【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本申请涉及用于将分子载荷(例如，寡核苷酸)递送至细胞的靶向复合物及其用途，特别是与疾病治疗相关的用途。引用电子序列表电子序列表(d082470064wo00--seq-cob.xml；大小：1,479,992字节；以及创建日期：2022年7月7日)的内容通过引用以其整体并入本文。
技术介绍
1、肌养蛋白病(dystrophinopathy)是由编码肌养蛋白(dystrophin)的基因中的突变引起的一组独特的神经肌肉疾病。肌养蛋白病包括迪谢内肌营养不良(duchennemuscular dystrophy)、贝克肌营养不良(becker muscular dystrophy)和x连锁的扩张型心肌病。编码肌养蛋白的dmd基因(“dmd”)是包含79个外显子和约260万总碱基对的大基因。dmd中的许多突变(包括外显子移码、缺失、替换和重复突变)能够降低功能性肌养蛋白的表达，导致肌养蛋白病。美国食品和药物管理局(food and drug administration，fda)已经批准了数种靶向人dmd外显子的药剂，包括casimersen、viltolarsen、golodirsen和依特立生(eteplirsen)。其中，casimersen靶向外显子45。
技术实现思路
1、根据一些方面，本公开内容提供了靶向肌细胞以用于将分子载荷递送至那些细胞的复合物，以及可用于其中的分子载荷。在一些实施方案中，本文中提供的复合物对于递送提高或恢复功能性肌养蛋白的表达或活性的分子载荷特别有用。在一
2、根据一些方面，本文中提供了包含与寡核苷酸共价连接的抗转铁蛋白受体1(tfr1)抗体的复合物，所述寡核苷酸被配置成用于诱导dmd前体mrna中的外显子45的跳读，其中所述寡核苷酸包含与seq id no:240、236、280、211、197、212、208、217、213、195、160至194、196、198至207、209、210、214至216、218至235、237至239、241至279和281至399中任一者的至少8个连续核苷酸互补的互补区。
3、在一些实施方案中，抗tfr1抗体包含：
4、(i)seq id no:33的重链互补决定区1(heavy chain complementaritydetermining region 1，cdr-h1)、seq id no:34的重链互补决定区2(heavy chaincomplementarity determining region 2，cdr-h2)、seq id no:35的重链互补决定区3(heavy chain complementarity determining region 3，cdr-h3)、seq id no:36的轻链互补决定区1(light chain complementarity determining region 1，cdr-l1)、seq idno:37的轻链互补决定区2(light chain complementarity determining region 2，cdr-l2)和seq id no:32的轻链互补决定区3(light chain complementarity determiningregion 3，cdr-l3)；
5、(ii)seq id no:7的cdr-h1、seq id no:8的cdr-h2、seq id no:9的cdr-h3、seqid no:10的cdr-l1、seq id no:11的cdr-l2和seq id no:6的cdr-l3；
6、(iii)seq id no:7的cdr-h1、seq id no:20的cdr-h2、seq id no:9的cdr-h3、seqid no:10的cdr-l1、seq id no:11的cdr-l2和seq id no:6的cdr-l3；
7、(iv)seq id no:7的cdr-h1、seq id no:24的cdr-h2、seq id no:9的cdr-h3、seqid no:10的cdr-l1、seq id no:11的cdr-l2和seq id no:6的cdr-l3；
8、(v)seq id no:51的cdr-h1、seq id no:52的cdr-h2、seq id no:53的cdr-h3、seqid no:54的cdr-l1、seq id no:55的cdr-l2和seq id no:50的cdr-l3；
9、(vi)seq id no:64的cdr-h1、seq id no:52的cdr-h2、seq id no:53的cdr-h3、seq id no:54的cdr-l1、seq id no:55的cdr-l2和seq id no:50的cdr-l3；或者
10、(vii)seq id no:67的cdr-h1、seq id no:52的cdr-h2、seq id no:53的cdr-h3、seq id no:54的cdr-l1、seq id no:55的cdr-l2和seq id no:50的cdr-l3。
11、在一些实施方案中，抗tfr1抗体包含：
12、(i)含有与seq id no:76具有至少85％同一性的氨基酸序列的重链可变区(heavychain variable region，vh)；和/或含有与seq id no:75具有至少85％同一性的氨基酸序列的轻链可变区(light chain variable region，vl)；
13、(ii)含有与seq id no:69具有至少85％同一性的氨基酸序列的vh；和/或含有与seq id no:70具有至少85％同一性的氨基酸序列的vl；
