E、位置387处的L、位置421处的E、Q或A、位置422处的I、T或P、位置424处的A、位置426处的N、位置428处的Y或W、位置436处的R或W、位置438处的F或W、位置440处的N和位置442处的A、Q、K、R、H或M。
11.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的CH3结构域包含位置380处的L、位置382处的N、位置384处的R、位置385处的F、位置386处的V、位置387处的L、位置422处的I、位置424处的A、位置426处的N、位置428处的Y、位置438处的F、位置440处的N和位置442处的A。
12.如权利要求9至11中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的CH3结构域包含SEQ IDNO:28。
13.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的CH3结构域包含位置380处的L、位置382处的N、位置384处的R、位置385处的F、位置386处的V、位置387处的L、位置421处的E、位置422处的I、位置424处的A、位置426处的N、位置428处的Y、位置438处的F、位置440处的N和位置442处的A。
14.如权利要求9、10和13中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的CH3结构域包含SEQID NO:29。
15.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的CH3结构域包含位置380处的L、位置382处的N、位置384处的Q、位置385处的Y、位置386处的E、位置387处的L、位置424处的A、位置426处的N、位置428处的Y、位置438处的F、位置440处的N和位置442处的A。
16.如权利要求9、10和15中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的CH3结构域包含SEQID NO:30。
17.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的CH3结构域包含位置380处的L、位置382处的N、位置384处的H、位置385处的Y、位置386处的E、位置387处的L、位置424处的A、位置426处的N、位置428处的Y、位置438处的F、位置440处的N和位置442处的A。
18.如权利要求9、10和17中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的CH3结构域包含SEQID NO:31。
19.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的CH3结构域包含位置380处的L、位置...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种多肽，其包含与cd98hc蛋白特异性结合的经修饰的恒定结构域。
2.如权利要求1所述的多肽，其中所述经修饰的恒定结构域包含与所述cd98hc蛋白特异性结合的经修饰的ch3结构域。
3.如权利要求2所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域为fc多肽的一部分。
4.如权利要求1至3中任一项所述的多肽，其中所述cd98hc蛋白是人cd98hc蛋白。
5.如权利要求1至4中任一项所述的多肽，其中所述cd98hc蛋白与lat1(slc7a5)、lat2(slc7a8)、y+lat1(slc7a7)、y+lat2(slc7a6)、asc-1(slc7a10)或xct(slc7a11)形成复合物。
6.如权利要求5所述的多肽，其中所述cd98hc蛋白与lat1(slc7a5)形成复合物。
7.如权利要求1至6中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的恒定结构域包含与seq idno:28-45中的任一者的序列的氨基酸111-217具有至少85％、90％或95％序列同一性的序列。
8.一种多肽，其包含与cd98hc蛋白特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含由根据eu编号的382、384、385、387、422、424、426、438、440组成的一组氨基酸位置中的至少五、六、七、八或九个取代。
9.一种多肽，其包含与cd98hc蛋白特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含由根据eu编号的380、382、384、385、386、387、421、422、424、426、428、436、438、440和442组成的一组氨基酸位置中的至少十一、十二、十三、十四或十五个取代。
10.如权利要求9所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含与seq id no:28-43中的任一者的序列的氨基酸111-217具有至少85％、90％或95％序列同一性的序列，其中所述经修饰的ch3结构域包含由以下组成的一组氨基酸位置中的至少十一、十二、十三、十四或十五个取代：位置380处的l、位置382处的n、位置384处的r、h或q、位置385处的f或y、位置386处的v、l、i、f、y或e、位置387处的l、位置421处的e、q或a、位置422处的i、t或p、位置424处的a、位置426处的n、位置428处的y或w、位置436处的r或w、位置438处的f或w、位置440处的n和位置442处的a、q、k、r、h或m。
11.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的l、位置382处的n、位置384处的r、位置385处的f、位置386处的v、位置387处的l、位置422处的i、位置424处的a、位置426处的n、位置428处的y、位置438处的f、位置440处的n和位置442处的a。
12.如权利要求9至11中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seq idno:28。
13.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的l、位置382处的n、位置384处的r、位置385处的f、位置386处的v、位置387处的l、位置421处的e、位置422处的i、位置424处的a、位置426处的n、位置428处的y、位置438处的f、位置440处的n和位置442处的a。
14.如权利要求9、10和13中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seqid no:29。
15.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的l、位置382处的n、位置384处的q、位置385处的y、位置386处的e、位置387处的l、位置424处的a、位置426处的n、位置428处的y、位置438处的f、位置440处的n和位置442处的a。
16.如权利要求9、10和15中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seqid no:30。
17.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的l、位置382处的n、位置384处的h、位置385处的y、位置386处的e、位置387处的l、位置424处的a、位置426处的n、位置428处的y、位置438处的f、位置440处的n和位置442处的a。
