【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，更具体地，本专利技术涉及调控胶原产生和治疗皮肤纤维化疾病的靶标nefh及其应用。
技术介绍
1、皮肤纤维化的特征是成纤维细胞的异常增殖和过度积聚的细胞外基质(extracellular matrix,ecm)，在硬皮病(scleroderma)、增生疤痕(hypertrophic scar)、疙瘩瘢痕(keloid)、和移植物抗宿主疾病(graft-vs.-host disease,gvhd)中均会出现(deng cc,hu yf,zhu dh,et al.single-cell rna-seq reveals fibroblastheterogeneity and increased mesenchymal fibroblasts in human fibrotic skindiseases.nat commun.2021；12(1):3709.)。
2、在真皮中，ecm主要由3大部分构成：结构性蛋白、链接/粘连性的蛋白、无形胶状结构。其中，胶原是结构性蛋白的重要成分，而i型胶原占胶原含量的90％左右。研究表明，i型胶原主要由皮肤成纤维细胞产生(hwang sj,kim sh,seo wy,et al.effects of humancollagenα-1type i-derived proteins on collagen synthesis and elastinproduction in human dermal fibroblasts.bmb rep.2021；54(6):329
3、皮肤纤维化是全球医疗保健一大负担，严重影响患者生活质量。到目前为止，皮肤纤维化的机制尚未被彻底阐明，也缺乏彻底的根治方法。因此，本领域亟待寻找抑制皮肤纤维化的有效药物。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种调控胶原产生和治疗皮肤纤维化疾病的靶标nefh及其应用。
2、在本专利技术的第一方面，提供神经丝重链蛋白(nefh)的应用，用于：作为抑制皮肤纤维化或降低皮肤胶原量的靶标；或作为筛选抑制皮肤纤维化或调节皮肤胶原量的药物的靶标。
3、在本专利技术的另一方面，提供神经丝重链蛋白的下调剂的应用，用于制备抑制皮肤纤维化或降低皮肤胶原量的组合物。
4、在一种或多种实施方式中，所述的神经丝重链蛋白为神经细胞来源的或神经细胞中的神经丝重链蛋白。
5、在一种或多种实施方式中，所述神经细胞包括谷氨酸能神经细胞。
6、在一种或多种实施方式中，所述的nefh下调剂抑制i型胶原的产生，减少皮肤胶原的增生。
7、在一种或多种实施方式中，所述的胶原为成纤维细胞产生的i型胶原。
8、在一种或多种实施方式中，所述的抑制皮肤纤维化包括：预防、缓解或治疗皮肤纤维化。
9、在一种或多种实施方式中，所述的降低胶原量包括：预防、缓解或治疗胶原过量产生相关的疾病(皮肤疾病)。
10、在一种或多种实施方式中，所述神经丝重链蛋白的下调剂包括(但不限于)：下调神经丝重链蛋白活性的物质或下调神经丝重链蛋白的表达、稳定性或减少其有效作用时间的物质；较佳地，所述下调剂包括选自(但不限于)：敲除或干扰(沉默)神经丝重链蛋白基因的试剂；针对神经丝重链蛋白的化学小分子拮抗剂或抑制剂；干扰神经丝重链蛋白和效应分子相互作用的试剂；或特异性与神经丝重链蛋白结合的结合分子(如抗体或配体)。
11、在一种或多种实施方式中，所述敲除或沉默神经丝重链蛋白的试剂包括(但不限于)：特异性干扰神经丝重链蛋白的编码基因表达的干扰分子；针对神经丝重链蛋白的同源重组试剂、定点突变试剂或crispr基因编辑试剂，所述试剂将神经丝重链蛋白进行功能丧失性突变。
12、在一种或多种实施方式中，所述干扰分子包括sirna，shrna，mirna，反义核酸等，或能形成所述sirna，shrna，mirna，反义核酸等的构建体。
13、在一种或多种实施方式中，所述干扰分子为shrna，其核苷酸序列如seq id no:2所示。
14、在一种或多种实施方式中，所述的nefh选自下组：(a)氨基酸序列如seq id no:1所示的多肽；(b)将(a)所示的氨基酸序列经过一个或多个(如1～20个，1-10个，1-5个，1-3个或1-2个)氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的具有(a)或(b)多肽功能的nefh衍生物，或其活性片段；(c)序列与seq id no:1所示的氨基酸序列相比，同源性≥90％(如同源性≥92％，≥94％，≥96％，≥98％或≥99％)的nefh衍生物，或其活性片段。
15、在一种或多种实施方式中，用于将干扰分子、sgrna或同源重组试剂等下调剂引入细胞内的表达构建物(表达载体)包括：病毒载体，非病毒载体；较佳地，所述的表达载体包括：腺相关病毒载体，慢病毒载体，腺病毒载体。
