System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种抗GST标签的单克隆抗体及其应用制造技术_技高网
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一种抗GST标签的单克隆抗体及其应用制造技术

技术编号:42591664 阅读:18 留言:0更新日期:2024-09-03 18:06
本发明专利技术涉及一种抗GST标签的单克隆抗体及其应用,所述抗体包括重链CDR1、重链CDR2和重链CDR3,以及轻链CDR1、轻链CDR2和轻链CDR3;所述重链CDR1的氨基酸序列为SEQ ID NO:1所示;重链CDR2的氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示序列;重链CDR3的氨基酸序列为SEQ ID NO:3所示序列;轻链CDR1的氨基酸序列为SEQ ID NO:4所示序列;轻链CDR2的氨基酸序列为SEQ ID NO:5所示;轻链CDR3的氨基酸序列为SEQ ID NO:6所示;其腹水抗体效价可达4.31×10<supgt;6</supgt;,纯化后抗体亲和力达8.118E‑8,抗体活性高,具有极大地应用潜力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子免疫学领域,更具体地,涉及一种抗gst标签的单克隆抗体及其应用。


技术介绍

1、gst(谷胱甘肽-s-转移酶)标签由211个氨基酸组成,大小约为26kda,可与多种不同蛋白质结合。由于其小巧、稳定、易纯化、易检测以及多功能等优点,成为了在蛋白质研究中广泛使用的标签蛋白之一,如将gst标签与目标蛋白连接起来,通过与相应的抗体(如抗gst标签蛋白的单克隆抗体)结合,从而使得目标蛋白易于检测和纯化。因此,gst标签常用于在分子生物学和生物化学研究中帮助纯化和检测目标蛋白质。但是,目前商品化抗gst标签蛋白的单克隆抗体种类有限,且多需从国外进口,价格十分昂贵。因此,研制一种新的抗gst标签的单克隆抗体,利于分子生物学和生物化学研究,尤其在免疫吸附分离纯化融合蛋白中具有广阔的应用前景。


技术实现思路

1、针对现有技术的以上缺陷或改进需求,本专利技术提供了一种抗gst标签的单克隆抗体及其应用,其目的在于利用gst抗原刺激balb/c小鼠产生抗体,在其体内发现一种高效价的gst标签抗体,通过该抗体可变区基因克隆及测序,获得该抗体重链和轻链互补决定区的氨基酸序列,以此为基础制备抗gst标签的单克隆抗体,由此解决现有gst标签抗体种类较少,通常需进口,价格较贵的技术问题。

2、为实现上述目的,按照本专利技术的一个方面,提供了一种抗gst标签的单克隆抗体,其包括3个重链的互补决定区:重链cdr1、重链cdr2和重链cdr3,以及3个轻链的互补决定区:轻链cdr1、轻链cdr2和轻链cdr3;

3、所述重链cdr1为seq id no:1所示的氨基酸序列w-t-y-s-i-h;

4、所述重链cdr2为seq id no:2所示的氨基酸序列f-i-n-p-t-s-a-y-a-g-y-n-q-q-f-e;

5、所述重链cdr3为seq id no:3所示的氨基酸序列e-r-f-y-g-w-d-y;

6、所述轻链cdr1为seq id no:4所示的氨基酸序列k-s-s-n-s-i-v-h-r-q-g-n-t-y-l-d;

7、所述轻链cdr2为seq id no:5所示的氨基酸序列k-w-s-n-k-f-s;

8、所述轻链cdr3为seq id no:6所示的序列f-n-g-s-h-v-p-w-t。

9、优选地,所述抗gst标签的单克隆抗体,其所述抗体,其重链可变区中fr1-4依次为以下氨基酸序列:

10、包括如seq id no:7,8,9,10所示的氨基酸序列或由其组成,

11、或者与seq id no:7,8,9,10所示的序列具有至少80%,85%,90%同一性的序列,

12、或者与seq id no:7,8,9,10所示的氨基酸序列相比具有一个或多个氨基酸突变的序列。

13、优选地,所述抗gst标签的单克隆抗体,其所述重链可变区中fr1-4依次为以下氨基酸序列:

14、如seq id no:7,8,9,10所示的氨基酸序列,

15、或者与seq id no:7,8,9,10所示的氨基酸序列具有至少91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%,99%或100%序列同一性的序列,

16、或者与seq id no:7,8,9,10所示的氨基酸序列具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸突变的氨基酸序列;所述氨基酸突变,为保守突变,包括置换,插入或缺失。

17、优选地,所述抗gst标签的单克隆抗体,其所述抗体,其轻链可变区中fr1-4依次为以下氨基酸序列:

18、包括如seq id no:11,12,13,14所示的氨基酸序列或由其组成,

19、或者与seq id no:11,12,13,14所示的序列具有至少80%,85%,90%同一性的序列,

20、或者与seq id no:11,12,13,14所示的氨基酸序列相比具有一个或多个氨基酸突变的序列。

21、优选地,所述抗gst标签的单克隆抗体,其所述轻链可变区中fr1-4依次为以下氨基酸序列:

