System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖杂交瘤细胞株及单克隆抗体制造技术_技高网

一种鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖杂交瘤细胞株及单克隆抗体制造技术

技术编号:42505504 阅读:12 留言:0更新日期:2024-08-22 14:20
本发明专利技术提供一种抗白色、热带念珠菌甘露聚糖杂交瘤细胞株及单克隆抗体,通过小鼠杂交瘤单克隆抗体筛选及RT‑PCR法克隆Ig可变区基因,获得稳定分泌抗白色、热带念珠菌甘露聚糖单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其可变区序列,并用ELISA方法对抗体包容性、特异性、抗体效价进行了鉴定,为抗白色、热带念珠菌甘露聚糖基因工程抗体的研发奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于抗体制备,尤其是涉及鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖杂交瘤细胞株及单克隆抗体


技术介绍

1、假丝酵母菌属( candida)隶属子囊菌门,又称为念珠菌,是一类常见的条件致病菌。通过侵犯宿主的粘膜和组织致病,引发局部及全身的炎症反应。该菌属各种不同菌株致病力差异很大,其中最常见的白色念珠菌,其次为热带念珠菌。

2、甘露聚糖常以糖蛋白的形式存在于多种微生物中,是念珠菌属表面除葡聚糖外的另一重要抗原决定簇。甘露聚糖是机体固有免疫和适应性免疫的重要抗原,能引起很强的抗体反应。

3、近年来,白色念珠菌发病率呈逐渐上升趋势,死亡率更是居高不下,其病亡率与抗真菌治疗时间有着密切的关系,目前诊断念珠病的金标准仍是真菌培养,其培养时间长且阳性率低,不适当或延迟治疗会增加患者的死亡率,因此早期快速检测并采取准确的治疗措施是降低死亡率的关键。本研究专利技术单克隆抗体应用于早期快速检测试剂盒,为检测念珠菌感染提供了新的解决方法。


技术实现思路

1、为解决上述技术问题,本专利技术提供一种鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖杂交瘤细胞株及单克隆抗体。

2、本专利技术采用的技术方案是:一种鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖杂交瘤细胞株,命名为je10,分类为杂交瘤细胞,保藏日期为2023年11月8日,保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc),保藏编号为cgmcc no.45744。

3、一种鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖单克隆抗体,抗体je10包括重链可变区和轻链可变区,重链可变区包括如seq id no:1所示的cdrh1、seq id no:2所示的cdrh2和seqid no:3所示的cdrh3,轻链可变区包括如seq id no:4所示的cdrl1、seq id no:5所示的cdrl2和seq id no:6所示的cdrl3;

4、seq id no:1 dfsftnywmn

5、seq id no:2 eirlksnnyatyyaesvkg

6、seq id no:3 nlgmdy

7、seq id no:4 sasssvtymf

8、seq id no:5 dtsnlas

9、seq id no:6 qqwkwdtyprt

10、优选地,抗体je10重链可变区氨基酸序列为seq id no:7所示,轻链可变区氨基酸序列为seq id no:9所示;

11、重链可变区序列

12、seq id no:7

13、mklscvasdfsftnywmnwvrqspekglewvaeirlksnnyatyyaesvkgrftisrddfkcsiylqmnnlrvedtgvyfctsnlgmdywgqgtsvtvssakttap

14、轻链可变区序列

15、seq id no:9

16、qivltqspaimsaspgekvtltcsasssvtymfwyqqkpgssprllihdtsnlasgvpvrfsgsgsgtsysltlsrveaedaatyycqqwkwdtyprtfgggtkleikradaaptvs

17、优选地,抗体je10由保藏编号为cgmcc no.45744的鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖杂交瘤细胞株产生。

18、核酸分子,包含编码鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖单克隆抗体的核苷酸。

19、优选地,所述核酸分子编码抗体je10的重链可变区的核苷酸序列如seq id no:8所示,所述核酸分子编码抗体je10的轻链可变区的核苷酸序列如seq id no:10所示;

