【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于肽提取，具体涉及一种高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法。
技术介绍
1、牦牛，作为青藏高原特有的畜种，生活在高寒地带，其骨髓具有极高的营养价值。近年来，从牦牛骨髓中提取小分子肽的技术受到了广泛关注，这种技术能够释放出骨髓中的生物活性肽，这些肽在营养保健、医疗等领域具有广阔的应用前景。
2、牦牛骨髓提取小分子肽的技术，主要是通过一系列的生物化学过程，将牦牛骨髓中的大分子蛋白质降解成小分子肽。这些小分子肽更易被人体吸收，且具有多种生物活性，如抗氧化、抗衰老、提高免疫力等。提取过程通常包括骨髓的粉碎、酶解、分离纯化等步骤，最终得到高纯度的小分子肽。
3、牦牛骨髓小分子肽的提取技术经历了多年的研究和发展。最初，科研人员通过简单的物理或化学方法提取，但效果并不理想。随着生物技术的不断进步，酶解法逐渐成为主流，它能够更温和、更有效地从骨髓中提取出小分子肽。近年来，随着分离纯化技术的提升，提取出的小分子肽纯度越来越高，为其在医药、保健品等领域的应用奠定了坚实基础。
4、牦牛骨髓小分子肽凭借其独特的生物活性和营养价值，在市场上具有广阔的应用前景。它不仅可以作为营养补充剂，提高人体免疫力，还可以作为药物载体，将药物直接输送到靶部位，提高药物的疗效。此外，在化妆品领域，牦牛骨髓小分子肽也有望成为新型抗衰老成分。
5、尽管牦牛骨髓小分子肽的提取技术取得了显著进展，但仍存在一些技术瓶颈，尤其是小分子肽的生物活性稳定性问题。目前，提取出的小分子肽在储存和运输过程中，其生物活性容易受到温度、湿度
6、为了解决这个问题，科研人员正在尝试通过改进提取工艺、使用更稳定的保存方法等方式来提高小分子肽的稳定性。此外，寻找新的添加剂或保护剂，以防止小分子肽在储存和运输过程中失活，也是当前研究的重点。总的来说，牦牛骨髓提取小分子肽的技术虽然仍有挑战，但随着科研的不断深入和技术的进步，相信这些问题终将得到解决，牦牛骨髓小分子肽的应用前景也将更加广阔。
技术实现思路
1、针对上述问题，本专利技术提供一种，主要从预处理角度出发，提高牦牛骨髓小分子肽生物活性稳定性的提取方法，具体方案如下：
2、一种高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法，包括以下步骤：
3、s1、对牦牛骨髓组织进行预处理；
4、s2、对预处理后的组织进行酶解处理；
5、s3、灭酶后分离得到小分子肽溶液；
6、s4、纯化后得到高纯度小分子肽；
7、其中，步骤s2所述酶解，采用木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、羧肽酶、氨肽酶的复合酶，四种酶的酶活比为2:3:1:1。
8、优选地，步骤s2所述酶解，酶的用量为牦牛组织的2.5-3.0wt％，酶解温度为35-40℃，酶解时间为2-4h，ph为7.0-8.0。
9、优选地，步骤s3所述灭酶，将酶解后所得的酶解液加热到80-90℃，保持10-20min后冷却至室温。
10、优选地，步骤s3所述分离，过滤后离心，取上清液为小分子肽溶液。所述离心，3000-5000rps，10-15min。
11、优选地，步骤s4所述纯化，包括超滤，采用截留分子量在3-5kda之间的超滤膜，操作压力为0.1-0.2mpa。
12、优选地，步骤s4所述纯化还包括超滤进行透析脱盐和冻干；透析选择截留分子量为1kda之间的透析袋，每1h换液一次，透析8-12h；透析所得小分子肽溶液冻干得到高纯度小分子肽。
13、优选地，步骤s1依次采用n-乙酰葡萄糖胺、海藻糖、环己六醇和磷脂酰肌醇对牦牛组织进行预处理。
14、优选地，步骤s1所述预处理，包括以下步骤：
15、(1)n-乙酰葡萄糖胺处理：将牦牛骨髓组织放入pbs缓冲液中，在牦牛骨髓组织中加入n-乙酰葡萄糖胺，搅拌处理；
16、(2)海藻糖处理：在步骤(1)处理后的组织中加入海藻糖，搅拌混合后静置处理；
17、(3)环己六醇处理：在步骤(2)处理后的组织中加入环己六醇，搅拌混合；
18、(4)磷脂酰肌醇处理：在步骤(3)处理后的组织中加入磷脂酰肌醇，搅拌混合后静置。
19、优选地，上述预处理还包括：
20、(5)热处理：将步骤(4)处理后的组织在55-65℃水浴下热处理30-40min。
21、优选地，上述步骤(1)采用的牦牛骨髓组织，为经过以下步骤处理后的牦牛骨髓组织：将牦牛骨髓组织剪成小块后，在液氮冷冻条件下，用研钵和研杵将组织研磨成粉末，恢复到常温备用。
22、优选地，步骤(1)所述pbs缓冲液的用量为每10g牦牛骨髓组织用30-50mlpbs缓冲液。
23、优选地，步骤(1)所述n-乙酰葡萄糖胺的用量为牦牛骨髓组织的1-1.5wt％，处理温度为室温，搅拌时间为10-15min。
24、优选地，步骤(2)所述海藻糖的用量为牦牛骨髓组织的5-6wt％，处理温度为室温，静置时间为15-20min。使海藻糖充分渗透组织。
25、优选地，步骤(3)所述环己六醇用量为牦牛骨髓组织的0.3-0.5wt％。
26、优选地，步骤(4)所述磷脂酰肌醇用量为牦牛骨髓组织的0.3-0.5wt％。搅拌混合，使磷脂酰肌醇溶液均匀覆盖组织表面。静置温度为35-40℃，静置时间为20-30min。
