用于靶向自身反应性免疫细胞的基于主要组织相容性复合物的嵌合受体(MHC‑CAR)。由此还提供了表达MHC‑CAR的遗传改造的免疫细胞，用于治疗自身免疫性疾病，例如多发性硬化。
【技术实现步骤摘要】
技术介绍
1、自身免疫性疾病的特征为针对自身抗原的异常免疫反应，导致组织的损害或破坏。多发性硬化(ms)是一种中枢神经系统自身免疫性疾病，其中活化的自身反应性t细胞侵袭血脑屏障，启动导致髓磷脂破坏和轴突丧失的炎性反应。尽管ms的病因、与其发病和进展有关的机制以及其后果的确定仍未阐明，但所有可用的证据表明特异性靶向负责ms的病理免疫细胞的疗法将具有在可获得的疗法中改进的治疗后果。reinhard等人,proceedingsof the national academy of sciences(国家科学院院刊),101(suppl 2):14599-14606；2004。该策略可延伸到具有类似机制的其它免疫病症，包括类风湿性关节炎。carol等人,nature reviews immunology(自然评论免疫学),2(2):85-95,2002。
2、主要组织相容性复合物(mhc)，在人类中称为人白细胞(hla)，是对于免疫系统识别外来试剂所必需的一组细胞表面蛋白。mhc复合物结合衍生自病原体的抗原并将其展示给t细胞，其然后被活化，导致消除展示外来抗原的细胞。mhc复合物也可展示完整(和在一些情况下错误折叠)的宿主来源的蛋白到b细胞，从而诱导自身免疫性病症典型的自身抗体反应。jiang等人,international immunology(国际免疫学),25(4):235-246(2013)和busch等人,the embo journal(欧洲分子生物学杂志),15(2):418,(1996)。
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p>技术实现思路1、在一方面，本公开的特征为基于主要组织相容性复合物(mhc)的嵌合受体(car)，包含：(i)与来自参与自身免疫性疾病的抗原的抗原肽缀合的mhc分子的胞外结构域；以及(ii)胞质信号传导结构域、至少一个共刺激结构域或其组合。基于mhc的car可进一步包含位于(i)和(ii)之间的铰链结构域。抗原肽取决于自身免疫性病症，并且可来自髓磷脂碱性蛋白(mbp)、蛋白脂质蛋白质(plp)、胰岛素、谷氨酸脱羧酶或表1所述的其它示例性自身抗原。
2、在一些实例中，基于mhc的嵌合受体包含至少一个共刺激结构域，其可以是来自4-1bb(cd137)的共刺激结构域、来自cd28的共刺激结构域或其组合。在其它实例中，本文所述的基于mhc的嵌合受体可不含胞质信号传导结构域。备选地或另外，mhc-car包含cd3ζ的胞质信号传导结构域。
3、在一些实施方案中，mhc-car中的mhc分子是ⅰ类mhc，例如人ⅰ类mhc。在一些情况下，嵌合受体的胞外结构域包含ⅰ类mhc的α链的胞外结构域，其与抗原肽融合。例如，嵌合受体可以是融合多肽，包含(i)ⅰ类mhc分子的胞外结构域，以及(ii)胞质结构域、至少一个共刺激结构域或其组合。在一个实例中，嵌合受体是融合多肽，其从n末端到c末端包含信号肽、第一肽接头、抗原肽、第二肽接头、巨球蛋白的胞外结构域、第三肽接头、ⅰ类mhc分子、跨膜结构域、至少一个共刺激结构域和cd3ζ。
4、在其它实施方案中，本文所述的基于mhc的嵌合受体包含ⅱ类mhc(例如，人mhcⅱ)或其部分。这样的嵌合受体可包含第一多肽和第二多肽，第一多肽包含第一mhcⅱ类的胞外结构域，第二多肽包含第二mhcⅱ类的β链的胞外结构域，以及其中抗原肽与第一多肽或第二多肽融合，以及其中第一多肽或第二多肽进一步包含胞质信号传导结构域、至少一个共刺激结构域或其组合。在一些实例中，嵌合受体可以是融合多肽，包含(i)第一mhcⅱ类分子的α链的胞外结构域、(ii)第二mhcⅱ类分子的β链的胞外结构域、(iii)抗原肽、以及(iv)胞质信号传导结构域、至少一个共刺激结构域或其组合。在一些实例中抗原蛋白可不与mhcⅱ类连接，而是可作为具有可选的信号肽(例如来自cd150，即mdpkgllsltfvlflslafg(seq idno:388))的单独的融合多肽而表达。在一些实例中，第一mhcⅱ类是hla-dra*1010。备选地或另外，第二mhcⅱ类是hla-drb1*1501。
5、在另一方面，本公开的特征为核酸或核酸组，其共同编码任何本文所述的基于mhc的嵌合受体。在一些情况下，核酸或核酸组可位于一种或多种载体中，例如病毒载体。
6、此外，本公开提供了遗传修饰的免疫细胞(例如，t细胞)，其表达任何本文所述的基于mhc的嵌合受体。在一些情况下，内源性t细胞受体(tcr)的活性可受到抑制，这可通过突变或缺失内源性tcr的α链、内源性tcr的β链或二者以破坏内源性tcr的表面表达来实现。备选地或另外，内源性cd52的表达可受到破坏。