20、重链可变区核苷酸序列

21、seq id no:8

22、atgaaactctcctgtgttgcctctgatttctctttcactaattattggatgaactgggtccgccagtctccagagaagggacttgagtgggttgctgaaattagattgaaatctaataattatgcaacatattatgcggagtctgtgaaagggaggttcaccatctcaagagatgatttcaaatgtagtatctacttacaaatgaacaacttaagggttgaagacactggcgtttatttctgtacttctaacctaggtatggactactggggtcaaggaacctcagtcaccgtctcttcagccaaaacgacagcccca

23、轻链可变区核苷酸序列

24、seq id no:10

25、caaattgttctcacccagtctccagcaatcatgtctgcatctccaggggagaaggtcaccctgacctgcagtgccagctcaagtgtgacttacatgttctggtaccagcagaagccaggatcctcccccagactcctgattcatgacacatccaacctggcttctggagtccctgttcgcttcagtggcagtggctctgggacctcttactctctcacactcagccgagtggaggctgaagatgctgccacttattactgccagcaatggaagtgggatacttacccacggacgttcggtggaggcaccaaactggaaatcaaacgggctgatgctgcaccaactgtatcc

26、一种检测白色念珠菌甘露聚糖和/或热带念珠菌甘露聚糖的试剂盒,包括鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖单克隆抗体。

27、本专利技术具有的优点和积极效果是:提供了鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖单克隆抗体,与白色念珠菌甘露聚糖、热带念珠菌甘露聚糖反应强烈,不与光滑念珠菌甘露聚糖、克柔念珠菌甘露聚糖、近平滑念珠菌甘露聚糖反应,与隐球菌荚膜多糖、1,3-β-d葡聚糖、曲霉半乳甘露聚糖、脂多糖、肽聚糖无交叉反应,基于这些特性,为抗白色、热带念珠菌甘露聚糖基因工程抗体制备奠定了基础。

本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖杂交瘤细胞株,其特征在于:命名为JE10,保藏编号为CGMCC No.45744。

2.一种鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖单克隆抗体,其特征在于:抗体JE10包括重链可变区和轻链可变区,重链可变区包括如SEQ ID NO:1所示的CDRH1、SEQ ID NO:2所示的CDRH2和SEQ ID NO:3所示的CDRH3,轻链可变区包括如SEQ ID NO:4所示的CDRL1、SEQ IDNO:5所示的CDRL2和SEQ ID NO:6所示的CDRL3。

3.一种根据权利要求2所述的鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖单克隆抗体,其特征在于:抗体JE10重链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO:7所示,轻链可变区氨基酸序列为SEQ IDNO:9所示。

4.一种根据权利要求2或3所述的鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖单克隆抗体,其特征在于:抗体JE10由保藏编号为CGMCC No.45744的鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖杂交瘤细胞株产生。

5.核酸分子,其特征在于:包含编码权利要求2或3所述的鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖单克隆抗体的核苷酸。

6.根据权利要求5所述的核酸分子,其特征在于:所述核酸分子编码抗体JE10的重链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO:8所示,所述核酸分子编码抗体JE10的轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO:10所示。

7.一种检测白色念珠菌甘露聚糖和/或热带念珠菌甘露聚糖的试剂盒,其特征在于:包括权利要求2-4中任一所述的鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖单克隆抗体。

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【技术特征摘要】

1.一种鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖杂交瘤细胞株,其特征在于:命名为je10,保藏编号为cgmcc no.45744。

2.一种鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖单克隆抗体,其特征在于:抗体je10包括重链可变区和轻链可变区,重链可变区包括如seq id no:1所示的cdrh1、seq id no:2所示的cdrh2和seq id no:3所示的cdrh3,轻链可变区包括如seq id no:4所示的cdrl1、seq idno:5所示的cdrl2和seq id no:6所示的cdrl3。

3.一种根据权利要求2所述的鼠抗白色、热带念珠菌甘露聚糖单克隆抗体,其特征在于:抗体je10重链可变区氨基酸序列为seq id no:7所示,轻链可变区氨基酸序列为seq idno:9所示...

【专利技术属性】
技术研发人员:周跃辉王玉芳张燕马秀楠刘宇刘骞陈特长刘梦梁河立苑庆华何永胜
申请(专利权)人:天津喜诺生物医药有限公司
类型:发明
国别省市:

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