【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于体外诊断领域，具体涉及一种氨基末端脑钠肽前体检测试剂盒及其方法。
技术介绍
1、氨基末端脑钠肽前体(nt-probnp)在临床中广泛应用于早期发现心力衰竭患者、心衰患者危险分级、心源性猝死的预测、心衰患者的治疗疗效监测及预后评估、急性呼吸困难的鉴别诊断、急性冠脉综合征预后评估以及心外科手术治疗全过程监测。尽管在外周循环中具有生物活性的bnp与生物活性未知的nt-probnp，均是两者的共同前体蛋白probnp裂解产生，同时，bnp与nt-probnp对心衰患者的诊断、管理与风险评估已被诸多研究证实为金标准，但由于bnp稳定性差、半衰期短、不同抗体的捕获位点存在较大差异，均导致不同检验系统间bnp产品相关性极差。而nt-probnp虽然面临o-糖基化位点较多问题，可能影响抗体对位点的捕获，但其优异的临床表现得到医生的普遍认可。因此，亟需开发一种有效的nt-probnp的免疫测定方法。
技术实现思路
1、基于现有技术中存在的不足，本专利技术提供了一种氨基末端脑钠肽前体(nt-probnp)的检测试剂盒。该试剂盒具有优异的灵敏度与精密度，与罗氏试剂盒相关性佳，有较好的临床适用性。
2、本专利技术的第一方面提供了一种氨基末端脑钠肽前体检测试剂盒，该试剂盒包括发光试剂和感光试剂；所述发光试剂中包括发光微球，特异性识别nt-probnp的抗体包被所述发光微球；所述感光试剂包括感光微球，所述感光微球的感光量ps为1.34至16.28。在一些具体实施例中，所述感光试剂的感
3、所述感光微球包括感光物质和载体，所述感光微球在进行光激化学发光检测时的浓度c2选自10μg/ml-200μg/ml，例如为10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、60μg/ml、80μg/ml、100μg/ml、120μg/ml、140μg/ml、160μg/ml、180μg/ml、200μg/ml或它们之间的任意值。
4、在一些实施方式中，所述c2＝(odλ2-b)/k；其中，odλ2是所述感光试剂在波长λ2下对应的吸光度值，所述波长λ2为具有相同浓度的所述感光微球与所述载体在波长-吸光度曲线中具有相同或相近的吸光度值对应的波长；载体在波长λ2下测定浓度-吸光度曲线的线性关系中b是对应的截距，k是对应的斜率。
5、在一些实施方式中，所述感光试剂的感光量ps＝odλ1/c2*103，其中，odλ1是在300nm-800nm范围的可见光区对所述感光试剂进行全波长扫描后所得的波长-吸光度曲线的最大吸收峰所对应的吸光度值，波长λ1是所述最大吸收峰对应的波长。
6、在一些实施方式中，所述波长λ2不等于波长λ1。
7、在一些实施方式中，所述波长λ1为300nm-800nm，例如可以为300nm、400nm、500nm、600nm、700nm、800nm或它们之间的任意值。在一些优选实施方式中，所述波长λ1为600nm-700nm。
8、在一些实施方式中，所述波长λ2为400nm-600nm，例如可以为400nm、450nm、500nm、550nm、600nm或它们之间的任意值。
9、在一些实施方式中，所述感光微球中所述载体与所述感光物质的质量比为10:(0.04-4)，例如可以为10:0.04、10:0.08、10:0.1、10:0.2、10:0.5、10:1、10:1.5、10:2、10:2.5、10:3、10:3.5、10:4或它们之间的任意值。
10、在一些实施方式中，所述载体的粒径为190nm-280nm，例如可以为200nm、220nm、240nm、260nm、280nm或它们之间的任意值。
11、在一些实施方式中，所述发光试剂包括特异性识别氨基末端脑钠肽前体的第5-31位氨基酸的第一抗体和特异性识别nt-probnp的第42-67位氨基酸的第二抗体。
12、在一些具体实施方式中，所述第一抗体特异性识别nt-probnp的第15-27位氨基酸，所述第二抗体特异性识别nt-probnp的第42-46位氨基酸。
13、在一些实施方式中，所述发光试剂中还包括发光微球，所述第一抗体和所述第二抗体中的任一者包被发光微球。
14、在一些实施方式中，所述第一抗体和所述第二抗体中的另一者标记特异性结合配对成员中的一员。
15、在一些实施方式中，所述感光微球标记特异性结合配对成员中的另一员。
16、在一些实施方式中，所述特异性结合配对成员为生物素-链霉亲和素系统。
17、在一些实施方式中，所述第一抗体和所述第二抗体中的另一者标记生物素，所述感光微球标记链霉亲和素。
18、在另一些实施方式中，所述第一抗体和所述第二抗体中的另一者标记链霉亲和素，所述感光微球标记生物素。
19、在一些具体实施方式中，所述第一抗体和所述第二抗体中的任一者包被发光微球，另一者标记生物素，所述感光微球标记链霉亲和素。采用本申请的检测试剂盒进行检测时，首先，第一抗体和第二抗体分别包被发光微球(fg-ab)和标记生物素(bio-ab)，分别为r1和r2；感光微球溶液包被链霉亲和素(gg-sa)。其次，于检测微孔内分别加入r1+r2，以及待检样本或校准品，温浴后在发光微球表面形成双抗体夹心复合物(fg-ab-ag-ab-bio)；无需洗涤再加入感光微球溶液(gg-sa)，再次温浴，发光微球通过表面生物素结合感光微球表面的链霉亲和素，两种微球相互靠近；此时，用激光束激发，诱导上述化学发光过程产生光信号，通过光信号强度来推算待检物中nt-probnp的浓度。