7、在一些实施方案中，本文所述的遗传修饰的免疫细胞可进一步表达自杀基因(例如，rqr8)、标记基因(例如，gfp)或二者。当需要时，免疫细胞可经进一步修饰以进行淋巴结或三级淋巴器官递送和保留。例如，免疫细胞可经进一步改造以过表达vap-1、l-选择蛋白、ccr7、cxcr5或其组合。在一些情况下，内源性鞘氨醇-l-磷酸受体1的表达可在遗传修饰的免疫细胞中被破坏。
8、在一些实施方案中，免疫细胞可经改造以移动至炎症位点，例如使用趋化因子受体例如ccr6(例如，至thl7细胞的位点)、cxcr3或cxcr4(例如，至浆细胞的位点)或通过膜连接的抗原靶向抗体。备选地或另外，遗传修饰的免疫细胞可进一步包含导致pd-1信号传导的阻断的遗传修饰。如果需要并且病症是特别严重的，mhc-car细胞也可经设计以除去或失活旁观者b细胞(用cd19或cd20-car)或浆细胞(用cs1-car和/或cs1敲除)。
9、在一些实施方案中，本文所述的遗传修饰的免疫细胞可以是调节性t细胞，其可以是cd25+和任选地cd4+。在一些情况下，调节性t细胞可衍生自从外周血单核细胞或从脐带血分离的cd25++cd45r+t细胞。在其它情况下，调节性t细胞可包含编码cd25的转基因。任何本文公开的treg细胞可进一步表达对cd19特异性的嵌合受体、对cs-1特异性的嵌合受体或二者。备选地或另外，调节性t细胞可进一步表达ccr6、cxcr5、pd-1或其组合。在一些实例中，调节性t细胞可展示对mog特异性的抗体。
10、在又一方面，本公开提供了用于抑制具有自身免疫性疾病(例如，多发性硬化)的受试者的自身反应性免疫细胞的方法。所述方法可包括给予受试者有效量的本文所述的遗传修饰的免疫细胞，其可为t细胞。
11、在一些实施方案中，遗传修饰的免疫细胞是自体的。在其它实施方案中，遗传修饰的免疫细胞是同种异体的。任何遗传修饰的免疫细胞可给予至受试者的淋巴结。在一些情况下，受试者正经历包含对cd52特异性的抗体的疗法。
12、在一些实施方案中，受试者是具有多发性硬化或有多发性硬化风险的人患者，以及遗传修饰的t细胞是本文所述的treg细胞或细胞毒性淋巴细胞(ctls)。
13、在一些实例中，人患者是早期ms患者，以及treg细本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种基于主要组织相容性复合物(MHC)的嵌合受体，包含：
2.根据权利要求1所述的基于MHC的嵌合受体，其包含至少一个共刺激结构域。
3.根据权利要求2所述的基于MHC的嵌合受体，其中所述至少一个共刺激结构域是来自4-1BB(CD137)的共刺激结构域、来自CD28的共刺激结构域或其组合。
4.根据权利要求2或权利要求3所述的基于MHC的嵌合受体，其中所述基于MHC的嵌合受体不含胞质信号传导结构域。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的基于MHC的嵌合受体，其进一步包含位于(i)和(ii)之间的铰链结构域。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的基于MHC的嵌合受体，其包含CD3ζ的胞质信号传导结构域。
7.根据权利要求1-3中任一项所述的基于MHC的嵌合受体，其中所述抗原肽来自髓磷脂碱性蛋白(MBP)、髓磷脂少突胶质细胞糖蛋白(MOG)、蛋白脂质蛋白质(PLP)、胰岛素、谷氨酸脱羧酶或在表1中所描述。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的基于MHC的嵌合受体，其中所述MHC分子是Ⅰ类MHC。</p>9.根据权利要求8所述的基于MHC的嵌合受体，其中所述Ⅰ类MHC是人Ⅰ类MHC。
10.根据权利要求8或权利要求9所述的基于MHC的嵌合受体，其中所述嵌合受体的胞外结构域包含Ⅰ类MHC的α链的胞外结构域，其与所述抗原肽融合。
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【技术特征摘要】
1.一种基于主要组织相容性复合物(mhc)的嵌合受体，包含：
2.根据权利要求1所述的基于mhc的嵌合受体，其包含至少一个共刺激结构域。
3.根据权利要求2所述的基于mhc的嵌合受体，其中所述至少一个共刺激结构域是来自4-1bb(cd137)的共刺激结构域、来自cd28的共刺激结构域或其组合。
4.根据权利要求2或权利要求3所述的基于mhc的嵌合受体，其中所述基于mhc的嵌合受体不含胞质信号传导结构域。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的基于mhc的嵌合受体，其进一步包含位于(i)和(ii)之间的铰链结构域。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的基于mh...
【专利技术属性】
技术研发人员：J·诺维尔，E·伍德，
申请(专利权)人：朱拉生物公司，
类型：发明
国别省市：
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