22、如seq id no:11,12,13,14所示的氨基酸序列,

23、或者与seq id no:11,12,13,14所示的氨基酸序列具有至少91%,92%,93%,94%,95%,96%,97%,98%,99%或100%序列同一性的序列,

24、或者与seq id no:11,12,13,14所示的氨基酸序列具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸突变的氨基酸序列;所述氨基酸突变,为保守突变,包括置换,插入或缺失。

25、优选地,所述抗gst标签的单克隆抗体,其所述抗体,其重链氨基酸序列如seq idno:15所示,轻链氨基酸序列如seq id no:16所示。

26、优选地,所述抗gst标签的单克隆抗体,其编码该抗体重链的核酸序列如seq idno:17所示,编码该抗体轻链的核酸序列如seq id no:18所示。

27、按照本专利技术的另一方面,还提供了一种含有编码如本专利技术所述抗gst标签的单克隆抗体的核酸序列的生物材料,其所述生物材料,包括表达载体、表达盒、宿主细胞、工程菌或杂交瘤细胞株。

28、按照本专利技术的另一方面,还提供了一种如本专利技术所述抗gst标签的单克隆抗体在检测、分离和纯化gst标记的靶蛋白中的应用。

29、按照本专利技术的另一方面,还提供了一种检测试剂盒,其包含如本专利技术所述抗gst标签的单克隆抗体。

30、优选地,所述检测试剂盒,其还包括gst标签。

31、总体而言,通过本专利技术所构思的以上技术方案与现有技术相比,由于本专利技术发现的一种新的高效价抗gst标签单抗,能够取得下列有益效果:

32、本专利技术基于小鼠gst抗原免疫实验获得了高效价的抗gst标签抗体,测序获得其可变区氨基酸序列,并通过人工改造获得了该抗体的重组单克隆抗gst标签抗体。本专利技术提供的抗gst标签单克隆抗体与gst标签蛋白的亲和力达到了很高的水平,表明其在与标签蛋白结合时具有很强的亲和性。而且纯化后的抗gst标签单抗活性可高达8.118e-8,这使得该抗体在融合蛋白质的免疫吸附分离纯化中具有广泛的应用前景。

本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种抗GST标签的单克隆抗体,其特征在于,包括3个重链的互补决定区:重链CDR1、重链CDR2和重链CDR3,以及3个轻链的互补决定区:轻链CDR1、轻链CDR2和轻链CDR3;

2.如权利要求1所述的抗GST标签的单克隆抗体,其特征在于,所述抗体,其重链可变区中FR1-4依次为以下氨基酸序列:

3.如权利要求2所述的抗GST标签的单克隆抗体,其特征在于,所述重链可变区中FR1-4依次为以下氨基酸序列:

4.如权利要求1至3任意一项所述的抗GST标签的单克隆抗体,其特征在于,所述抗体,其轻链可变区中FR1-4依次为以下氨基酸序列:

5.如权利要求4所述的抗GST标签的单克隆抗体,其特征在于,所述轻链可变区中FR1-4依次为以下氨基酸序列:

6.如权利要求5所述的抗GST标签的单克隆抗体,其特征在于,所述抗体,其重链氨基酸序列如SEQ ID NO:15所示,轻链氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示;优选编码该抗体重链的核酸序列如SEQ ID NO:17所示,编码该抗体轻链的核酸序列如SEQ ID NO:18所示。</p>

7.一种含有编码如权利要求6所述抗GST标签的单克隆抗体的核酸序列的生物材料,其特征在于,所述生物材料,包括表达载体、表达盒、宿主细胞、工程菌或杂交瘤细胞株。

8.一种如权利要求6所述抗GST标签的单克隆抗体在检测、分离和纯化GST标记的靶蛋白中的应用。

9.一种检测试剂盒,其特征在于,包含如权利要求6所述抗GST标签的单克隆抗体。

10.如权利要求9所述的检测试剂盒,其特征在于,还包括GST标签蛋白。

...

【技术特征摘要】

1.一种抗gst标签的单克隆抗体,其特征在于,包括3个重链的互补决定区:重链cdr1、重链cdr2和重链cdr3,以及3个轻链的互补决定区:轻链cdr1、轻链cdr2和轻链cdr3;

2.如权利要求1所述的抗gst标签的单克隆抗体,其特征在于,所述抗体,其重链可变区中fr1-4依次为以下氨基酸序列:

3.如权利要求2所述的抗gst标签的单克隆抗体,其特征在于,所述重链可变区中fr1-4依次为以下氨基酸序列:

4.如权利要求1至3任意一项所述的抗gst标签的单克隆抗体,其特征在于,所述抗体,其轻链可变区中fr1-4依次为以下氨基酸序列:

5.如权利要求4所述的抗gst标签的单克隆抗体,其特征在于,所述轻链可变区中fr1-4依次为以下氨基酸序列:

6.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员:潘炜松吴川
申请(专利权)人:潘炜松
类型:发明
国别省市:

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