18.如权利要求9、10和17中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seqid no:31。
19.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的l、位置382处的n、位置384处的r、位置385处的f、位置386处的v、位置387处的l、位置424处的a、位置426处的n、位置428处的y、位置438处的f、位置440处的n和位置442处的a。
20.如权利要求9、10和19中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seqid no:32。
21.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的l、位置382处的n、位置384处的r、位置385处的f、位置386处的v、位置387处的l、位置421处的e、位置424处的a、位置426处的n、位置428处的y、位置438处的f、位置440处的n和位置442处的a。
22.如权利要求9、10和21中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seqid no:22。
23.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的l、位置382处的n、位置384处的r、位置385处的f、位置386处的v、位置387处的l、位置421处的e、位置422处的i、位置424处的a、位置426处的n、位置428处的y、位置438处的f和位置440处的n。
24.如权利要求9、10和23中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seqid no:34。
25.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的l、位置382处的n、位置384处的r、位置385处的f、位置386处的v、位置387处的l、位置422处的i、位置424处的a、位置426处的n、位置428处的y、位置438处的f、位置440处的n和位置442处的r。
26.如权利要求9、10和25中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seqid no:35。
27.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的l、位置382处的n、位置384处的r、位置385处的f、位置386处的v、位置387处的l、位置422处的i、位置424处的a、位置426处的n、位置428处的y、位置438处的f、位置440处的n和位置442处的h。
28.如权利要求9、10和27中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seqid no:36。
29.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的l、位置382处的n、位置384处的r、位置385处的f、位置386处的v、位置387处的l、位置422处的i、位置424处的a、位置426处的n、位置428处的y、位置436处的r、位置438处的f、位置440处的n和位置442处的r。
30.如权利要求9、10和29中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seqid no:37。
31.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的l、位置382处的n、位置384处的h、位置385处的y、位置386处的e、位置387处的l、位置422处的i、位置424处的a、位置426处的n、位置428处的y、位置438处的f、位置440处的n和位置442处的a。
32.如权利要求9、10和31中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seqid no:38。
33.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的l、位置382处的n、位置384处的q、位置385处的f、位置386处的h、位置387处的l、位置422处的i、位置424处的a、位置426处的n、位置428处的y、位置438处的f、位置440处的n和位置442处的l。
34.如权利要求9、10和33中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seqid no:39。
35.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的l、位置382处的n、位置384处的r、位置385处的f、位置386处的v、位置387处的l、位置422处的t、位置424处的a、位置426处的n、位置428处的y、位置438处的f、位置440处的n和位置442处的a。
36.如权利要求9、10和35中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seqid no:40。
37.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的l、位置382处的n、位置384处的r、位置385处的f、位置386处的v、位置387处的l、位置422处的i、位置424处的a、位置426处的n、位置428处的y、位置438处的f、位置440处的n和位置442处的k。
38.如权利要求9、10和37中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seqid no:41。
39.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的l、位置382处的n、位置384处的r、位置385处的f、位置386处的v、位置387处的l、位置422处的i、位置424处的a、位置426处的n、位置428处的y、位置436处的w、位置438处的f、位置440处的n和位置442处的r。
40.如权利要求9、10和39中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seqid no:42。
41.如权利要求9或10所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的l、位置382处的n、位置384处的q、位置385处的y、位置386处的l、位置387处的l、位置421处的e、位置422处的i、位置424处的a、位置426处的n、位置428处的y、位置438处的f、位置440处的n和位置442处的a。
42.如权利要求9、10和41中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seqid no:43。
43.一种多肽，其包含与cd98hc蛋白特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含：
44.如权利要求43所述的多肽，其中所述多肽以15nm至5μm的亲和力结合人cd98hc。
45.如权利要求43或44所述的多肽，其中所述多肽具有cyno交叉反应性。
46.如权利要求43至45中任一项所述的多肽，其中所述多肽以80nm至5μm的亲和力与cyno cd98hc结合。
