【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，具体涉及kalirin及其通路在抑制麦芽酚铝致ht22细胞神经突发育毒性中的应用。
技术介绍
1、铝是一种对神经系统有害的金属物质，如果摄取过多，可能会损伤人类的大脑功能。研究表明，铝进入大脑后，在与认知相关的重要区域聚集，参与和大脑发育有关的很多重要反应，最终导致认知能力的下降，严重危害了铝作业工人的身体健康。因此，研究铝神经毒性的相关机制，寻找能改善铝神经毒性的相关靶点显得尤为重要。当前的研究发现，铝对神经系统产生毒性效应的原因与神经递质变化、脂质过氧化异常、基因表达改变、信号传导路径受损、神经细胞死亡以及神经可塑性损坏等因素有关。其中神经可塑性损伤在铝神经毒性的发生机制中占有一定地位。神经可塑性的具体表现与神经突的生长发育密切相关。
2、神经突，是在神经发育阶段，细胞体向外延伸形成的突起部分称为神经突，神经突生长发育，相互连接，传递信息，最终形成了神经元网络。神经突发育被认为是学习和记忆的发生机制。神经突是产生学习、记忆的基础，也是大脑活动功能的重要基础。所以，铝的神经突变毒性作用是铝诱发神经毒性的发病机制之一。铝有可能通过干预神经突发育来影响神经系统的功能，破坏学习记忆，引起认知功能下降，并介导神经退行性疾病的发生发展。但铝导致神经突发育异常引起神经毒性的具体机制尚未明确，因此深入进行相关机制研究，保护神经突发育，从而及时干预铝的神经毒性非常关键。
3、kalirin 蛋白是一种脑特异性鸟嘌呤核苷酸交换因子（guanine nucleotideexchange factor
4、有研究指出，ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶ⅱ (camkⅱ)在kalirin的上下游通道中起到了对接作用。camkⅱ是兴奋性突触中最丰富的蛋白质，是突触可塑性、学习和记忆的核心，camkⅱ 可磷酸化许多突触蛋白，从而调节它们的结构和功能。camkⅱ的激活可能诱导kalirin的苏氨酸（thr）磷酸化。
5、rac1是一个属于rho 家族的小型 gtp 酶。rho家族的小gtp酶是细胞骨架调控的核心元素，并对众多关键的细胞功能产生影响，如生长、粘附、极性和迁移。kalirin激活rac1信号对于神经突的发育和维持至关重要。相关研究表明，kalirin 为一种神经特异性鸟嘌呤核苷酸交换因子，可通过激活小rho gtpase包括rac1、rhog和rhoａ，调节树突棘形成、突触可塑性和神经突发育的重要过程。
6、越来越多的研究证实了 kalirin 的病理信号与神经突发育等疾病密切相关。神经生长相关蛋白43（growth associated protein 43，gap43）是一种神经系统的生长相关蛋白质，它在神经突发育和神经功能调节中起到作用。微管结合蛋白2（microtubuleassociated protein 2，map2）是一种神经元磷蛋白，在神经元的核周和树突中表达，可作为神经突的标志物，观察神经突发育、形成状况。
技术实现思路
1、本专利技术提供了kalirin及其通路在抑制麦芽酚铝致ht22细胞神经突发育毒性中的应用。
2、本专利技术由如下技术方案实现的：kalirin在抑制麦芽酚铝致ht22细胞神经突发育毒性中的应用，所述kalirin过表达，增加camkⅱ、p-camkⅱ、kalirin、p-thr、rac1-gtp/total rac1、gap43、map2的表达量，抑制或降低麦芽酚铝所致神经突生长发育损伤，使细胞神经突发育速度增加，ht22细胞数量增多，细胞突起更长。
3、进一步的，所述kalirin过表达为用kalirin过表达慢病毒转染ht22细胞，使kalirin过表达，kalirin过表达6h抑制或降低麦芽酚铝所致神经突生长发育损伤。
4、所述kalirin过表达慢病毒为lv-kalrn-sgrna慢病毒。
5、促进剂在减缓麦芽酚铝致ht22细胞神经突发育毒性中的应用，所述促进剂为过表达camkⅱ-kalirin-rac1信号通路蛋白，促进camkⅱ、p-camkⅱ、kalirin、p-thr、rac1-gtp/total rac1、gap43、map2基因表达或蛋白表达。
6、进一步的，所述促进剂为kalirin过表达慢病毒，过表达camkⅱ-kalirin-rac1信号通路蛋白为kalirin过表达慢病毒转染ht22细胞，使kalirin过表达。
7、所述麦芽酚铝致ht22细胞神经突发育毒性为al(mal)3染毒导致 ht22细胞存活率降低，ht22细胞数量减少，细胞突起分支减少，细胞突起长度缩短。
8、本专利技术选取ht22细胞，观察不同剂量麦芽酚铝染毒对ht22细胞神经突发育的影响、camkⅱ-kalirin-rac1信号通路相关蛋白的表达量、gap43和map2的表达量；同时采用kalirin慢病毒转染ht22细胞，使kalirin过表达，随后麦芽酚铝染毒，观察kalirin过表达对ht22细胞神经突发育影响、camkⅱ-kalirin-rac1信号通路的表达量、gap43和map2的表达量。探讨camkⅱ-kalirin-rac1通路在铝致ht22细胞中的神经突发育毒性作用机制。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.Kalirin在抑制麦芽酚铝致HT22细胞神经突发育毒性中的应用，其特征在于：所述Kalirin过表达，增加CaMKⅡ、P-CaMKⅡ、Kalirin、P-Thr、Rac1-GTP/Total Rac1、GAP43、MAP2的表达量，抑制或降低麦芽酚铝所致神经突生长发育损伤，使细胞神经突发育速度增加，HT22细胞数量增多，细胞突起更长。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述Kalirin过表达为用Kalirin过表达慢病毒转染HT22细胞，使Kalirin过表达，Kalirin过表达6h抑制或降低麦芽酚铝所致神经突生长发育损伤。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述Kalirin过表达慢病毒为LV-Kalrn-sgRNA慢病毒。
4.促进剂在减缓麦芽酚铝致HT22细胞神经突发育毒性中的应用，其特征在于：所述促进剂为过表达CaMKⅡ-Kalirin-Rac1信号通路蛋白，促进CaMKⅡ、P-CaMKⅡ、Kalirin、P-Thr、Rac1-GTP/Total Rac1、GAP43、MAP2基因表达或蛋白表达。
6.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述麦芽酚铝致HT22细胞神经突发育毒性为Al(mal)3染毒导致 HT22细胞存活率降低，HT22细胞数量减少，细胞突起分支减少，细胞突起长度缩短。
...【技术特征摘要】
1.kalirin在抑制麦芽酚铝致ht22细胞神经突发育毒性中的应用，其特征在于：所述kalirin过表达，增加camkⅱ、p-camkⅱ、kalirin、p-thr、rac1-gtp/total rac1、gap43、map2的表达量，抑制或降低麦芽酚铝所致神经突生长发育损伤，使细胞神经突发育速度增加，ht22细胞数量增多，细胞突起更长。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述kalirin过表达为用kalirin过表达慢病毒转染ht22细胞，使kalirin过表达，kalirin过表达6h抑制或降低麦芽酚铝所致神经突生长发育损伤。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述kalirin过表达慢病毒为lv-kalrn-sgrna慢病毒。
4.促...
【专利技术属性】
技术研发人员：路小婷，赵丹，王天枢，薛伶珊，赵乐，宋静，王林平，张慧芳，
申请(专利权)人：山西医科大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。