【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于藻类繁殖领域，具体地涉及二苯基氯化碘盐(diphenyleneiodoniumchloride,dpi)在海带配子体快速营养扩繁中抑制配子发生的应用。
技术介绍
1、海带是一种重要的大型经济海藻，在食品、饲料、化工、医药、肥料和能源等领域具有广泛的用途。海带养殖业经过几十年的发展，已成为我国海洋产业的重要组成部分，具有重要的经济价值和生态价值，近年来养殖面积近4万公顷，养殖产量约160多万吨干品，产量、规模位居世界第一。
2、苗种是支撑海带养殖产业的基础。海带的苗种繁育方法主要有两种，其一是基于成熟孢子体采集游孢子，游孢子发育成配子体，通过人工培养配子体，使之生长、发育并完成有性生殖，进而获得孢子体幼苗，该方法称为“采孢子育苗法”。其二是基于配子体克隆，称为“配子体克隆育苗法”。所谓配子体克隆是人为调控培养条件，抑制配子体的配子发生和有性生殖，使配子体仅进行营养生长，形成的多细胞的丝状体。配子体克隆育苗法就是利用配子体克隆，人工调控培养条件，诱导配子体克隆从营养生长转向生殖发育(即诱导配子发生和有性生殖)，进而获得孢子体幼苗。以上两种育苗方法各有优缺点，前者是当前生产中的主流方法，优点是技术成熟、操作简单、应用广泛，不足是育苗时间受限于孢子体成熟时间，产生的幼苗遗传背景复杂、易发生种质混杂等；后者的优点是育苗时间自由、产生的幼苗遗传纯合、易保持良种的优良性状，不足是作为一种新兴的技术其成熟度和稳定性有待提高，如：如何更高效地通过营养生长培养获得足量的配子体克隆，如何更适时且高效地诱导配子体克隆从营养生长
3、在配子体克隆育苗法的实际生产中，第一步是要通过调控培养条件促进快速营养生长以获得足够生物量的配子体克隆，即配子体克隆的营养扩繁阶段；接着是，调控培养条件诱导配子体克隆从营养生长转向配子发生和有性生殖。当前已基本探明了配子体克隆营养生长的培养条件，例如温度、光照(光强、光质和光周期)和营养盐(氮、磷等)。但是，在实际应用中发现，配子体快速营养扩繁的培养条件，如充足的营养盐等容易使得配子体克隆提前进入生殖发育状态而停止营养生长，导致无法获得足量的配子体克隆，进而影响生产。
技术实现思路
1、本专利技术针对上述技术问题提供了一种活性氧抑制剂二苯基氯化碘盐(dpi)在海带配子体快速营养扩繁中抑制配子发生的应用，所述应用方法既能保证配子体克隆进行快速的营养生长，又能有效抑制配子体克隆的生殖发育，在配子体克隆育苗技术规模化生产中具有重要应用价值。
2、本专利技术是通过如下技术方案来实现的：
3、dpi在海带配子体快速营养扩繁中抑制配子发生的应用，所述应用方法为在海带配子体营养扩繁阶段，在培养液中加入0.05μm的活性氧抑制剂，培养周期为12d，每隔12d对配子体进行破碎而后继续培养，直至获得足够的生物量，再调节培养条件诱导营养生长的配子体转向配子发生和有性生殖。
4、作为优选的实施方式之一，海带配子体营养扩繁阶段的培养条件：白光1500lx，光周期16l：8d，温度15℃，培养液为添加nano3、kh2po4终浓度分别为4mg/l、0.4mg/l的灭菌海水，每3d更换培养液一次。
5、作为优选的实施方式之一，海带配子体转向配子发生和有性生殖的培养条件为：白光2500lx，温度10℃，光周期8l：16d，培养液为添加含f/2液体培养基，每3d更换培养液一次。
6、本专利技术与现有技术相比的有益效果：
7、本专利技术方法能够控制海带配子体在营养扩繁阶段发生营养生长停滞而进入生殖发育状态的技术问题，从而能够通过持续的营养生长获得足量的配子体克隆，为实际生产提供稳定的大批量苗种。
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1.DPI在海带配子体快速营养扩繁中抑制配子发生的应用，其特征在于，所述应用方法为在海带配子体营养扩繁阶段，在培养液中加入0.05μM的活性氧抑制剂二苯基氯化碘盐，简称为DPI，培养周期为12d，每隔12d对配子体进行破碎而后继续培养，直至获得足够的生物量，再调节培养条件诱导营养生长的配子体转向配子发生和有性生殖。
2.根据权利要求1所述的DPI在海带配子体快速营养扩繁中抑制配子发生的应用，其特征在于，海带配子体营养扩繁阶段的培养条件：白光1500Lx，光周期16L：8D，温度15℃，培养液为添加NaNO3、KH2PO4终浓度分别为4mg/L、0.4mg/L的灭菌海水，每3d更换培养液一次。
3.根据权利要求1所述的DPI在海带配子体快速营养扩繁中抑制配子发生的应用，其特征在于，海带配子体转向配子发生和有性生殖的培养条件为：白光2500Lx，温度10℃，光周期8L：16D，培养液为添加含F/2液体基础培养基，每3d更换培养液一次。
【技术特征摘要】
1.dpi在海带配子体快速营养扩繁中抑制配子发生的应用，其特征在于，所述应用方法为在海带配子体营养扩繁阶段，在培养液中加入0.05μm的活性氧抑制剂二苯基氯化碘盐，简称为dpi，培养周期为12d，每隔12d对配子体进行破碎而后继续培养，直至获得足够的生物量，再调节培养条件诱导营养生长的配子体转向配子发生和有性生殖。
2.根据权利要求1所述的dpi在海带配子体快速营养扩繁中抑制配子发生的应用，其特征在于，海带配子体营养扩...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘福利，金海平，邢其坤，颜雨，徐园园，
申请(专利权)人：中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：
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