【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药，特别涉及一种多肽片段及其制备方法和应用。
技术介绍
1、镉（cd）是目前已知的毒性最大、在自然界分布最广泛的重金属之一，它能够导致人类许多疾病的发生，例如人们熟知的痛痛病和癌症等（tan h w, et al. rev environcontam toxicol, 2023）。早在1993年，镉就被国际癌症研究机构（iarc）列为ⅰ类致癌物（iarc, 1993）。食用镉污染的食物、饮用镉污染的水、吸烟以及职业性的镉接触是最常见的镉暴露方式（fowler b a, et al. toxicol appl pharmacol, 2009；wang p, et al.environ pollut, 2019）。镉从体内排出是一个十分漫长的过程，它在人体内的生物半衰期长达10~40年（järup l, et al. toxicol appl pharmacol, 2009）。因此，当镉被人体吸收后，很容易在体内累积，对消化系统、呼吸系统、泌尿生殖系统以及循环系统等造成长期且严重的伤害。
2、目前治疗镉中毒的方法有抗氧化剂法和鳌合法等。镉作为一种金属离子，具有较强的氧化性，它对人体造成伤害的一种方式是引起细胞氧化应激，这时就可以利用抗氧化剂来治疗镉中毒。抗氧化剂包括自然界中天然的或合成的化学物质，例如生物体中的蛋白酶类和抗氧化化合物等。抗氧化剂主要是通过清除自由基从而减轻其对dna、细胞生物膜等的损伤。镉引起细胞损伤的方式多种多样，引起氧化应激只是其中一种，所以抗氧化剂对治疗镉中毒收效甚微。鳌合法的原
技术实现思路
1、本专利技术目的在于公开了一种多肽片段及其制备方法和应用，以解决现有技术中所存在的一个或多个技术问题，提供至少一种有益的选择或创造条件。
2、本专利技术第一方面在于提供一种能够与镉离子结合的多肽片段。
3、本专利技术第二方面在于提供所述多肽片段的制备方法。
4、本专利技术第三方面在于提供所述多肽片段的应用方向。
5、本专利技术第一方面在于提供一种多肽片段。所述多肽片段含有如seq id no:1所示的氨基酸序列。seq id no:1所示的氨基酸序列源于核仁磷酸蛋白（npm1）n端的9个氨基酸残基。npm1参与各种细胞过程，包括核糖体成熟、中心体复制、维持基因组稳定性、细胞周期控制和细胞凋亡等，是细胞中的关键角色，可促进核糖体核输出、与核仁核糖核蛋白结构相关联，并与单链核酸相互作用。但现有技术中并无关于npm1具有抗镉毒性的记载。
6、经实验证明，经受镉暴露的细胞模型在所述多肽片段处理后能够显著提高存活率；经受镉暴露的动物模型也在所述多肽片段处理后改善了肝脏损伤和体重减轻的症状。
7、本专利技术第二方面在于提供一种多肽片段的制备方法。所述制备方法包括以下步骤：（1）获取如seq id no:2所示的dna片段，添加粘性末端后与线性化的表达质粒连接，转入大肠杆菌dh5α扩大培养，破碎菌体抽提获得重组质粒；（2）将所述重组质粒转入大肠杆菌bl21 (de3)，诱导表达；（3）诱导表达结束后离心收集菌体，pbs缓冲液重悬后冰上超声至菌液变清亮，再离心收集上清液；（4）向收集的上清液加入gsh琼脂糖凝胶珠孵育6~8小时，离心后弃上清，pbs缓冲液清洗；（5）截取结合在gsh琼脂糖凝胶珠上的多肽并去除gst标签，得到半成品溶液；（6）将所述半成品溶液经透析、沉淀、清洗和干燥，得到所述多肽片段。
8、在本专利技术第二方面的一些应用实施方式中，所述表达质粒为pgex-5x-1，所述扩大培养的培养基含有氨苄青霉素（amp）。
9、在本专利技术第二方面的一些应用实施方式中，所述诱导表达是添加异丙基-β-d-硫代半乳糖苷（iptg）溶液诱导表达，所述iptg溶液的终浓度为0.5 μmol/l，诱导时间为4小时。
10、本专利技术第三方面在于提供所述多肽片段的应用。所述应用通过直接施加所述多肽片段以提高动物镉抗性；以及，提供所述多肽片段在制备具有抗镉毒性活性的产品中的应用；以及，提供所述多肽片段在制备治疗和/或预防镉中毒产品中的应用。
11、在本专利技术第三方面的一些应用实施方式中，所述产品为固态食品或液态食品，所述固态食品为胶囊、冻干粉、吞服片剂、颗粒剂或含片，所述液态食品为口服液或饮料。
12、在本专利技术第三方面的一些应用实施方式中，所述产品的剂型为粉剂、膏剂、凝胶、滴剂、栓剂、锭剂、颗粒、胶囊剂、喷雾、片或丸中的一种。
13、在本专利技术第三方面的一些应用实施方式中，所述产品还含有生理可接受的载体或辅料。
14、与现有的检测技术相比，本专利技术具有以下优势：
15、在镉暴露的细胞模型实验中，对hela和h1299细胞先进行所述多肽片段预处理，能够使细胞模型在后续的镉暴露实验中显著提高存活率。在镉暴露的balb/c小鼠模型实验中，尾静脉注射给药所述多肽片段，可明显降低小鼠血清ast、alt水平以及小鼠肝脏免疫细胞浸润程度，改善镉造成的小鼠体重减轻。实验结果证明所述多肽片段在治疗镉暴露造成的细胞和机体损伤的药理活性，具有开发为相关疾病治疗药物的前景。
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1.一种多肽片段，其特征在于，含有如SEQ ID No:1所示的氨基酸序列。
2.一种多肽片段的制备方法，其特征在于，包括步骤：
3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述表达质粒为pGEX-5X-1，所述扩大培养的培养基含有氨苄青霉素。
4.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述诱导表达是添加异丙基-β-d-硫代半乳糖苷溶液诱导表达，所述异丙基-β-d-硫代半乳糖苷溶液的终浓度为0.5 μmol/L，诱导时间为4小时。
5.权利要求1所述多肽片段在提高动物镉抗性中的应用。
6.权利要求1所述多肽片段在制备具有抗镉毒性活性的产品中的应用。
7.权利要求1所述多肽片段在制备治疗和/或预防镉中毒产品中的应用。
8.根据权利要求7所述应用，其特征在于，所述产品为固态食品或液态食品，所述固态食品为胶囊、冻干粉、吞服片剂、颗粒剂或含片，所述液态食品为口服液或饮料。
9.根据权利要求8所述应用，其特征在于，所述产品的剂型为粉剂、膏剂、凝胶、滴剂、栓剂、锭剂、颗粒、胶囊剂、喷雾、片或丸中
10.根据权利要求8或9所述应用，其特征在于，所述产品还含有生理可接受的载体或辅料。
...【技术特征摘要】
1.一种多肽片段，其特征在于，含有如seq id no:1所示的氨基酸序列。
2.一种多肽片段的制备方法，其特征在于，包括步骤：
3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述表达质粒为pgex-5x-1，所述扩大培养的培养基含有氨苄青霉素。
4.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于，所述诱导表达是添加异丙基-β-d-硫代半乳糖苷溶液诱导表达，所述异丙基-β-d-硫代半乳糖苷溶液的终浓度为0.5 μmol/l，诱导时间为4小时。
5.权利要求1所述多肽片段在提高动物镉抗性中的应用。
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