【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及材料领域，具体涉及一种高刚性琼脂糖微球的制备方法。
技术介绍
1、琼脂糖凝胶是天然多糖类层析介质，它具有理想介质的许多特性：高亲水性、高度多孔性、含较多的可活化羟基、不与生物大分子发生非特异性吸附，是迄今为止应用最广泛的一种层析介质。但琼脂糖凝胶的柔软性使其形成的微球在色谱填料的应用中受到限制。当流量增加时，填充琼脂糖基色谱介质的色谱柱有压缩的趋势，压降将急剧增加。虽然大粒子的使用可以减轻这种影响，但这只能以粒子内传质距离的大幅增加为代价，这对生物大分子的分离是不可取的。在高流速时，其负面影响尤为明显，会导致波段变宽以及分辨率变差。因此，迫切需要开发具有增强传质性能的刚性琼脂糖微球，以满足高速色谱的要求。
2、现有的改善琼脂糖微球刚性的技术方法，主要通过交联剂对琼脂糖分子间进行交联，它通过交联剂化学结合多糖链来稳定凝胶主链。交联剂是在凝胶颗粒形成后引入的，称为后交联，即交联剂必须在凝胶颗粒内部扩散，才能接近羟基位置。琼脂糖凝胶网络的空间位阻严重阻碍了扩散过程，所以后交联过程交联剂很难深入琼脂糖骨架内部，因此交联效率大大降低，得到的琼脂糖微球刚性不够。目前还有一种预交联的工艺，即在琼脂糖微球成球时同时引入交联剂，但是在引入交联剂会破坏琼脂糖分子结构，只能添加少量交联剂，对琼脂糖微球刚性的提高有限。而且交联剂的疏水性普遍高于琼脂糖分子，如果为了提高刚性而增加交联剂用量会使交联后琼脂糖微球的疏水性增加，对生物分子的非特异性吸附增加，导致层析介质的选择性降低，对生物分子的分离效果变差。因此需要开发一种能够进一步
技术实现思路
1、本专利技术提供了一种高刚性琼脂糖微球的制备方法，以解决现有的琼脂糖微球的刚性较差的问题：
2、一种高刚性琼脂糖微球的制备方法，包括如下步骤：
3、步骤1)将包含琼脂糖、水、沉淀剂的原料加热至70-120℃混匀得到水相液；所述沉淀剂用于降低琼脂糖在水中的溶解度；
4、步骤2)将所述水相液加入到油相液中，使水相在油相液中分散形成水相液滴，得到分散体系；所述油相液温度为40-90℃；
5、步骤3)将所述分散体系降温至0-40℃，使水相液滴固化，形成琼脂糖微球；
6、步骤4)将琼脂糖微球与交联剂进行交联反应，得到高刚性琼脂糖微球。
7、可选的，所述步骤1)中沉淀剂选自氯化钠、硫酸钠、硝酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钾、硫酸钾、硝酸钾、硫酸镁中的至少一种。
8、所述步骤1)中水相溶液中琼脂糖质量分数为1-20％，电解质的质量分数为0.1％-5％。
9、可选的，所述步骤2)中油相液包含有机溶剂和表面活性剂；所述有机溶剂不溶于水。
10、可选的，所述有机溶剂为甲苯、氯苯、二氯乙烷、白油、液体石蜡、环己烷、异辛醇、异十二烷、邻苯二甲酸酯中的至少一种。
11、所述表面活性剂为司班85、司班80、司班65、吐温80、吐温60、吐温40、乙基纤维素、po-500、油酸、peg400、aeo-7中的至少一种。
12、可选的，所述有机溶剂与水相液的质量比为1-20：1，表面活性剂与有机溶剂的质量比为0.1-20：100。
13、可选的，所述步骤2)中将水相液加入到油相液中，搅拌使水相在油相分散形成1-1000um的水相液滴。
14、可选的，所述步骤3)中将得到的琼脂糖微球进行清洗、过筛。
15、可选的，所述步骤4)中的交联反应为：将琼脂糖微球和交联剂在20-80℃的碱性水溶液中反应1-40h。
16、可选的，所述交联剂为环氧氯丙烷、二乙烯基砜、1,3-二氯丙醇、1,4-丁二醇二缩水甘油醚、丙三醇三缩水甘油醚、聚乙二醇二缩水甘油醚、二溴己烷中的至少一种。
17、可选的，所述琼脂糖微球与交联剂的质量比为0.5-50：1。
18、可选的，所述碱性水溶液的ph为9-15.4。
19、本专利技术技术方案，具有如下优点：
20、本专利技术中通过在水相加入沉淀剂，这些沉淀剂会降低琼脂糖溶解度，使得水相在降温固化时，琼脂糖从溶液中析出时会发生更剧烈的相分离，形成更高的骨架密度，更高的骨架密度对微球有更强的支撑，使微球有更高的刚性。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种高刚性琼脂糖微球的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的高刚性琼脂糖微球的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中沉淀剂选自氯化钠、硫酸钠、硝酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钾、硫酸钾、硝酸钾、硫酸镁中的至少一种；和/或
3.根据权利要求1所述的高刚性琼脂糖微球的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中油相液包含有机溶剂和表面活性剂；所述有机溶剂不溶于水。
4.根据权利要求3所述的高刚性琼脂糖微球的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂为甲苯、氯苯、二氯乙烷、白油、液体石蜡、环己烷、异辛醇、异十二烷、邻苯二甲酸酯中的至少一种；和/或
5.根据权利要求3所述的高刚性琼脂糖微球的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂与水相液的质量比为1-20：1，表面活性剂与有机溶剂的质量比为0.1-20：100。
6.根据权利要求1所述的高刚性琼脂糖微球的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中将水相液加入到油相液中，搅拌使水相在油相分散形成1-1000um的水相液滴。
7.根据权利要求1所述的高刚性琼脂糖微球的
8.根据权利要求1所述的高刚性琼脂糖微球的制备方法，其特征在于，所述步骤4)中的交联反应为：将琼脂糖微球和交联剂在20-80℃的碱性水溶液中反应1-40h。
9.根据权利要求8所述的高刚性琼脂糖微球的制备方法，其特征在于，所述交联剂为环氧氯丙烷、二乙烯基砜、1,3-二氯丙醇、1,4-丁二醇二缩水甘油醚、丙三醇三缩水甘油醚、聚乙二醇二缩水甘油醚、二溴己烷中的至少一种；
10.根据权利要求1～9中任一项所述的制备方法制备得到的高刚性琼脂糖微球。
...【技术特征摘要】
1.一种高刚性琼脂糖微球的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的高刚性琼脂糖微球的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中沉淀剂选自氯化钠、硫酸钠、硝酸钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钾、硫酸钾、硝酸钾、硫酸镁中的至少一种；和/或
3.根据权利要求1所述的高刚性琼脂糖微球的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中油相液包含有机溶剂和表面活性剂；所述有机溶剂不溶于水。
4.根据权利要求3所述的高刚性琼脂糖微球的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂为甲苯、氯苯、二氯乙烷、白油、液体石蜡、环己烷、异辛醇、异十二烷、邻苯二甲酸酯中的至少一种；和/或
5.根据权利要求3所述的高刚性琼脂糖微球的制备方法，其特征在于，所述有机溶剂与水相液的质量比为1-20：1，表面活性剂与有机溶剂的质量比为0.1-20：100。
【专利技术属性】
技术研发人员：张建涛，刘龙，李延军，李振宇，寇晓康，
申请(专利权)人：西安蓝晓科技新材料股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。