【技术实现步骤摘要】
本申请属于体外诊断领域，具体涉及一种微流控芯片及甲型流感病毒检测试剂盒。
技术介绍
1、甲型流感病毒（influenza a virus，简称甲流）是一种常见的流感病毒，其遗传物质为rna，包含多种亚型，可感染野生鸟类、驯养家禽、猪、马和人等多种哺乳类动物并导致流行性感冒。h1及h3型流感病毒是目前已知的能够在人类之间互相传播的甲流病毒之一。人感染流感病毒可导致流感，引发呼吸道疾病，严重时危害生命健康。流感爆发具有季节性，其传播速度快，因而对其进行快速诊断非常必要，可及时提供治疗方案并切断疾病传播。
2、分子诊断主要是以分子生物学方法检测遗传物质的存在，包括其结构及表达水平的变化。它的检测优势在于优异的灵敏度及准确度，主要应用在传染性疾病、遗传病、肿瘤等疾病的检测与诊断。目前分子诊断的主要方法包括荧光定量pcr技术（real-time pcr）、恒温扩增技术、荧光原位杂交技术、基因芯片和测序技术等。
3、现有技术中核酸检测的金标准是荧光定量pcr技术，因其优异的灵敏度及准确性被广泛应用于多种病原体检测。但是荧光定量pcr技术的应用有以下局限性：（1）需要昂贵的仪器；（2）需要专业的人员进行实验操作；（3）对实验环境要求高，需有明确的实验分区；（4）从采样到结果出耗时久，无法满足即时检测的需求。以上这些条件限制了此技术在其他场景的灵活应用，如基层医疗结构、偏远地区医疗场所以及需要快速获得检测结果的机构等。
4、其他方法如针对抗原抗体检测的胶体金免疫层析法操作简便、可以快速获得检测结果，但检测灵敏
5、因此为解决以上问题，亟需一种简便快速、灵敏度及准确度高的检测方法，以实现对病原体在不同场合下的快速诊断。
技术实现思路
1、基于此，本申请一实施例提供一种微流控芯片及甲型流感病毒检测试剂盒。
2、本申请一方面提供一种微流控芯片，由上至下依次包括盖板、第一夹板、第二夹板和底板；
3、所述盖板上设有第一上样腔；
4、所述第一夹板上设有通过流道依次连接的第二上样腔、第一缓冲腔、试纸腔；
5、所述第二夹板上设有通过流道依次连接的反应腔、第二缓冲腔与吸水腔；
6、其中，所述第一上样腔、所述第二上样腔与所述反应腔均相通；所述第一缓冲腔与所述第二缓冲腔相通；所述试纸腔与所述吸水腔相通。
7、在其中一个实施例中，所述试纸腔内设有免疫层析检测试纸。
8、在其中一个实施例中，所述第二夹板上还具有滑动腔，滑动腔通过流道连接所述反应腔，所述滑动腔内设有滑动装置和稀释液封装包，所述滑动装置与所述滑动腔实现动密封，所述滑动装置能够在外力作用下运动以实现刺破所述稀释液封装包，使得稀释液由所述滑动腔进入所述反应腔。
9、在其中一个实施例中，所述滑动装置上设有刺破构件，当向所述稀释液封装包施加朝向所述刺破构件的压力时，所述刺破构件能够刺破所述稀释液封装包，所述稀释液封装包内的稀释液能够流入所述反应腔、所述第二缓冲腔以及第一缓冲腔。
10、在其中一个实施例中，所述盖板上还设有出气孔，所述出气孔与所述反应腔相通，用于排出芯片内部的空气，维持压强。
11、本申请还提供上述的微流控芯片在病原体检测中的应用。
12、本申请另一方面提供一种病原体检测试剂盒，包含上述的微流控芯片。
13、本申请还提供一种甲型流感病毒检测试剂盒，包含所述的微流控芯片与甲型流感病毒核酸检测试剂。
14、在其中一个实施例中，所述甲型流感核酸检测试剂包括检测引物对，所述检测引物对包括：
15、外引物1，所述外引物1的核苷酸序列如seq id no.1所示；
16、外引物2，所述外引物2的核苷酸序列如seq id no.2所示；
17、内引物3，所述内引物3的核苷酸序列如seq id no.3所示；
18、内引物4，所述内引物4的核苷酸序列如seq id no.4所示；
19、环引物5，所述环引物5的核苷酸序列如seq id no.5所示；
20、环引物6，所述环引物6的核苷酸序列如seq id no.6所示。
21、所述内引物3或内引物4的5’端标记有化学修饰基团，所述环引物5或环引物6的5’端标记有荧光基团。
22、可选地，内引物3或内引物4的5’端标记有荧光基团，所述环引物5或环引物6的5’端标记有化学修饰基团。
23、在其中一个实施例中，所述化学修饰基团包括生物素和地高辛中的一种；所述荧光基团包括fam和fitc中的一种。
24、在其中一个实施例中，还包括缓冲液；
25、所述缓冲液包括8mm~12mm的（nh4）2so4、40mm~60mm的kcl，5mm~12mm的mgso4、0.05v/v%~0.15v/v%的tween-20、0.5 mg/ml~1.5 mg/ml的bsa和50 mm~150mm的l-proline。