27、有益效果
28、本专利技术通过采用特定试剂组合以及特定处理顺序，对牦牛骨髓组织进行预处理，增加了牦牛骨髓组织中小分子肽及蛋白质的稳定性，在后续处理过程中不易变性，同时通过预处理中特定试剂对产物肽链的影响，提高了产品的生物活性稳定性。
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1.一种高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法，其特征在于：步骤S2所述酶解，酶的用量为牦牛组织的2.5-3.0wt％，酶解温度为35-40℃，酶解时间为2-4h，pH为7.0-8.0。
3.根据权利要求1所述的高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法，其特征在于：步骤S3所述灭酶，将酶解后所得的酶解液加热到80-90℃，保持10-20min后冷却至室温。
4.根据权利要求1所述的高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法，其特征在于：步骤S3所述分离，过滤后离心，取上清液为小分子肽溶液。所述离心，3000-5000rps，10-15min。
5.根据权利要求1所述的高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法，其特征在于：步骤S4所述纯化，包括超滤，采用截留分子量在3-5kDa之间的超滤膜，操作压力为0.1-0.2MPa。
6.根据权利要求1所述的高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法，其特征在于：步骤S4所述纯化还包括超滤进行透析脱盐和冻干；透析选择截留分子量为
7.根据权利要求1所述的高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法，其特征在于：步骤S1依次采用N-乙酰葡萄糖胺、海藻糖、环己六醇和磷脂酰肌醇对牦牛组织进行预处理。
8.根据权利要求1所述的高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法，其特征在于：步骤S1所述预处理，包括以下步骤：
9.根据权利要求8所述的高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法，其特征在于：所述预处理还包括：(5)热处理：将步骤(4)处理后的组织在55-65℃水浴下热处理30-40min。
10.根据权利要求8所述的高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法，其特征在于：步骤(1)所述N-乙酰葡萄糖胺的用量为牦牛骨髓组织的1-1.5wt％，处理温度为室温，搅拌时间为10-15min；步骤(2)所述海藻糖的用量为牦牛骨髓组织的5-6wt％，处理温度为室温，静置时间为15-20min。使海藻糖充分渗透组织；步骤(3)所述环己六醇用量为牦牛骨髓组织的0.3-0.5wt％；步骤(4)所述磷脂酰肌醇用量为牦牛骨髓组织的0.3-0.5wt％。搅拌混合，使磷脂酰肌醇溶液均匀覆盖组织表面。静置温度为35-40℃，静置时间为20-30min。
...【技术特征摘要】
1.一种高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法，其特征在于：步骤s2所述酶解，酶的用量为牦牛组织的2.5-3.0wt％，酶解温度为35-40℃，酶解时间为2-4h，ph为7.0-8.0。
3.根据权利要求1所述的高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法，其特征在于：步骤s3所述灭酶，将酶解后所得的酶解液加热到80-90℃，保持10-20min后冷却至室温。
4.根据权利要求1所述的高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法，其特征在于：步骤s3所述分离，过滤后离心，取上清液为小分子肽溶液。所述离心，3000-5000rps，10-15min。
5.根据权利要求1所述的高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法，其特征在于：步骤s4所述纯化，包括超滤，采用截留分子量在3-5kda之间的超滤膜，操作压力为0.1-0.2mpa。
6.根据权利要求1所述的高稳定性牦牛骨髓小分子肽的提取方法，其特征在于：步骤s4所述纯化还包括超滤进行透析脱盐和冻干；透析选择截留分子量为1kda之间的透析袋，每1h换液一次，透析8-12h；透析所得小分...
【专利技术属性】
技术研发人员：张珍妮，
申请(专利权)人：山东太爱肽生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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