16、在本专利技术的另一方面，提供神经丝重链蛋白的上调剂的应用，用于制备促进胶原产生的组合物。
17、在一种或多种实施方式中，所述上调剂包括：编码nefh的多核苷酸或表达构建物，促进nefh基因表达的基因编辑试剂，促进nefh基因启动子驱动能力的上调剂，与所述nefh蛋白相互作用、从而提高其表达或活性的上调剂，nefh的化学上调剂(激动剂或促进剂)。
18、在本专利技术的另一方面，提供特异性识别或扩增神经丝重链蛋白的试剂的用途，用于制备对皮肤纤维化(病症)或胶原产生情况进行诊断或预后的诊断试剂或试剂盒；较佳地，所述的试剂包括(但不限于)：特异性结合神经丝重链蛋白蛋白的结合分子(如抗体或配体)；特异性扩增神经丝重链蛋白基因的引物；特异性识别神经丝重链蛋白基因的探针；或，特异性识别神经丝重链蛋白基因的芯片。
19、在本专利技术的另一方面，提供一种用于抑制皮肤纤维化或降低胶原量的药物组合物或药盒，包括：神经丝重链蛋白的下调剂；较佳地，所述下调剂为shrna，其核苷酸序列如seqid no:2所示。
20、在本专利技术的另一方面，提供一种筛选抑制皮肤纤维化或调节胶原产生的物质的方法，所述方法包括：(1)用候选物质处理一表达体系，该体系表达神经丝重链蛋白；(2)检测所述体系中神经丝重链蛋白的表达或活性；若所述候选物质在统计学上下调(显著下调，如下调10％以上，20％以上，50％以上，80％以上等，或使之不表达或没有活性)神经丝重链蛋白的表达或活性，则该候选物质是抑制皮肤纤维化或减少胶原产生的物质；所述候选物质在统计学上上调(显著上调，如上调10％以上，20％本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.神经丝重链蛋白的应用，用于：作为抑制皮肤纤维化或降低皮肤胶原量的靶标；或作为筛选抑制皮肤纤维化或调节皮肤胶原量的药物的靶标。
2.神经丝重链蛋白的下调剂的应用，用于制备抑制皮肤纤维化或降低皮肤胶原量的组合物。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述神经丝重链蛋白的下调剂包括：下调神经丝重链蛋白活性的物质或下调神经丝重链蛋白的表达、稳定性或减少其有效作用时间的物质；较佳地，所述下调剂包括选自：敲除或干扰经丝重链蛋白基因的试剂；针对神经丝重链蛋白的化学小分子拮抗剂或抑制剂；干扰神经丝重链蛋白和效应分子相互作用的试剂；或特异性与神经丝重链蛋白结合的结合分子。
4.如权利要3所述的应用，其特征在于，所述敲除或沉默神经丝重链蛋白的试剂包括：
5.神经丝重链蛋白的上调剂的应用，用于制备促进胶原产生的组合物。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述上调剂包括：编码Nefh的多核苷酸或表达构建物，促进Nefh基因表达的基因编辑试剂，促进Nefh基因启动子驱动能力的上调剂，与所述Nefh蛋白相互作用、从而提高其表达或活性的
7.特异性识别或扩增神经丝重链蛋白的试剂的用途，用于制备对皮肤纤维化或胶原产生情况进行诊断或预后的诊断试剂或试剂盒；较佳地，所述的试剂包括：特异性结合神经丝重链蛋白蛋白的结合分子；特异性扩增神经丝重链蛋白基因的引物；特异性识别神经丝重链蛋白基因的探针；或，特异性识别神经丝重链蛋白基因的芯片。
8.一种用于抑制皮肤纤维化或降低胶原量的药物组合物或药盒，包括：神经丝重链蛋白的下调剂；较佳地，所述下调剂为shRNA，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
9.一种筛选抑制皮肤纤维化或调节胶原产生的物质的方法，所述方法包括：
10.如权利要求9所述的筛选抑制皮肤纤维化或降低胶原量的物质的方法，其特征在于，
...【技术特征摘要】
1.神经丝重链蛋白的应用，用于：作为抑制皮肤纤维化或降低皮肤胶原量的靶标；或作为筛选抑制皮肤纤维化或调节皮肤胶原量的药物的靶标。
2.神经丝重链蛋白的下调剂的应用，用于制备抑制皮肤纤维化或降低皮肤胶原量的组合物。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述神经丝重链蛋白的下调剂包括：下调神经丝重链蛋白活性的物质或下调神经丝重链蛋白的表达、稳定性或减少其有效作用时间的物质；较佳地，所述下调剂包括选自：敲除或干扰经丝重链蛋白基因的试剂；针对神经丝重链蛋白的化学小分子拮抗剂或抑制剂；干扰神经丝重链蛋白和效应分子相互作用的试剂；或特异性与神经丝重链蛋白结合的结合分子。
4.如权利要3所述的应用，其特征在于，所述敲除或沉默神经丝重链蛋白的试剂包括：
5.神经丝重链蛋白的上调剂的应用，用于制备促进胶原产生的组合物。
6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述上调剂包括：编码nef...
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