【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及天然产物提取领域。更具体地说，本专利技术涉及天麻中天麻素的提取方法。
技术介绍
1、天麻(gastrodia elata bl.)，兰科天麻属多年生草本植物，天麻素是其主要活性成分。天麻素具有较好的镇静和安眠作用，对神经衰弱、失眠、头痛症状有缓解作用。
2、目前提取天麻素的传统工艺有：醇提法、微波提取法、超声波提取法、酶提取法、发酵提取法以及超临界提取法等。而酶解法是天麻提取使用较多的一种方法，但存在着酶解效率较低的问题，且发酵提取法存在着发酵效率较低的问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供天麻中天麻素的提取方法，通过在酶解过程中引入表面活性剂，表面活性剂可以稳定复合酶的活性、显著降低界面张力并有增溶作用，能加速有效成分的溶出。通过在酶解过程中引入氯化羧甲基铵，能提高复合酶的活性，进而提高酶解效率。且氯化羧甲基铵在后期的发酵过程中还能提高微生物的活性，从而提高天麻细胞壁的破碎程度，加速有效成分溶出。
2、为了实现本专利技术的这些目的和其它优点，提供了天麻中天麻素的提取方法，包括：
3、步骤一、将天麻块茎洗净、切块、破碎为超微粉体后，备用；
4、步骤二、向步骤一中制备的超微粉体中加入表面活性剂、氯化羧甲基铵、水和复合酶进行酶解，得酶解液；
5、步骤三、将步骤二中制备的酶解液进行发酵，发酵过程中进行超声处理，发酵结束后，分离发酵液和菌丝；
6、步骤四、将步骤三中制备的发酵液离心，取上清液，将
7、优选的是，所述的天麻中天麻素的提取方法中，氯化羧甲基铵的添加量为超微粉体质量的0.2-0.4％。
8、优选的是，所述的天麻中天麻素的提取方法中，所述步骤三中，在温度为35-40℃，湿度为70-90％的条件下发酵9-11d。
9、优选的是，所述的天麻中天麻素的提取方法中，所述步骤三中，接种酵母，发酵。
10、优选的是，所述的天麻中天麻素的提取方法中，将酵母按酶解液质量的0.02-0.04％添加。
11、优选的是，所述的天麻中天麻素的提取方法中，所述表面活性剂的添加量为超微粉体质量的0.01-0.03％。
12、优选的是，所述的天麻中天麻素的提取方法中，所述表面活性剂由吐温40和鼠李糖脂复配而成。
13、优选的是，所述的天麻中天麻素的提取方法中，吐温40和鼠李糖脂的质量比为1-2:1。
14、优选的是，所述的天麻中天麻素的提取方法中，所述步骤二中，所述复合酶包含果胶酶、蛋白酶和纤维素酶，按150-250u/g超微粉体加入果胶酶，按150-250u/g超微粉体加入蛋白酶，按15-20fpu/g超微粉体加纤维素酶。
15、优选的是，所述的天麻中天麻素的提取方法中，所述步骤二中，加入复合酶后，调节ph值至5-7后进行酶解，酶解温度为40-50℃，酶解时间为6-8h。
16、优选的是，所述的天麻中天麻素的提取方法中，所述步骤二中水的添加量为超微粉体质量的50-60倍。
17、优选的是，所述的天麻中天麻素的提取方法中，所述步骤三中，发酵过程中每隔70-90min进行一次超声处理，超声波频率为70khz，功率为500w，每次处理时间为40-50min，超声间歇比为20s/5s-30s/5s。
18、优选的是，所述的天麻中天麻素的提取方法中，所述步骤四中，将上清液采用体积分数为60-80％的乙醇回流提取2-4次，合并提取液。
19、优选的是，所述的天麻中天麻素的提取方法中，上清液与乙醇的体积比为1:2-4。
20、优选的是，所述的天麻中天麻素的提取方法中，所述步骤四中，得到提取液后，将提取液上样至大孔树脂色谱柱，采用乙醇-乙酸乙酯混合溶剂洗脱得到洗脱液，再将洗脱液经旋转蒸发，减压浓缩，干燥，即得天麻素。
21、优选的是，所述的天麻中天麻素的提取方法中，氯化羧甲基铵的添加量为超微粉体质量的0.3％。本专利技术至少包括以下有益效果：
22、本专利技术通过在酶解过程中引入表面活性剂，表面活性剂可以稳定复合酶的活性、显著降低界面张力、增加细胞膜的通透性，并有增溶作用，能加速有效成分的溶出。通过在酶解过程中引入氯化羧甲基铵，能提高木质纤维素降解相关的酶的活性，进而提高酶解效率。发酵能破坏细胞壁，氯化羧甲基铵在后期的发酵过程中还能提高微生物的活性，从而提高天麻细胞壁的破碎程度，加速有效成分溶出。
23、本专利技术通过在发酵过程中进行超声处理，超声处理有助于天麻细胞破裂，还可在发酵过程中起到提高反应速率，增强物质传递等作用，因而能促进发酵反应的进行，提高发酵效率。
24、本专利技术引入表面活性剂和氯化羧甲基铵后，两者相互配合，能显著提高天麻素的得率。
25、本专利技术的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本专利技术的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
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1.天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，包括：
2.如权利要求1所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，氯化羧甲基铵的添加量为超微粉体质量的0.2-0.4％。
