具有抗肿瘤与免疫调节活性的小麦麸皮多糖及其提取方法技术

本发明专利技术公开了一种具有抗肿瘤与免疫调节活性的多糖及其提取方法。该提取多糖的方法，包括如下步骤：用木聚糖酶酶解小麦麸皮，得到多糖；木聚糖酶与所述小麦麸皮的配比为（５Ｕ－１２．５Ｕ）∶１ｇ小麦麸皮。本发明专利技术方法利用小麦麸皮这一农副产品资源，通过加工提取可大量获得以阿拉伯木聚糖（或称戊聚糖）为主的多糖产品，动物实验显示该多糖的免疫调节与抗肿瘤功效堪与临床上应用的抗肿瘤辅助药物相比，而本多糖由于原料价格低廉，来源丰富，更具市场竞争优势，产业化发展前景广阔。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种。
技术介绍
小麦麸皮是小麦加工的副产物，主要由小麦种皮、糊粉层及残余胚乳组成。小麦 麸皮是典型的谷物膳食纤维原料，其组成复杂，除了主要的细胞壁构成物质阿拉伯木聚糖 (或称戊聚糖)夕卜，还有纤维素、木质素、葡聚糖、植酸、淀粉等。目前在我国，小麦麸皮绝大 部分用作畜禽饲料和微生物发酵培养基，高附加值与深入的研究开发主要集中在将其作为 膳食纤维原料，发挥润肠通便，降血脂等生理功能，或作为面团改良剂或食用胶的应用功能 等方面。 国内专利中，多以小麦麸皮为原料制备膳食纤维，如麦麸的多功能转化-膳 食纤维的提取方法(200410006552. x)、多酶分步法制备小麦麸膳食纤维粉的方法(200510019123. 0)、一种从小麦麸中提取多功能膳食纤维的方法(200610024903. 9)、 一种利用超声波辅助酶解制备麦麸膳食纤维的方法(200710135501. 0)，产品均为不可溶 性的麸皮膳食纤维。 多糖是由多个单糖分子縮合、失水而成，是一类分子结构复杂且庞大的糖类物质。 多糖种类繁多，功能性质各异，除淀粉主要作为能量提供者外，现代研究发现许多来源于天 然药用植物、真菌、藻类等的多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗菌、抗凝血、降血脂、降 血糖、抗辐射、抗突变等方面的生物活性。以小麦麸皮为原料开展此方面的研究与产品开 发，相关报道很少。 植酸又名六磷酸肌醇，通常以植酸盐的形式广泛存在于植物细胞壁中(如小麦麸 皮)。植酸因具有很强的金属螯合能力，会影响食物中矿物质的吸收，过去曾被视为营养抑 制剂；另一方面，植酸本身是一种用途广泛的食品添加剂和化工原料，实际生产中也有从小 麦麸皮中提取植酸的工艺。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种提取具有抗肿瘤与免疫调节活性的多糖的方法。 本专利技术所提供的提取多糖的方法，包括如下步骤用木聚糖酶酶解小麦麸皮，得到 酶解产物，即得到多糖；所述木聚糖酶与所述小麦麸皮的配比为(5U-12.5U) : lg小麦麸 皮，具体可为(6. 25U-10U) : lg小麦麸皮。 上述过程中，所述用木聚糖酶酶解小麦麸皮的方法具体可包括如下步骤将所述 小麦麸皮、水与所述木聚糖酶混合，再进行酶解反应；酶解反应的温度为50°C -e(rc，酶解 反应的pH值为5. 0-5. 5，酶解反应的时间为2. Oh-4. 0h。 上述过程中，所述用木聚糖酶酶解小麦麸皮的方法中，所述小麦麸皮与所述水的 配比可为lkg : (4-7)L。 上述过程中，在所述酶解前，所述方法还可包括如下对所述小麦麸皮进行预处理的步骤将所述小麦麸皮进行脱植酸处理和脱淀粉处理，得到脱植酸和脱淀粉的小麦麸皮。 所述脱植酸处理的方法可包括如下步骤用酸性溶液浸泡所述小麦麸皮，收集固相，即得到所述脱植酸的小麦麸皮；所述酸性溶液为盐酸溶液；所述酸性溶液的pH值为3. 0-3. 5、所述浸泡的时间为10h-14h、所述浸泡的温度为23°C _27°C ;所述小麦麸皮与所述酸性溶液的配比为lkg : (4-5)L。 所述脱淀粉处理的方法可包括如下步骤将所述脱植酸的小麦麸皮进行水洗、过筛，得到脱植酸和脱淀粉的小麦麸皮。 上述过程中，在所述酶解后，所述方法还可包括如下纯化的步骤将所述酶解产物用乙醇进行沉淀，收集沉淀。 所述用乙醇进行沉淀的方法中，温度为4-25t:、时间为12-24h、醇沉浓度为65%、用乙醇进行沉淀的次数为2次； 上述过程中，在所述酶解后，在所述用乙醇进行沉淀前，所述方法还可包括如下对所述酶解产物进行浓縮处理的步骤将所述酶解产物进行离心，收集上清液，将所述上清液浓縮至所述上清液体积的1/4-1/6，进一步可为1/5-1/6，得到浓縮液。 上述过程中，在所述酶解后，在对所述酶解产物进行浓縮处理前，所述方法中还可包括如下对所述酶解产物进行灭酶的步骤将所述酶解产物在温度为90-95t:的条件下灭活10-15min。 上述过程中，凡是涉及到小麦麸皮与某物质的配比中，均是指未经任何处理的原始小麦麸皮的量。 由上述任一所述方法得到的多糖也属于本专利技术的保护范围。 所述多糖的主要成分为阿拉伯木聚糖；所述阿拉伯木聚糖的分子量为3. 252X 104Da-3. 