【技术实现步骤摘要】
本申请涉及样品中化合物的检测和定量方法。
技术介绍
1、亚精胺是大多数不同人体组织中最丰富的多胺。亚精胺由氨基酸代谢产生，并且包括重要的细胞功能，包括调节细胞生长、增殖、组织再生、dna和rna稳定、酶促调整、翻译调节和自噬。此外，亚精胺表现出抗炎和抗氧化特性，增强线粒体代谢功能和呼吸，促进分子伴侣(chaperone)活性，并改善蛋白质稳态。在正常的衰老过程期间，细胞内亚精胺浓度下降。相反，施用亚精胺与提高酵母、蠕虫、苍蝇和人类免疫细胞的存活率并降低小鼠的年龄相关的死亡率有关。精液中非常高的亚精胺浓度可以防止细胞衰老并赋予生殖细胞系长期存活。亚精胺稳态受到营养吸收、肠道来源、内源性生物合成、降解和区室之间的主动转运系统的影响。
2、亚精胺的许多抗衰老特性与亚精胺通过刺激细胞保护性巨自噬来确保蛋白质稳态的能力存在因果关系。亚精胺通过抑制几种乙酰转移酶来诱导自噬。亚精胺在人类中维持健康衰老的最佳自噬水平的最佳浓度是正在进行研究的主题。年龄引起的亚精胺下降可能涉及决定亚精胺全身利用度的一种或多种不同因素的改变。亚精胺的生物利用度由这种多胺的不同来源决定：(i)细胞生物合成，(ii)肠道微生物的生产，和(iii)营养供应，以及(iv)分解代谢和(v)尿液排泄。
3、黑果枸杞(lycium ruthenicum)是开花植物，通常称为“俄罗斯枸杞(russian boxthorn)”。黑果枸杞是茄科植物的一员，分布于中亚、俄罗斯南部、中国西北部、印度北部和巴基斯坦。黑果枸杞生长于印度努布拉河谷，以及中亚和中国西北部
4、宁夏枸杞(lycium barbarum)是原产于中国的灌木，但如今遍布亚洲和东南欧。宁夏枸杞是茄科属的两种枸杞(boxthorn)之一，枸杞就是从其中收获的。该灌木是中国北方重要的经济作物。宁夏枸杞的浆果是中医从业者使用的唯一治疗级枸杞种类。
5、检测和定量黑果枸杞和宁夏枸杞中亚精胺化合物的方法将代表对本领域的有益贡献。
技术实现思路
1、在实例中，本公开提供了检测在来自宁夏枸杞和黑果枸杞的提取物中亚精胺化合物的方法，包括：将一定体积的溶剂添加到在容器中的提取物中；从提取物中提取亚精胺化合物以提供提取物在溶剂中的溶液；将溶液离心以提供上清液；和将上清液样品呈递至高效液相色谱(“hplc”)。在某些实例中，溶剂可以是乙酸、丙酮、乙腈、苯、丁醇、四氯化碳、氯仿、环己烷、环戊烷、二氯乙烷、二氯甲烷、乙醚、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、二噁烷、丙醚、乙醇、乙酸乙酯、庚烷、己烷、甲醇、甲基乙基酮、辛烷、戊烷、异丙醇、四氯乙烷、四氢呋喃、甲苯、三氯乙烷、水、二甲苯或其混合物。在某些实例中，溶剂可以是甲醇或甲醇和水的混合物。在某些实例中，提取可包括对容器中的溶剂和提取物进行超声处理或者使容器中的溶剂和提取物回流。在某些实例中，超声处理可以以约20khz至约170khz的频率进行。在某些实例中，超声处理可以以约40khz的频率进行。在某些实例中，超声处理可以持续约15分钟至约120分钟的持续时间。在某些实例中，提取可以持续约30分钟的持续时间。在某些实例中，该方法可以包括通过hplc量化提取物中亚精胺化合物的量。
2、在某些实例中，亚精胺化合物可以包括
3、
4、n1-二氢咖啡酰基-n10-咖啡酰基亚精胺(“dccs”)。