20、在第二方面，本专利技术提供了根据第一方面所述的检测试剂盒在光激化学发光检测nt-probnp、执行nt-probnp国际协调一致性方案、检测协调一致参考物质、判定检测程序的等效性中的应用。
21、本申请的检测试剂盒用于检测nt-probnp，具有优异的灵敏度与精密度，与罗氏试剂盒相关性佳，有较好的临床适用性。
22、下面提供实施例和附图以帮助理解本专利技术。但应理解，这些实施例和附图仅用于说明本专利技术，但不构成任何限制。本专利技术的实际保护范围在权利要求书中进行阐述。应理解，在不脱离本专利技术精神的情况下，可以进行任何修改和改变。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)检测试剂盒，其特征在于，包括发光试剂和感光试剂；所述发光试剂中包括发光微球，特异性识别NT-proBNP的抗体包被所述发光微球；所述感光试剂包括感光微球，所述感光微球的感光量Ps为1.34至16.28。
2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述感光微球在进行光激化学发光检测时的浓度C2选自10μg/mL-200μg/mL。
3.根据权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于，所述感光微球包括感光物质和载体，所述C2＝(ODλ2-b)/k；
4.根据权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于，所述感光试剂的感光量Ps＝ODλ1/C2*103，其中，ODλ1是在300nm-800nm范围的可见光区对所述感光试剂进行全波长扫描后所得的波长-吸光度曲线的最大吸收峰所对应的吸光度值，波长λ1是所述最大吸收峰对应的波长。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的检测试剂盒，其特征在于，所述波长λ2不等于波长λ1；
6.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述感光微球中所述载体与
7.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述发光试剂包括特异性识别氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)的第5-31位氨基酸的第一抗体和特异性识别NT-proBNP的第42-67位氨基酸的第二抗体；
8.根据权利要求7所述的检测试剂盒，其特征在于，所述发光试剂中还包括发光微球，所述第一抗体和所述第二抗体中的任一者包被发光微球，所述第一抗体和所述第二抗体中的另一者标记特异性结合配对成员中的一员，所述感光微球标记特异性结合配对成员中的另一员。
9.根据权利要求8所述的检测试剂盒，其特征在于，所述特异性结合配对成员为生物素-链霉亲和素系统，优选地，所述第一抗体和所述第二抗体中的另一者标记链霉亲和素，所述感光微球标记生物素。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的检测试剂盒在光激化学发光检测NT-proBNP、执行NT-proBNP国际协调一致性方案、检测协调一致参考物质、判定检测程序的等效性中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种氨基末端脑钠肽前体(nt-probnp)检测试剂盒，其特征在于，包括发光试剂和感光试剂；所述发光试剂中包括发光微球，特异性识别nt-probnp的抗体包被所述发光微球；所述感光试剂包括感光微球，所述感光微球的感光量ps为1.34至16.28。
2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述感光微球在进行光激化学发光检测时的浓度c2选自10μg/ml-200μg/ml。
3.根据权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于，所述感光微球包括感光物质和载体，所述c2＝(odλ2-b)/k；
4.根据权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于，所述感光试剂的感光量ps＝odλ1/c2*103，其中，odλ1是在300nm-800nm范围的可见光区对所述感光试剂进行全波长扫描后所得的波长-吸光度曲线的最大吸收峰所对应的吸光度值，波长λ1是所述最大吸收峰对应的波长。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的检测试剂盒，其特征在于，所述波长λ2不等于波长λ1；
6.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述感...
【专利技术属性】
技术研发人员：许家琦，杨阳，黄正铭，李临，
申请(专利权)人：科美博阳诊断技术上海有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。