47.一种多肽，其包含与cd98hc蛋白特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含由根据eu编号的380、382、384、385、386、387、422、424、426、428、434、438和440组成的一组氨基酸位置中的至少八、九、十、十一、十二或十三个取代。
48.如权利要求47所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的d、m、n、p、f或h、位置382处的r、y、f、s、w、y、k或n、位置384处的l、y、a、s或f、位置385处的f、k、d、m、i、n、y、l或h、位置386处的t、p、e、k、a、v、d、t或f、位置387处的n、l、y、r、g、s、d或t、位置422处的i、k、r、t、f或h、位置424处的v、w、g、l、i、p或y、位置426处的d、a、q、w、l或p、位置428处的l、位置434处的s、位置438处的i、f、n、p或s和位置440处的k、t、i或f。
49.一种多肽，其包含与cd98hc蛋白特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含由根据eu编号的378、380、382、383、384、385、386、387、389、421、422、424、426、428、434、436、438、440和442组成的一组氨基酸位置中的至少八、九、十、十一、十二、十三、十四、十五、十六、十七、十八或十九个取代。
50.如权利要求49所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置378处的s或v、位置380处的d、位置382处的r、位置383处的t、位置384处的y、位置385处的k、位置386处的p、位置387处的y、位置389处的t、y或f、位置421处的d、e或q、位置422处的i、位置424处的v、位置426处的d、位置428处的l或y、位置434处的s、位置436处的f、位置438处的i或v、位置440处的k和位置442处的q或m。
51.一种多肽，其包含与cd98hc蛋白特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含由根据eu编号的382、383、384、385、386、387、389、421、422、424、426、428、436、438和440组成的一组氨基酸位置中的至少八、九、十、十一、十二、十三、十四或十五个取代。
52.如权利要求51所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含与seq id no:44-45中的任一者的序列的氨基酸111-217具有至少85％、90％或95％序列同一性的序列，其中所述经修饰的ch3结构域包含由以下组成的一组氨基酸位置中的至少八、九、十、十一、十二、十三、十四或十五个取代：位置382处的r、位置383处的t、位置384处的y、位置385处的k、位置386处的p、位置387处的y、位置389处的t、位置421处的d、位置422处的i、位置424处的v、位置426处的d、位置428处的l、位置436处的f、位置438处的i和位置440处的k。
53.如权利要求51或52所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置382处的r、位置383处的t、位置384处的y、位置385处的k、位置386处的p、位置387处的y、位置389处的t、位置421处的d、位置422处的i、位置424处的v、位置426处的d、位置436处的f、位置438处的i和位置440处的k。
54.如权利要求51至53中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seq idno:44。
55.如权利要求51或52所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置382处的r、位置383处的t、位置384处的y、位置385处的k、位置386处的p、位置387处的y、位置389处的t、位置421处的d、位置422处的i、位置424处的v、位置426处的d、位置428处的l、位置436处的f、位置438处的i和位置440处的k。
56.如权利要求51、52和55中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seqid no:45。
57.一种多肽，其包含与cd98hc蛋白特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含：
58.如权利要求8至57中任一项所述的多肽，其中所述位置是相对于seq id no:1被取代。
59.一种多肽，其包含与转铁蛋白受体(tfr)特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含含有422、424、426、433、434、438和440的一组氨基酸位置中的五、六或七个氨基酸取代，
60.一种多肽，其包含与转铁蛋白受体(tfr)特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含含有380和382-389的一组氨基酸位置中的三、四、五、六、七或八个氨基酸取代和/或一个或两个氨基酸缺失；以及
61.一种多肽，其包含与转铁蛋白受体(tfr)特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含含有序列vfscsvmhealhnhytqks(seq id no:57)中的至少一个氨基酸取代的序列，
62.如权利要求61所述的多肽，其中所述序列包含含有422、424、426、433、434、438和440的一组氨基酸位置中的五、六或七个氨基酸取代。
63.一种多肽，其包含与转铁蛋白受体(tfr)特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含含有序列avewesngqpenn(seq id no:56)中的至少一个氨基酸取代和/或缺失的第一序列，以及
64.如权利要求63所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含含有380和382-389的一组氨基酸位置中的三、四、五、六、七或八个氨基酸取代。
65.如权利要求63或64所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含含有422、424、426、433、434、438和440的一组氨基酸位置中的五、六或七个氨基酸取代。
66.如权利要求63至65中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含序列seq id no:56中的一个或两个氨基酸缺失。
67.如权利要求59至66中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域为fc多肽的一部分。
68.如权利要求59至67中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置382处的f。
69.如权利要求59至68中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置383处的a或极性氨基酸。
70.如权利要求69所述的多肽，其中所述极性氨基酸为y或s。
71.如权利要求59至70中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置384处的g、n或酸性氨基酸。
