【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医学，尤其是指circrna-cacna1d在制备脓毒症肺损伤辅助诊断产品和治疗药物中的应用。
技术介绍
1、急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome，ards)是由各种非心源性致病因素所导致的严重急性肺损伤，其临床特征主要表现为顽固性低氧血症和呼吸窘迫。ards在危重症患者中发病率为10.4％，重症ards患者病死率高达45％。在所有导致ards的诱因中，脓毒症是最常见病因，且此类ards患者预后最差。
2、脓毒症是由感染引起的全身性过度炎症反应，可继发多器官功能损伤，肺脏是脓毒症最常累及的器官之一。脓毒症可诱发肺部的炎症和氧化应激反应产生急性肺损伤，严重的肺损伤可引起弥漫性肺间质水肿和肺泡水肿，进而引起ards。因此，如何及时对脓毒症ards进行诊断，以及后续如何针对脓毒症性ards进行特异性治疗，是当前亟待解决的问题。
3、研究表明，血管内皮细胞是脓毒症的重要靶细胞，血管内皮功能障碍在脓毒症诱发的肺损伤及肺外多器官功能损伤中起着关键性作用。因此，积极探索关于控制炎症反应以及减轻血管内皮功能障碍的关键靶点及潜在的分子机制，有助于预防和治疗脓毒症及脓毒症诱发的ards，改善此类患者预后。
4、环状rna(circrna)是一类通过反向剪接形成闭合环状的新型rna分子，该结构特点使得circrna可耐受核酸外切酶降解，因此性质更加稳定、表达量更加丰富、免疫原性更低。此外，circrna还具有序列高度保守以及组织和疾病特异性表达
技术实现思路
1、为解决上述技术问题，本专利技术通过建立脓毒症肺损伤小鼠模型，经高通量测序及qrt-pcr技术，在脓毒症小鼠肺组织中发现一个新的circrna：circrna-cacna1d，该circrna在脓毒症肺损伤小鼠肺组织中高表达。通过敲低该circrna表达，发现可减轻肺部炎症反应、改善血管内皮通透性，减轻肺水肿及肺组织病理损伤，降低脓毒症小鼠的死亡率。
2、本专利技术的第一个目的是提供circrna-cacna1d在制备脓毒症肺损伤辅助诊断产品中的应用，circrna-cacna1d的序列如seq id no.1所示。
3、本专利技术的第二个目的是提供一种脓毒症肺损伤的辅助诊断试剂盒，试剂盒检测样本中circrna-cacna1d的表达量。
4、进一步地，样本为外周血。
5、进一步地，circrna-cacna1d在脓毒症肺损伤患者的外周血中表达量上升。
6、进一步地，上述辅助诊断试剂盒中包括用于扩增circrna-cacna1d的引物。
7、进一步地，上述引物包括正向引物和反向引物，正向引物的序列如seq id no.2所示，反向引物的序列如seq id no.3所示。
8、进一步地，上述辅助诊断试剂盒中还包括用于pcr扩增的组件。
9、本专利技术的第三个目的是提供扩增circrna-cacna1d的引物在制备脓毒症肺损伤辅助诊断试剂盒中的应用。
10、本专利技术的第四个目的是提供circrna-cacna1d在制备脓毒症肺损伤治疗药物中的应用，circrna-cacna1d的序列如seq id no.1所示。
11、进一步地，上述药物敲低circrna-cacna1d的表达。
12、进一步地，上述药物为shrna，shrna的序列如seq id no.4-5所示。
13、本专利技术的上述技术方案相比现有技术具有以下优点：
14、本专利技术提供了circrna-cacna1d在脓毒症肺损伤辅助诊断和治疗中的应用，以circrna-cacna1d为靶点制作脓毒症肺损伤辅助诊断试剂盒，对于准确评估患者病情及预后有重要意义。目前针对脓毒症肺损伤的有效治疗药物较少，而circrna-cacna1d作为闭合环状的新型rna分子，能够耐受核酸外切酶的降解，性质稳定、表达量丰富、参与脓毒症肺损伤的调控，有广阔的应用前景。
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1.circRNA-Cacna1d在制备脓毒症肺损伤辅助诊断产品中的应用，其特征在于：所述circRNA-Cacna1d的序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种脓毒症肺损伤的辅助诊断试剂盒，其特征在于：所述辅助诊断试剂盒用于检测样本中circRNA-Cacna1d的表达量。
3.根据权利要求2所述的辅助诊断试剂盒，其特征在于：所述样本为外周血。
4.根据权利要求2所述的辅助诊断试剂盒，其特征在于：所述辅助诊断试剂盒中包括用于扩增circRNA-Cacna1d的引物。
5.根据权利要求4所述的辅助诊断试剂盒，其特征在于：所述引物包括正向引物和反向引物，正向引物的序列如SEQ ID NO.2所示，反向引物的序列如SEQ ID NO.3所示。
6.根据权利要求2所述的辅助诊断试剂盒，其特征在于：所述辅助诊断试剂盒中还包括用于PCR扩增的组件。
7.扩增circRNA-Cacna1d的引物在制备脓毒症肺损伤辅助诊断试剂盒中的应用。
8.circRNA-Cacna1d在制备治疗脓毒症肺损伤药物中的应用
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述药物敲低circRNA-Cacna1d的表达。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述药物为shRNA，所述shRNA的序列如SEQ ID NO.4-5所示。
...【技术特征摘要】
1.circrna-cacna1d在制备脓毒症肺损伤辅助诊断产品中的应用，其特征在于：所述circrna-cacna1d的序列如seq id no.1所示。
2.一种脓毒症肺损伤的辅助诊断试剂盒，其特征在于：所述辅助诊断试剂盒用于检测样本中circrna-cacna1d的表达量。
3.根据权利要求2所述的辅助诊断试剂盒，其特征在于：所述样本为外周血。
4.根据权利要求2所述的辅助诊断试剂盒，其特征在于：所述辅助诊断试剂盒中包括用于扩增circrna-cacna1d的引物。
5.根据权利要求4所述的辅助诊断试剂盒，其特征在于：所述引物包括正向引物和反向引物，正向引物的序列如seq id no.2所示，反向引...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄建安，王佳佳，刘泽毅，陈成，雷伟，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：
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