3.如权利要求1所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，所述步骤三中，在温度为35-40℃，湿度为70-90％的条件下发酵9-11d。
4.如权利要求3所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，所述步骤三中，接种酵母，发酵。
5.如权利要求4所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，将酵母按酶解液质量的0.02-0.04％添加。
6.如权利要求1所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，所述表面活性剂的添加量为超微粉体质量的0.01-0.03％。
7.如权利要求6所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，所述表面活性剂由吐温40和鼠李糖脂复配而成。
8.如权利要求7所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，吐温40和鼠李糖脂的质量比为1-2:1。
9.如权利要求1所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，所述步骤二中，所述复
10.如权利要求9所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，所述步骤二中，加入复合酶后，调节pH值至5-7后进行酶解，酶解温度为40-50℃，酶解时间为6-8h。
11.如权利要求1所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，所述步骤二中水的添加量为超微粉体质量的50-60倍。
12.如权利要求1所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，所述步骤三中，发酵过程中每隔70-90min进行一次超声处理，超声波频率为70kHz，功率为500W，每次处理时间为40-50min，超声间歇比为20s/5s-30s/5s。
13.如权利要求1所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，所述步骤四中，将上清液采用体积分数为60-80％的乙醇回流提取2-4次，合并提取液。
14.如权利要求13所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，上清液与乙醇的体积比为1:2-4。
15.如权利要求1所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，所述步骤四中，得到提取液后，将提取液上样至大孔树脂色谱柱，采用乙醇-乙酸乙酯混合溶剂洗脱得到洗脱液，再将洗脱液经旋转蒸发，减压浓缩，干燥，即得天麻素。
16.如权利要求2所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，氯化羧甲基铵的添加量为超微粉体质量的0.3％。
...【技术特征摘要】
1.天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，包括：
2.如权利要求1所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，氯化羧甲基铵的添加量为超微粉体质量的0.2-0.4％。
3.如权利要求1所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，所述步骤三中，在温度为35-40℃，湿度为70-90％的条件下发酵9-11d。
4.如权利要求3所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，所述步骤三中，接种酵母，发酵。
5.如权利要求4所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，将酵母按酶解液质量的0.02-0.04％添加。
6.如权利要求1所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，所述表面活性剂的添加量为超微粉体质量的0.01-0.03％。
7.如权利要求6所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，所述表面活性剂由吐温40和鼠李糖脂复配而成。
8.如权利要求7所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，吐温40和鼠李糖脂的质量比为1-2:1。
9.如权利要求1所述的天麻中天麻素的提取方法，其特征在于，所述步骤二中，所述复合酶包含果胶酶、蛋白酶和纤维素酶，按150-250u/g超微粉体加入果胶酶，按150-250u/g超微粉体加入蛋白酶，按15-20fpu/g超微粉体加纤维素酶。
【专利技术属性】
技术研发人员：张春颖，杨旭锦，许庆东，
申请(专利权)人：西藏天虹科技股份有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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