【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于天然活性成分提取领域，具体涉及一种玫瑰活性成分提取的方法及组合物的应用。
技术介绍
1、玫瑰花中含有多种生物活性成分，含有挥发油、槲皮素、苦味素、鞣质、脂肪油、有机酸、红色素、黄色素、β-胡萝卜素、长梗马兜铃素、新唢呐素i及ii等成分。此外，还含有天冬氨酸、苏氨酸、谷氨酸、甘氨酸、脯氨酸、丙氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、胱氨酸等多种氨基酸。
2、一些相关报道显示，玫瑰的提取物具有优异的抗氧化，美容，清除自由基功效，例如，玫瑰花提取物具有提亮肤色的效果，能在一定程度上使得皮肤看起来更加明亮。且玫瑰中还含有维生素c、e，对于 脸上的色斑、黄褐斑等斑点也有一定的淡化作用。玫瑰花含有的总黄酮，具有能调节体内雌激素，改善内分泌失调；能有效清除体内氧自由基，抗氧化能力非常强，还能促进体内血液循环，调节身体。
3、传统利用玫瑰花提取物制备美容养颜，抗氧化类保健产品的方法多为水提、醇提物直接应用或与其他同样具有类似功效的成分进行配伍，这类做法确实能够获得具有相应效果的组合物，且发挥萃取物本身的功效，但方案精细度不足，过于繁杂的配伍与天然玫瑰相比差异较大，为了迎合大众对天然来源的品质追求，需要对提取工艺和配方进行优化。
4、玫瑰的萃取工艺中，醇提可以获得黄酮，多酚，鞣质这类具有天然抗氧化活性的成分，具有抑制黑色素，清除自由基等功效。但现有的玫瑰的提取物产品存在两个主要的问题，一是不同玫瑰品种的差异较大，不同品种甚至不同批次的原料其活性成分差别大，无法形成统一稳定的产品，二是工业化的配方
5、此外，产品在体外的稳定性也是该类产品品质的一个重要指标，直接决定了产品在人体内发挥的功效，如何在不添加额外工业化辅料的条件下仍然保持与化学合成产品相当的稳定性也是本专利技术一个重要的考量方向。
技术实现思路
1、针对现有技术的缺点，本专利技术公开一种玫瑰提取复合物的制备方法及组合物配置方法，具有模拟天然玫瑰成分，抗氧化，抑制黑色素以及稳定的优势。
2、本专利技术的工艺如下：
3、（1）取玫瑰样品，前处理后进行发酵和醇提，获得玫瑰固态发酵提取物；
4、（2）对步骤（1）的玫瑰固态发酵提取液进行质谱分析，获得黄酮类，酚酸类和鞣质类化合物的比例；
5、（3）分别采用黄酮，酚酸和鞣质提取方法提取玫瑰中的黄酮，酚酸和鞣质，并按照步骤（2）的比例配置，获得玫瑰提取复合物。
6、优选地，所述玫瑰为墨红玫瑰。
7、优选地，所述前处理为：玫瑰先在25-35℃的低温条件下干燥再碾碎成粉末，称取粉碎好的玫瑰粉末，加入蒸馏水搅拌均匀后灭菌备用。
8、进一步地，料液比为1：1。
9、 进一步地，所述前处理为：玫瑰先在25-35℃的低温条件下干燥再碾碎成粉末，称取20 g粉碎好的玫瑰粉末于250 ml三角瓶中，加入 20 ml蒸馏水搅拌均匀后灭菌备用，即料液比1:1。
10、优选地，所述发酵方案为：向三角瓶中接入枯草芽孢杆菌种子液，再次搅拌均匀，于恒温摇床发酵。
11、 进一步地，所述发酵方案为：向三角瓶中接入1 ml枯草芽孢杆菌种子液（种子液培养在lb液体培养基中，od600=2.2），再次搅拌均匀，于恒温摇床30℃中发酵24 h，得到固态发酵液。
12、优选地，所述醇提为用乙醇超声破碎，离心取上清后进行旋蒸。
13、 进一步的，所述乙醇超声破碎为用70%乙醇（200ml）超声破碎1 h。
14、优选地，所述步骤（3）黄酮提取方法为酶解法。
15、进一步地，所述酶解法：以料液重量比为1∶3将玫瑰固态发酵物与水混合，放入酶反应器中，在ph5，温度50℃的条件下用复合酶酶解1.5h。其中复合酶用量为：纤维素酶为80-100u/g，果胶酶80-100u/g。结束后将酶解液煮沸2分钟，灭酶。将酶解液转入超临界co2流体萃取釜中，以二氧化碳为溶剂，以无水乙醇为夹带剂，萃取压力30-40mpa，萃取温度为35-55℃，萃取时间为2h，co2流速为30-50l/h，夹带剂用量为30-40％。通过减压分离釜，其中分离压力为5-10mpa，温度40-50℃。
16、优选地，所述步骤（3）鞣质提取方法为醇提法。
17、进一步地，所述鞣质提取方法为：将玫瑰原料适当粉碎，按料液重量比1：10加水，在70℃条件下，提取2次，每次1小时，提取液过滤，滤液合并后，采用大孔树脂柱水洗，再用50％乙醇洗柱，乙醇洗脱液于50℃减压浓缩，浓缩液经真空干燥得到玫瑰鞣质提取物。
18、优选地，所述酚酸的提取方法为：将玫瑰粉末和乙醇按照料液重量比1：20配置，随后进行超声处理，次数为2次，每次30分钟，在超声处理液中加入单宁酶，酶解30分钟，再在温度为60℃，真空度为-0.01mpa至-0.10mpa条件下进行真空浓缩，获得富含酚酸的浓缩液。
19、本专利技术有益效果如下：
20、 （1）本专利技术选定了墨红玫瑰这一特定品种，通过对其有效成分及比例的分析，获得玫瑰提取组合物，通过黑色素抑制，dpph清除和弹性蛋白酶活性测试，证实了其抗衰老，抗氧化性能，且一定程度上优于普通的玫瑰的提取物；
21、 （2）本专利技术的墨红玫瑰体外提取组合物的体外稳定性较好，优于普通的玫瑰的提取物，和现有技术已有的化工产品相当，具有较高的实用价值；