450X 104Da。 本专利技术的另一个目的是提供一种增强机体免疫功能的药物、一种肿瘤细胞抑制剂或一种治疗和/或预防肿瘤的药物。 本专利技术所提供的增强机体免疫功能的药物，其活性成分为上述任一所述多糖。 本专利技术所提供的肿瘤细胞抑制剂，其活性成分为上述任一所述多糖。 本专利技术所提供的治疗和/或预防肿瘤的药物，其活性成分为上述任一所述多糖。 上述任一所述多糖在制备增强机体免疫功能药物中的应用也属于本专利技术的保护范围。 上述任一所述多糖在制备肿瘤细胞抑制剂中的应用也属于本专利技术的保护范围。 上述任一所述多糖在制备治疗和/或预防肿瘤的药物中的应用也属于本专利技术的保护范围。 上述任一所述药物或应用，所述肿瘤细胞具体可为S180肿瘤细胞。 本专利技术以小麦麸皮为原料，通过脱植酸、脱淀粉预处理，采用木聚糖酶辅助提取、二级醇沉、真空干燥等工艺步骤，获得目标多糖，该多糖得率为12.5-15.0% (产品与原料干基的质量百分比)，其中阿拉伯木聚糖含量为81. 5-84. 7% (以干基中戊聚糖含量计)。 另参照《药理实验方法学》(人民卫生出版社，第三版，徐叔云等主编)进行目标多糖抗肿瘤及免疫增强功能实验小鼠接种S180肉瘤后24小时随机分为6组阴性对照组(正常小鼠给予同体积的生理盐水)、模型组(接种肿瘤，给予同体积的生理盐水)、目标多糖3个剂量组(100、200、400mg/kg体重，口服连续10天)以及阳性对照组复方环磷酰胺组(25mg/kg，口服)和香菇多糖注射液组(0. 2mg/kg，腹腔注射)，通过观察小鼠体重变化、抑瘤率、脾淋巴细胞转化、NK细胞活性、腹腔巨噬细胞吞噬功能评价该产品的抗肿瘤及免疫调节功能。实验结果表明，本专利技术多糖可增强正常BALB/C小鼠和接种S180肿瘤ICR小鼠的T、 B淋巴细胞转化功能、DTH、 NK细胞杀伤功能、血清抗体产生水平以及巨噬细胞吞噬功能；对S180的抑瘤率可达到50-60%，而阳性对照香燕多糖注射液抑瘤率仅为20-34% ;且本专利技术多糖无抗肿瘤药物可能带来的降低小鼠体重的副作用。 本专利技术方法利用小麦麸皮这一农副产品资源，通过加工提取可大量获得以阿拉伯木聚糖(或称戊聚糖)为主的多糖产品，动物实验显示该多糖的免疫调节与抗肿瘤功效堪与临床上应用的抗肿瘤辅助药物相比，而本多糖由于原料价格低廉，来源丰富，更具市场竞争优势，产业化发展前景广阔。附图说明 图1为多糖提取的流程图。具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。 下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。 小麦麸皮可以从小麦面粉加工企业(如北京古船面粉集团)购买获得；木聚糖酶(xylanase， EC3. 2. 1. 8)为一种商品酶制剂，购自诺维信(中国)投资有限公司。 实施例1、小麦麸皮免疫调节与抗肿瘤活性多糖的提取 —、多糖提取多糖提取的流程图如图1所示。 1)小麦麸皮预处理 称取小麦麸皮100g，分散于500mL pH值为3. 5的稀盐酸溶液本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提取多糖的方法，包括如下步骤：用木聚糖酶酶解小麦麸皮，得到酶解产物，即得到多糖；所述木聚糖酶与所述小麦麸皮的配比为（５Ｕ－１２．５Ｕ）∶１ｇ小麦麸皮。

【技术特征摘要】
一种提取多糖的方法，包括如下步骤用木聚糖酶酶解小麦麸皮，得到酶解产物，即得到多糖；所述木聚糖酶与所述小麦麸皮的配比为(5U-12.5U)∶1g小麦麸皮。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述用木聚糖酶酶解小麦麸皮的方法包 括如下步骤将所述小麦麸皮、水与所述木聚糖酶混合，再进行酶解反应；酶解反应的温度 为50°C -6(TC，酶解反应的pH值为5. 0-5. 5，酶解反应的时间为2. 0h_4. 0h。3. 根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于所述方法中，在所述酶解前，包括如下对所述小麦麸皮进行预处理的步骤将所述小麦麸皮进行脱植酸处理和脱淀粉处理，得到脱植酸和脱淀粉的小麦麸皮。4. 根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于所述方法中，在所述酶解后，包 括如下纯化的步骤将所述酶解产物用乙醇进行沉淀，收集沉淀。5. 根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于所述方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：周素梅，曹丽，王强，刘红芝，张晓娜，任霞，
申请(专利权)人：中国农业科学院农产品加工研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]