72.如权利要求71所述的多肽，其中所述酸性氨基酸为d或e。
73.如权利要求59至72中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置389处的n、r或极性氨基酸。
74.如权利要求73所述的多肽，其中所述极性氨基酸为s或t。
75.如权利要求59至74所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含相对于序列seqid no:56的β-折叠位置处的至少一个氨基酸取代。
76.如权利要求75所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含相对于序列seq idno:56的β-折叠位置处的一、二或三个氨基酸取代。
77.如权利要求75或76所述的多肽，其中所述β-折叠位置选自由以下组成的组：位置380、382和383，其中所述位置是根据eu编号确定的。
78.如权利要求75至77所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含相对于序列seqid no:56的β-折叠位置380处的氨基酸取代。
79.如权利要求78所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的e、n、f或y。
80.如权利要求79所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置380处的e。
81.如权利要求75至80中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含相对于序列seq id no:56的β-折叠位置382处的氨基酸取代。
82.如权利要求81所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置382处的f。
83.如权利要求75至82中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含相对于序列seq id no:56的β-折叠位置383处的氨基酸取代或氨基酸缺失。
84.如权利要求83所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置383处的y或a。
85.如权利要求83或84所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置383处的y。
86.如权利要求59至85中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含相对于序列seq id no:57的β-折叠位置处的至少一个氨基酸取代。
87.如权利要求86所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含相对于序列seq idno:57的β-折叠位置处的一、二、三或四个氨基酸取代。
88.如权利要求86或87所述的多肽，其中所述β-折叠位置选自由以下组成的组：根据eu编号的位置424、426、438和440。
89.如权利要求86至88中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含相对于序列seq id no:57的β-折叠位置424处的氨基酸取代。
90.如权利要求89所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置424处的a。
91.如权利要求86至90中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含相对于序列seq id no:57的β-折叠位置426处的氨基酸取代。
92.如权利要求91所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置426处的e。
93.如权利要求86至92中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含相对于序列seq id no:57的β-折叠位置438处的氨基酸取代。
94.如权利要求93所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置438处的y。
95.如权利要求86至94中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含相对于序列seq id no:57的β-折叠位置440处的氨基酸取代。
96.如权利要求95所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置440处的l。
97.如权利要求59至96中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置433处的h或e。
98.如权利要求97所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置433处的h。
99.如权利要求59至98中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置434处的n或g。
100.如权利要求99所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置434处的n。
101.如权利要求59至100中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含选自以下的至少一个位置：位置380处的e、n、f或y、位置382处的f、位置383处的y、s、a或氨基酸缺失、位置384处的g、d、e或n、位置385处的d、g、n或a、位置386处的q、s、g、a或n、位置387处的k、i、r或g、位置388处的e、l、d或q以及位置389处的n、t、s或r。
102.如权利要求59至101中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含选自以下的五、六、七或八个位置：位置382处的f、位置383处的y或s、位置384处的g、d或e、位置385处的d、g、n或a、位置386处的q、s或a、位置387处的k、位置388处的e或l、位置389处的n、t或s。
103.如权利要求59至102中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含选自以下的至少一个位置：位置422处的l、位置424处的a、位置426处的e、位置433处的h或e、位置434处的n或g、位置438处的y以及位置440处的l。
104.如权利要求59至103中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含选自以下的五个位置：位置422处的l、位置424处的a、位置426处的e、位置438处的y以及位置440处的l。
105.一种多肽，其包含与转铁蛋白受体(tfr)特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含：
106.如权利要求59至105中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含序列avewfyddskltn(seq id no:58)、avewfygnaketn(seq id no:59)、avewfyeaqklnn(seq idno:60)、avewfsegsketn(seq id no:61)、avewfsgaqkesn(seq id no:62)或avewfsgaqkltn(seq id no:63)。
