【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，具体地，涉及靶向b7-h3的抗体、嵌合抗原受体及其应用。
技术介绍
1、b7-h3也称为cd276，是一种i型跨膜蛋白，属于b7-cd28超家族，和pd-l1结构非常类似，b7家族分子可提供刺激信号来增强和维持t细胞免疫应答，也可产生抑制信号来限制和减弱t细胞免疫反应。b7-h3在转录水平上(rna)广泛表达于淋巴组织和非淋巴器官，但是b7-h3的蛋白表达却非常的局限，主要表达在激活的树突状细胞、单核细胞、t淋巴细胞、b淋巴细胞、nk淋巴细胞上，而在其他正常组织中表达量则非常低。
2、最近研究发现b7-h3在多种实体瘤上高表达，例如在肺癌、乳腺癌、胰腺癌、前列腺癌、膀胱癌、肾癌、卵巢癌、脑胶质瘤、子宫内膜癌、腹膜癌、结直肠癌、肝癌、胃癌和急性髓系白血病中高表达，其过度表达程度与生存，预后或肿瘤分级密切相关。
3、除了在肿瘤上高表达之外，b7-h3可能有类似pd-l1介导的t细胞抑制信号的功能。有人提出b7-h3具有共刺激和共抑制功能，这取决于肿瘤特异性，微环境因素和信号强度。除了其作为免疫调节剂的作用，b7-h3与增强癌症的转移和血管生成有关。
4、由于b7-h3表达主要限于肿瘤细胞及肿瘤微环境的相关细胞，因此，b7-h3是一个非常重要的肿瘤相关抗原，可以作为潜在广谱免疫疗法的靶点。
5、但现有技术中抗人b7-h3抗体具有对膜表面b7-h3亲和力和特异性不足、导致脱靶效应和不良反应等缺陷。
6、因此，开发亲和力更好、特异性更强的靶向b7-h3
技术实现思路
1、本专利技术提供了亲和力优化、特异性更强的靶向b7-h3的抗体、抗原嵌合受体及其应用。
2、在本专利技术的第一方面，提供了一种靶向b7-h3的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段具有重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区的互补决定区cdr(hcdr)和所述轻链可变区的互补决定区cdr(lcdr)选自下组：
3、(1) 氨基酸序列如seq id no: 40所示的hcdr1，
4、氨基酸序列如seq id no: 41所示的hcdr2，
5、氨基酸序列如seq id no: 42所示的hcdr3，
6、氨基酸序列如seq id no: 44所示的lcdr1，
7、氨基酸序列如seq id no: 45所示的lcdr2，和
8、氨基酸序列如seq id no: 46所示的lcdr3；
9、(2) 氨基酸序列如seq id no: 22所示的hcdr1，
10、氨基酸序列如seq id no: 23所示的hcdr2，
11、氨基酸序列如seq id no: 24所示的hcdr3，
12、氨基酸序列如seq id no: 26所示的lcdr1，
13、氨基酸序列如seq id no: 27所示的lcdr2，和
14、氨基酸序列如seq id no: 28所示的lcdr3；
15、(3) 氨基酸序列如seq id no: 4所示的hcdr1，
16、氨基酸序列如seq id no: 5所示的hcdr2，
17、氨基酸序列如seq id no: 6所示的hcdr3，
18、氨基酸序列如seq id no: 8所示的lcdr1，
19、氨基酸序列如seq id no: 9所示的lcdr2，和
20、氨基酸序列如seq id no: 10所示的lcdr3；
21、(4) 氨基酸序列如seq id no: 12所示的hcdr1，
22、氨基酸序列如seq id no: 13所示的hcdr2，
23、氨基酸序列如seq id no: 14所示的hcdr3，
24、氨基酸序列如seq id no: 17所示的lcdr1，
25、氨基酸序列如seq id no: 18所示的lcdr2，和
26、氨基酸序列如seq id no: 19所示的lcdr3；
27、(5) 氨基酸序列如seq id no: 31所示的hcdr1，
28、氨基酸序列如seq id no: 32所示的hcdr2，
29、氨基酸序列如seq id no: 33所示的hcdr3，
30、氨基酸序列如seq id no: 35所示的lcdr1，
31、氨基酸序列如seq id no: 36所示的lcdr2，和
32、氨基酸序列如seq id no: 37所示的lcdr3。
33、在另一优选例中，所述抗体或其抗原结合片段为鼠源的或人源化的。
34、在另一优选例中，所述的抗体为鼠源抗体、嵌合抗体或人源化抗体。
35、在另一优选例中，所述抗体或其抗原结合片段包括完整的抗体、fab、单链抗体(scfv)、或纳米抗体。