5、在某些实例中，亚精胺化合物可以包括
6、
7、n1-二氢咖啡酰基-n10-(4-β-d-吡喃葡萄糖基)-咖啡酰基亚精胺(“dcgcs”)。
8、在某些实例中，亚精胺化合物可以包括
9、
10、n1-咖啡酰基-n10-二氢咖啡酰基亚精胺(“cdcs”)。
11、在某些实例中，亚精胺化合物可以包括
12、
13、n1,n10-二咖啡酰基亚精胺(“dcs”)。
14、在某些实例中，亚精胺化合物可以包括dccs、dcgcs、cdcs和/或dcs的混合物。
15、在某些实例中，dccs的定量限浓度可以小于约0.5500μg/ml。在某些实例中，dccs的检测限浓度可以小于约0.2750μg/ml。在某些实例中，dccs的量化可以具有小于约1.70％的相对标准偏差(“rsd”)。在某些实例中，dccs的回收率可以是至少约97.30％。
16、在某些实例中，dcgcs的定量限浓度可以小于约0.2500μg/ml。在某些实例中，dcgcs的检测限浓度可以小于约0.1000μg/ml。在某些实例中，dcgcs的量化可以具有小于约2.30％的相对标准偏差(rsd)。在某些实例中，dcgcs的回收率可以是至少93.30％。
17、在某些实例中，cdcs的定量限浓度可以小于约0.1950μg/ml。在某些实例中，cdcs的检测限浓度可以小于约0.0970μg/ml。在某些实例中，cdcs的量化可以具有约1.70％或更低的相对标准偏差(rsd)。在某些实例中，cdcs的回收率可以是约100％。
18、在某些实例中，dcs的定量限浓度可以小于约0.4850μg/ml。在某些实例中，dcs的检测限浓度可以小于约0.1000μg/ml。在某些实例中，dcs的量化可以具有小于约3.40％的相对标准偏差(rsd)。在某些实例中，dcs的回收率可以是至少约97.00％。
19、在某些实例中，亚精胺化合物可以在上清液中稳定至少约24小时。
20、进一步的应用领域将从本文提供的描述中变得显而易见。应当理解的是，这些描述和具体实例仅旨在用于说明的目的，并且不旨在限制本公开的范围。
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1.检测在来自宁夏枸杞或黑果枸杞的提取物中亚精胺化合物的方法，其包括：
2.权利要求1所述的方法，其中所述溶剂为乙酸、丙酮、乙腈、苯、丁醇、四氯化碳、氯仿、环己烷、环戊烷、二氯乙烷、二氯甲烷、乙醚、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、二噁烷、丙醚、乙醇、乙酸乙酯、庚烷、己烷、甲醇、甲基乙基酮、辛烷、戊烷、异丙醇、四氯乙烷、四氢呋喃、甲苯、三氯乙烷、水、二甲苯或其混合物。
3.权利要求1或2所述的方法，其中所述溶剂是甲醇或甲醇和水的混合物。
4.权利要求1至3所述的方法，其中所述提取包括对在所述容器中的所述溶剂和所述提取物进行超声处理或者使在所述容器中的所述溶剂和所述提取物回流。
5.权利要求4所述的方法，其中所述超声处理以约20kHz至约170kHz的频率进行。
6.权利要求4或5所述的方法，其中所述超声处理以约40kHz的频率进行。
7.权利要求1至6所述的方法，其中所述超声处理持续约15分钟至约120分钟的持续时间。
8.权利要求1至7所述的方法，其中所述提取持续约30分钟的持续时间。
9.
