一种5′-核苷酸酶的前处理工艺及应用制造技术

技术编号：42541360 阅读：6 留言：0更新日期：2024-08-27 19:45

本发明专利技术涉及医学检验技术领域，具体涉及一种5'‑核苷酸酶的前处理工艺及应用，包括向5'‑核苷酸酶中加入戊二醛、PEG8000和激活剂进行处理，得到处理酶液，将处理酶液置于培养箱培养激活达到平稳状态，利用生化仪和试剂盒对平衡后的处理酶液进行活性测定，处理条件应为：37℃，PH7.0，经过处理的5'‑核苷酸酶活性应降低10％左右。通过该处理方式，可最优化的确保5'‑核苷酸酶的活性和稳定性，并最大化减小离子及PH对5'‑核苷酸酶的影响。该处理方式仅限于针对5'‑核苷酸酶YB92，解决活性受到不同离子及pH因素的影响，易出现不稳定现象的问题。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医学检验，尤其涉及一种5′-核苷酸酶的前处理工艺及应用。

技术介绍

1、5′-核苷酸酶(5′-nt)全称5′-核糖核苷酸磷酸水解酶，是一种特殊的磷酸水解酶主要分布于心、肝、脑、肌肉、肾和肺等器官组织中；5′-nt对底物特异性不高，可作用于多种核苷酸，主要参与核酸的分解代谢，能特异性的催化核苷5′-核苷酸和次黄嘌呤核苷酸。5′-nt在人体的运动，细胞生长发育，纤维蛋白合成，提高表皮或内皮屏障功能，神经传递及淋巴细胞的再循环及粘附，免疫应答等方面均发挥重要的作用。

2、5′-nt活性升高主要见于肝胆系统疾病，如阻塞性黄疸、肝癌、肝炎等，其活性变化与alp一致。但骨骼系统疾病，如肿瘤转移、畸形性骨炎、佝偻病、甲状旁腺功能亢进等，通常alp活性升高，而5′-nt正常。因此alp和5′-nt同时测定有助于肝胆和骨骼系统疾病的鉴别诊断。

3、目前对于5′-nt的测定方法主要是酶法，而5′-nt的活性受到不同离子及ph等因素的影响，容易出现不稳定现象。

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种5′-核苷酸酶的前处理工艺及应用，旨在解决活性受到不同离子及ph因素的影响，易出现不稳定现象的问题。

2、为实现上述目的，第一方面，本专利技术提供了一种5′-核苷酸酶的前处理工艺，包括以下步骤：

3、向5′-核苷酸酶中加入戊二醛、peg8000和激活剂进行处理，得到处理酶液；

4、将所述处理酶液置于培养箱培养激活达到平稳状态；</p>

5、利用生化仪和试剂盒对平衡后的所述处理酶液进行活性测定。

6、其中，所述戊二醛浓度可为0.10％～0.50％(w/v％)，所述peg8000浓度可为0.05％～0.20％(w/v％)，所述激活剂浓度可为0.05％～0.30％(w/v％)。

7、其中，所述激活剂包括mgcl2、cacl2、zncl2、mncl2、mgso4和caso4的任意一种。

8、其中，所述培养箱恒定37℃，培养24h。

9、第二方面，本专利技术还提供了一种5′-核苷酸酶的前处理的应用，包括5′-核苷酸酶质控品的制备，所述5′-核苷酸酶质控品包括ph值为6.5～8.0的缓冲液、防腐剂、稳定剂组合物、表面活性剂和5′-核苷酸酶，所述缓冲液浓度为0.50％～1.50％(w/v％)，所述防腐剂浓度为0.01％～0.10％(w/v％)，所述稳定剂组合物浓度为2.00％～5.00％(w/v％)，所述表面活性剂浓度为0.05％～0.20％(w/v％)，所述5′-核苷酸酶浓度为30u/l～90u/l。

10、本专利技术的一种5′-核苷酸酶的前处理工艺，向5′-核苷酸酶中加入戊二醛、peg8000和激活剂进行处理，得到处理酶液，将所述处理酶液置于培养箱培养激活达到平稳状态，利用生化仪和试剂盒对平衡后的所述处理酶液进行活性测定，处理条件应为：37℃，ph7.0，经过处理的5′-核苷酸酶活性应降低10％左右。通过该处理方式，可最优化的确保5′-核苷酸酶的活性和稳定性，并最大化减小离子及ph对5′-核苷酸酶的影响。该处理方式仅限于针对5′-核苷酸酶yb92，解决活性受到不同离子及ph因素的影响，易出现不稳定现象的问题。

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【技术保护点】

1.一种5'-核苷酸酶的前处理工艺，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种5'-核苷酸酶的前处理工艺，其特征在于，

3.如权利要求1所述的一种5'-核苷酸酶的前处理工艺，其特征在于，

4.如权利要求1所述的一种5'-核苷酸酶的前处理工艺，其特征在于，

5.一种5'-核苷酸酶的前处理的应用，应用于如权利要求1所述的一种5'-核苷酸酶的前处理工艺，其特征在于，

【技术特征摘要】

1.一种5'-核苷酸酶的前处理工艺，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种5'-核苷酸酶的前处理工艺，其特征在于，

3.如权利要求1所述的一种5'-核苷酸酶的前处理工艺，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄木薇，陈丽芳，叶志杰，黄艳妮，
申请(专利权)人：桂林优利特医疗电子有限公司，
类型：发明
国别省市：

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