26、本申请提供一种微流控芯片，由上至下依次包括盖板、第一夹板、第二夹板和底板，通过巧妙的设置成一个一体化小型检测装置。结构位于不同芯片层，保证各操作单元工作独立进行，减少干扰。两夹层之间有对准的缓冲腔，缓冲腔的设计使得产物充分均匀稀释，滑动装置可以精准控制稀释液的释放，吸水腔室可将多余的稀释液吸收，保证层析试纸条结果显示清晰准确。通过使用本装置可以实现简化实验步骤，同时避免了产物转移过程中产生的气溶胶等污染。
27、在检测时，使用此装置操作简便，结果读取直接，不依赖复杂昂贵的实验设备，适合多种检测场景的灵活应用，为poct应用提供新的检测装置。并且可以将反应过程及结果读取步骤进行集合，简化实验步骤。进一步地，采用本申请设计的微流控芯片结合甲型流感病毒检测试剂可以实现核酸快速检测，防止核酸扩增及转移过程中产生的气溶胶污染，且灵敏度和特异性强。
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1.一种微流控芯片，其特征在于，由上至下依次包括盖板、第一夹板、第二夹板和底板；
2.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述试纸腔内设有免疫层析检测试纸。
3.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述第二夹板上还具有滑动腔，滑动腔通过流道连接所述反应腔，所述滑动腔内设有滑动装置和稀释液封装包，所述滑动装置与所述滑动腔实现动密封，所述滑动装置能够在外力作用下运动以实现刺破所述稀释液封装包，使得稀释液由所述滑动腔进入所述反应腔。
4.根据权利要求3所述的微流控芯片，其特征在于，所述滑动装置上设有刺破构件，当向所述稀释液封装包施加朝向所述刺破构件的压力时，所述刺破构件能够刺破所述稀释液封装包，所述稀释液封装包内的稀释液能够流入所述反应腔、所述第二缓冲腔以及第一缓冲腔。
5.根据权利要求1~4任一项所述的微流控芯片，其特征在于，所述盖板上还设有出气孔，所述出气孔与所述反应腔相通，用于排出芯片内部的空气，维持压强。
6.权利要求1~5任一项所述的微流控芯片在病原体检测中的应用。
7.一种病原体检测试剂
8.一种甲型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，包含权利要求1~5任一项所述的微流控芯片与甲型流感病毒核酸检测试剂。
9.根据权利要求8所述的甲型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，所述甲型流感病毒核酸检测试剂包括检测引物对，所述检测引物对包括：
10.根据权利要求8所述的甲型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，所述内引物3或内引物4的5’端标记有化学修饰基团，所述环引物5或环引物6的5’端标记有荧光基团；
11.根据权利要求10所述的甲型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，所述化学修饰基团包括生物素和地高辛中的一种；
12.根据权利要求8~11任一项所述的甲型流感病毒检测试剂盒，其特征在于，还包括缓冲液；
...【技术特征摘要】
1.一种微流控芯片，其特征在于，由上至下依次包括盖板、第一夹板、第二夹板和底板；
2.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述试纸腔内设有免疫层析检测试纸。
3.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述第二夹板上还具有滑动腔，滑动腔通过流道连接所述反应腔，所述滑动腔内设有滑动装置和稀释液封装包，所述滑动装置与所述滑动腔实现动密封，所述滑动装置能够在外力作用下运动以实现刺破所述稀释液封装包，使得稀释液由所述滑动腔进入所述反应腔。
4.根据权利要求3所述的微流控芯片，其特征在于，所述滑动装置上设有刺破构件，当向所述稀释液封装包施加朝向所述刺破构件的压力时，所述刺破构件能够刺破所述稀释液封装包，所述稀释液封装包内的稀释液能够流入所述反应腔、所述第二缓冲腔以及第一缓冲腔。
5.根据权利要求1~4任一项所述的微流控芯片，其特征在于，所述盖板上还设有出气孔，所述出气孔与所述反应腔相通，用于排出...
【专利技术属性】
技术研发人员：王玉宁，安文俊，邱焕杰，吴力强，钱纯亘，
申请(专利权)人：深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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