10.权利要求1至9所述的方法，其中所述亚精胺化合物包括
11.权利要求1至9所述的方法，其中所述亚精胺化合物包括
12.权利要求1至9所述的方法，其中所述亚精胺化合物包括
13.权利要求1至9所述的方法，其中所述亚精胺化合物包括
14.权利要求1至13所述的方法，其中所述亚精胺化合物包括DCCS、DCGCS、CDCS和/或DCS的混合物。
15.权利要求10或14所述的方法，其中DCCS的定量限浓度小于约0.5500μg/mL。
16.权利要求10、14或15所述的方法，其中DCCS的检测限浓度小于约0.2750μg/mL。
17.权利要求10或14至16所述的方法，其中所述DCCS的所述量化具有小于约1.70％的相对标准偏差(“RSD”)。
18.权利要求10或14至17所述的方法，其中所述DCCS的回收率为至少约97.30％。
19.权利要求11或14所述的方法，其中DCGCS的定量限浓度小于约0.2500μg/mL。
20.权利要求11、14或19所述的方法，其中DCGCS的检测限浓度小于约0.1000μg/mL。
21.权利要求11、14、19或20所述的方法，其中所述DCGCS的所述量化具有小于约2.30％的相对标准偏差(RSD)。
22.权利要求11、14或19至21所述的方法，其中所述DCGCS的回收率为至少约93.30％。
23.权利要求12或14所述的方法，其中CDCS的定量限浓度小于约0.1950μg/mL。
24.权利要求12、14或23所述的方法，其中CDCS的检测限浓度小于约0.0970μg/mL。
25.权利要求12、14、23或24所述的方法，其中所述CDCS的所述量化具有约1.70％或更低的相对标准偏差(RSD)。
26.权利要求12、14或23至25所述的方法，其中所述CDCS的回收率为约100％。
27.权利要求13或14所述的方法，其中DCS的定量限浓度小于约0.4850μg/mL。
28.权利要求13、14或27所述的方法，其中DCS的检测限浓度小于约0.1000μg/mL。
29.权利要求13、14、27或28所述的方法，其中所述DCS的所述量化具有小于约3.40％的相对标准偏差(RSD)。
30.权利要求13、14或27至29所述的方法，其中所述DCS的回收率为至少约97.00％。
31.权利要求1至30所述的方法，其中所述亚精胺化合物在所述上清液中稳定至少约24小时。
...【技术特征摘要】
1.检测在来自宁夏枸杞或黑果枸杞的提取物中亚精胺化合物的方法，其包括：
2.权利要求1所述的方法，其中所述溶剂为乙酸、丙酮、乙腈、苯、丁醇、四氯化碳、氯仿、环己烷、环戊烷、二氯乙烷、二氯甲烷、乙醚、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、二噁烷、丙醚、乙醇、乙酸乙酯、庚烷、己烷、甲醇、甲基乙基酮、辛烷、戊烷、异丙醇、四氯乙烷、四氢呋喃、甲苯、三氯乙烷、水、二甲苯或其混合物。
3.权利要求1或2所述的方法，其中所述溶剂是甲醇或甲醇和水的混合物。
4.权利要求1至3所述的方法，其中所述提取包括对在所述容器中的所述溶剂和所述提取物进行超声处理或者使在所述容器中的所述溶剂和所述提取物回流。
5.权利要求4所述的方法，其中所述超声处理以约20khz至约170khz的频率进行。
6.权利要求4或5所述的方法，其中所述超声处理以约40khz的频率进行。
7.权利要求1至6所述的方法，其中所述超声处理持续约15分钟至约120分钟的持续时间。
8.权利要求1至7所述的方法，其中所述提取持续约30分钟的持续时间。
9.权利要求1至8所述的方法，其中所述方法包括通过hplc量化所述提取物中所述亚精胺化合物的量。
10.权利要求1至9所述的方法，其中所述亚精胺化合物包括
11.权利要求1至9所述的方法，其中所述亚精胺化合物包括
12.权利要求1至9所述的方法，其中所述亚精胺化合物包括
13.权利要求1至9所述的方法，其中所述亚精胺化合物包括
14.权利要求1至13所述的方法，其中所述亚精胺化合物包括dccs、dcgcs、cdcs和/或dcs的混合物。
15.权利要求10或14所述的方法，其中dccs的定量限浓度小于约0.5500μg/ml。
16.权利要求10、14或15所述的方法，其中dccs的检测限浓度小于约0.2750μg/ml...
【专利技术属性】
技术研发人员：甘小娜，陈亮，李波，李峰，郑剑恒，杨静，
申请(专利权)人：捷通国际有限公司，
类型：发明
国别省市：
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