22、 （3）本专利技术相比于化工产品而言尽量保留了天然墨红玫瑰的有效成分配比结构，同时相比于普通提取物而言抗衰老，抗氧化成分的富集程度更高，这一点从效果实验中也得到了验证，虽然针对其他类型的玫瑰可能配比需要调整，但采用本专利技术的方法可以快速获得抗氧化相关有效成分配比。
23、本专利技术为获得纯天然的抗氧化抗衰老组合物提供研究平台，目前的方案仍有进步空间，例如在黄酮类成分中不同的化合物的作用有差异，且质谱方法可以选择目前文献报道中更为精确的方案，可以进一步提高组合物的功能性，但就目前已获得的组合物已经符合基本预期。
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1.一种玫瑰提取复合物的制备方法，其特征在于，包括：
2.如权利要求1所述的玫瑰提取复合物的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）的前处理方法为：玫瑰先在25-35℃的低温条件下干燥再碾碎成粉末，称取粉碎好的玫瑰粉末，加入蒸馏水搅拌均匀后灭菌备用。
3. 如权利要求1所述的玫瑰提取复合物的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）发酵方法为：向三角瓶中接入1 mL枯草芽孢杆菌种子液，所述种子液事先培养在OD600=2.2的LB液体培养基中，再次搅拌均匀，于恒温摇床30℃中发酵24 h，得到固态发酵液。
4. 如权利要求1所述的玫瑰提取复合物的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）醇提方法为乙醇超声破碎，离心取上清后进行旋蒸，所述乙醇超声破碎为在200ml的70%乙醇中超声破碎1 h。
5.如权利要求1所述的玫瑰提取复合物的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）的黄酮提取方法为酶解法，具体为：以料液重量比为1∶3将玫瑰固态发酵物与水混合，放入酶反应器中，在pH5，温度50℃的条件下用复合酶酶解1.5h，其中复合酶用量为：纤维素酶为80-100U/
6.如权利要求1所述的玫瑰提取复合物的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）的酚酸提取方法为：将玫瑰粉末和乙醇按照重量比1：20配置，随后进行超声处理，次数为2次，每次30分钟，在超声处理液中加入单宁酶，酶解30分钟，再在温度为60℃，真空度为-0.01MPa至-0.10MPa条件下进行真空浓缩，获得富含酚酸的浓缩液。
7.如权利要求1所述的玫瑰提取复合物的制备方法，其特征在于，所述鞣质的提取方法为醇提法，具体为：将玫瑰原料适当粉碎，按料液重量比1：10加水，在70℃条件下，提取2次，每次1小时，提取液过滤，滤液合并后，采用大孔树脂柱水洗，再用50％乙醇洗柱，乙醇洗脱液于50℃减压浓缩，浓缩液经真空干燥得到玫瑰鞣质提取物。
8.如权利要求1所述的玫瑰提取复合物的制备方法，其特征在于：所述玫瑰为墨红玫瑰。
9.如权利要求8所述的玫瑰提取复合物的制备方法，其特征在于，所述黄酮，酚酸和鞣质提取物的重量比为2.38：1.22：1。
10.如权利要求1所述的玫瑰提取复合物的制备方法获得的玫瑰提取复合物，其特征在于，提取物中黄酮，酚酸和鞣质提取物的重量比为2.38：1.22：1。
...【技术特征摘要】
1.一种玫瑰提取复合物的制备方法，其特征在于，包括：
2.如权利要求1所述的玫瑰提取复合物的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）的前处理方法为：玫瑰先在25-35℃的低温条件下干燥再碾碎成粉末，称取粉碎好的玫瑰粉末，加入蒸馏水搅拌均匀后灭菌备用。
3. 如权利要求1所述的玫瑰提取复合物的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）发酵方法为：向三角瓶中接入1 ml枯草芽孢杆菌种子液，所述种子液事先培养在od600=2.2的lb液体培养基中，再次搅拌均匀，于恒温摇床30℃中发酵24 h，得到固态发酵液。
4. 如权利要求1所述的玫瑰提取复合物的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）醇提方法为乙醇超声破碎，离心取上清后进行旋蒸，所述乙醇超声破碎为在200ml的70%乙醇中超声破碎1 h。
5.如权利要求1所述的玫瑰提取复合物的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）的黄酮提取方法为酶解法，具体为：以料液重量比为1∶3将玫瑰固态发酵物与水混合，放入酶反应器中，在ph5，温度50℃的条件下用复合酶酶解1.5h，其中复合酶用量为：纤维素酶为80-100u/g，果胶酶80-100u/g，结束后将酶解液煮沸2分钟，灭酶，将酶解液转入超临界co2流体萃取釜中，以二氧化碳为溶剂，以无水乙醇为夹带剂，萃取压力30-40mpa，萃取温度为35-55℃...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈志雄，曹平，洪妮，姚红，陆卫国，曾焕彬，
申请(专利权)人：湖州嘉亨实业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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