36、在另一优选例中，所述的抗体或其抗原结合片段的cdr区包含与上述序列中任一具有至少80%、优选地至少90%、更优选地至少95%的序列相似性的氨基酸序列。
37、在另一优选例中，上述氨基酸序列中任意一种氨基酸序列还包括任选地经过添加、缺失、修饰和/或取代至少一个氨基酸的，并能够保留b7-h3结合亲和力的衍生序列。
38、在另一优选例中，所述添加、缺失、修饰和/或取代的氨基酸数量为1-3个，较佳地为1-2个，更佳地为1个。
39、在另一优选例中，当所述抗体或其抗原结合片段为人源化的抗体或其抗原结合片段时，所述重链可变区和所述轻链可变区选自下组：
40、(1) 氨基酸序列如seq id no: 54所示的重链可变区，和氨基酸序列如seq idno: 55所示的轻链可变区；
41、(2) 氨基酸序列如seq id no: 57所示的重链可变区，和氨基酸序列如seq idno: 55所示的轻链可变区；
42、(3) 氨基酸序列如seq id no: 48所示的重链可变区，和氨基酸序列如seq idno: 49所示的轻链可变区。
43、在另一优选例中，当所述抗体为鼠源抗体或嵌合抗体时，所述抗体的重链可变区和轻链可变区选自下组：
44、(1) 氨基酸序列如seq id no: 39所示的重链可变区，和氨基酸序列如seq idno: 43所示的轻链可变区；
45、(2) 氨基酸序列如seq id no: 21所示的重链可变区，和氨基酸序列如seq idno: 25所示的轻链可变区；
46、(3) 氨基酸序列如seq id no: 3所示的重链可变区，和氨基酸序列如seq id no:7所示的轻链可变区；
47、(4) 氨基酸序列如seq id no本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种靶向B7-H3的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段具有重链可变区和轻链可变区，其特征在于，所述重链可变区的互补决定区CDR(HCDR)和所述轻链可变区的互补决定区CDR(LCDR)为：
2.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段为鼠源的或人源化的；
3.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段为单链抗体(scFv)。
4.一种嵌合抗原受体(CAR)融合蛋白，其特征在于，所述嵌合抗原受体融合蛋白从N端到C端包含：
5. 一种重组蛋白，所述的重组蛋白具有：
6. 一种抗体药物偶联物，其特征在于，所述的抗体药物偶联物含有：
7.一种多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸编码选自下组的多肽：
8.一种载体，其特征在于，所述的载体含有如权利要求7所述的多核苷酸。
9.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求8所述的载体，或基因组中整合有如权利要求7所述的多核苷酸、或表达如权利要求1所
10.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段、如权利要求4所述的CAR融合蛋白、或如权利要求8所述的宿主细胞的用途，其特征在于，用于制备预防和/或治疗B7-H3阳性的癌症或肿瘤的药物或制剂；
...【技术特征摘要】
1.一种靶向b7-h3的抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段具有重链可变区和轻链可变区，其特征在于，所述重链可变区的互补决定区cdr(hcdr)和所述轻链可变区的互补决定区cdr(lcdr)为：
2.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段为鼠源的或人源化的；
3.如权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段为单链抗体(scfv)。
4.一种嵌合抗原受体(car)融合蛋白，其特征在于，所述嵌合抗原受体融合蛋白从n端到c端包含：
5. 一种重组蛋白，所述的重组蛋白具有：
6. 一种...
【专利技术属性】
技术研发人员：汤逢源，刘子川，王军伟，
申请(专利权)人：昕传生物科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：
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