107.如权利要求59至106中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含序列lfacevmhealhnhytykl(seq id no:64)。
108.如权利要求59至107中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含序列avewfyddskltn(seq id no:58)和序列lfacevmhealhnhytykl(seq id no:64)。
109.如权利要求59至107中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含序列avewfygnaketn(seq id no:59)和序列lfacevmhealhnhytykl(seq id no:64)。
110.如权利要求59至107中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含序列avewfyeaqklnn(seq id no:60)和序列lfacevmhealhnhytykl(seq id no:64)。
111.如权利要求59至107中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含序列avewfsegsketn(seq id no:61)和序列lfacevmhealhnhytykl(seq id no:64)。
112.如权利要求59至107中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含序列avewfsgaqkesn(seq id no:62)和序列lfacevmhealhnhytykl(seq id no:64)。
113.如权利要求59至107中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含序列avewfsgaqkltn(seq id no:63)和序列lfacevmhealhnhytykl(seq id no:64)。
114.如权利要求59至113中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域进一步包含含有419-421、442和443的位置处的一、二、三、四或五个氨基酸取代，其中所述位置是根据eu编号确定的。
115.如权利要求114所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含位置419处的q或p、位置420处的g或r、位置421处的n或g、位置442处的s或g，和/或位置443处的l或e。
116.如权利要求59至115中任一项所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含与seq id no:72-77中的任一者的氨基酸111-217具有至少85％同一性、至少90％同一性或至少95％同一性的序列。
117.如权利要求116所述的多肽，其中所述经修饰的ch3结构域包含seq id no:72-77中的任一者的氨基酸111-217。
118.如权利要求59至117中任一项所述的多肽，其中所述多肽包含与seq id no:72-77中的任一者的序列具有至少85％同一性、至少90％同一性或至少95％同一性的序列。
119.如权利要求118所述的多肽，其中所述多肽包含seq id no:72-77中的任一者的序列。
120.一种多肽，其包含与转铁蛋白受体(tfr)特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含：位置382处的f、位置383处的y、位置384处的d、位置385处的d、位置386处的s、位置387处的k、位置388处的l、位置389处的t、位置419处的p、位置420处的r、位置421处的g、位置422处的l、位置424处的a、位置426处的e、位置438处的y、位置440处的l、位置442处的g以及位置443处的e，
121.一种多肽，其包含与转铁蛋白受体(tfr)特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含：位置382处的f、位置383处的y、位置384处的g、位置385处的n、位置386处的a、位置387处的k、位置389处的t、位置422处的l、位置424处的a、位置426处的e、位置438处的y、位置440处的l，
122.一种多肽，其包含与转铁蛋白受体(tfr)特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含：位置382处的f、位置383处的y、位置384处的e、位置385处的a、位置387处的k、位置388处的l、位置422处的l、位置424处的a、位置426处的e、位置438处的y、位置440处的l，
123.一种多肽，其包含与转铁蛋白受体(tfr)特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含：位置382处的f、位置384处的e、位置386处的s、位置387处的k、位置389处的t、位置422处的l、位置424处的a、位置426处的e、位置438处的y、位置440处的l，
124.一种多肽，其包含与转铁蛋白受体(tfr)特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含：位置382处的f、位置384处的g、位置385处的a、位置387处的k、位置389处的s、位置422处的l、位置424处的a、位置426处的e、位置438处的y、位置440处的l，
125.一种多肽，其包含与转铁蛋白受体(tfr)特异性结合的经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含：位置382处的f、位置384处的g、位置385处的a、位置387处的k、位置388处的l、位置389处的t、位置422处的l、位置424处的a、位置426处的e、位置438处的y、位置440处的l，
126.一种多肽，其包含seq id no:72、78、84、90、96、102、108、114和120中的任一者的序列。
127.一种多肽，其包含seq id no:73、79、85、91、97、103、109、115和121中的任一者的序列。
128.一种多肽，其包含seq id no:74、80、86、92、98、104、110、116和122中的任一者的序列。
129.一种多肽，其包含seq id no:75、81、87、93、99、105、111、117和123中的任一者的序列。
130.一种多肽，其包含seq id no:76、82、88、94、100、106、112、118和124中的任一者的序列。
131.一种多肽，其包含seq id no:77、83、89、95、101、107、113、119和125中的任一者的序列。
132.一种与tfr特异性结合的fc多肽，其包含经修饰的ch3结构域，其中所述经修饰的ch3结构域包含与序列seq id no:137的氨基酸111-217至少85％(例如至少90％、91％、93％、95％、97％、98％或99％)同一的序列，其中所...
【专利技术属性】
技术研发人员：帕德玛·阿卡佩迪，杰拉尔德·麦克斯韦·切尔夫，凯利·S·丘，马克·S·丹尼斯，谷振宇，米哈利斯·S·卡里奥利斯，海·L·特兰，罗伯特·C·威尔斯，乔伊·余·祖切罗，
申请(专利权)人：戴纳立制药公司，
类型：发明
国别省市：
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