14、(iii)含有与seq id no:71具有至少85％同一性的氨基酸序列的vh；和/或含有与seq id no:本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.复合物，其包含与寡核苷酸共价连接的抗转铁蛋白受体1(TfR1)抗体，所述寡核苷酸被配置成用于诱导DMD前体mRNA中的外显子45的跳读，其中所述寡核苷酸包含与SEQ IDNO:240、236、280、211、197、212、208、217、213、195、160至194、196、198至207、209、210、214至216、218至235、237至239、241至279和281至399中任一者的至少8个连续核苷酸互补的互补区。
2.权利要求1所述的复合物，其中所述抗TfR1抗体包含：
3.权利要求1或权利要求2所述的复合物，其中所述抗TfR1抗体包含：
4.权利要求1至3中任一项所述的复合物，其中所述抗TfR1抗体包含：
5.权利要求1至4中任一项所述的复合物，其中所述抗TfR1抗体是Fab片段、Fab’片段、F(ab’)2片段、scFv、Fv或全长IgG。
6.权利要求5所述的复合物，其中所述抗TfR1抗体是Fab片段。
7.权利要求6所述的复合物，其中所述抗TfR1抗体包含：
8.权利要
9.权利要求1至8中任一项所述的复合物，其中所述抗TfR1抗体不与转铁蛋白受体1的转铁蛋白结合位点特异性结合，和/或其中所述抗TfR1抗体不抑制转铁蛋白与转铁蛋白受体1的结合。
10.权利要求1至9中任一项所述的复合物，其中所述寡核苷酸包含所述DMD前体mRNA的剪接特征的至少4个连续核苷酸的互补区。
11.权利要求10所述的复合物，其中所述剪接特征是所述DMD前体mRNA的外显子45中的外显子剪接增强子(ESE)，任选地其中所述ESE包含SEQ ID NO:885至912中任一者的序列。
12.权利要求10所述的复合物，其中所述剪接特征是分支点、剪接供体位点或剪接受体位点，任选地其中所述剪接特征跨越所述DMD前体mRNA的外显子44与内含子44的连接处、在内含子44中、跨越内含子44与外显子45的连接处、跨越外显子45与内含子45的连接处、在内含子45中或跨越内含子45与外显子46的连接处，并且还任选地其中所述剪接特征包含SEQID NO:880至884和913至916中任一者的序列。
13.权利要求1至9中任一项所述的复合物，其中所述寡核苷酸包含与SEQ ID NO:160至399中任一者互补的序列，或包含SEQ ID NO:400至879中任一者的序列，其中每个胸腺嘧啶碱基(T)可独立且任选地用尿嘧啶碱基(U)替代，并且每个U可独立且任选地用T替代。
14.权利要求1至9中任一项所述的复合物，其中所述寡核苷酸包含SEQ ID NO:720、712、760、691、677、692、688、697、693和675中任一者的序列，其中每个胸腺嘧啶碱基(T)可独立且任选地用尿嘧啶碱基(U)替代，并且每个U可独立且任选地用T替代。
15.权利要求1至14中任一项所述的复合物，其中所述寡核苷酸包含一个或更多个磷酸二酰胺吗啉代，任选地其中所述寡核苷酸是磷酸二酰胺吗啉代寡聚物(PMO)。
16.权利要求1至15中任一项所述的复合物，其中所述抗TfR1抗体通过可切割接头与所述寡核苷酸共价连接，任选地其中所述可切割接头包含缬氨酸-瓜氨酸序列。
17.权利要求1至16中任一项所述的复合物，其中所述抗TfR1抗体通过与所述抗体的赖氨酸残基或半胱氨酸残基缀合而与所述寡核苷酸共价连接。
18.靶向DMD的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含SEQ ID NO:160至399中任一者的互补区，任选地其中所述互补区包含与SEQ ID NO:160至399中任一者互补的至少15个连续核苷。
19.权利要求18所述的寡核苷酸，其中所述寡核苷酸包含SEQ ID NO:400至879中任一者的至少15个连续核苷，任选地其中所述寡核苷酸包含SEQ ID NO:400至879中任一者的序列，其中每个胸腺嘧啶碱基(T)可独立且任选地用尿嘧啶碱基(U)替代，并且每个U可独立且任选地用T替代。
20.向细胞递送寡核苷酸的方法，所述方法包括使所述细胞与权利要求1至17中任一项所述的复合物或者与权利要求18或权利要求19所述的寡核苷酸接触。
21.促进细胞中肌养蛋白的表达或活性的方法，所述方法包括使所述细胞与有效用于促进权利要求18或权利要求19所述的寡核苷酸内化至所述细胞的量的权利要求1至17中任一项所述的复合物或者权利要求18或权利要求19所述的寡核苷酸接触，任选地其中所述细胞是肌细...
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.复合物，其包含与寡核苷酸共价连接的抗转铁蛋白受体1(tfr1)抗体，所述寡核苷酸被配置成用于诱导dmd前体mrna中的外显子45的跳读，其中所述寡核苷酸包含与seq idno:240、236、280、211、197、212、208、217、213、195、160至194、196、198至207、209、210、214至216、218至235、237至239、241至279和281至399中任一者的至少8个连续核苷酸互补的互补区。
2.权利要求1所述的复合物，其中所述抗tfr1抗体包含：
3.权利要求1或权利要求2所述的复合物，其中所述抗tfr1抗体包含：
4.权利要求1至3中任一项所述的复合物，其中所述抗tfr1抗体包含：
5.权利要求1至4中任一项所述的复合物，其中所述抗tfr1抗体是fab片段、fab’片段、f(ab’)2片段、scfv、fv或全长igg。
6.权利要求5所述的复合物，其中所述抗tfr1抗体是fab片段。
7.权利要求6所述的复合物，其中所述抗tfr1抗体包含：
8.权利要求6或权利要求7所述的复合物，其中所述抗tfr1抗体包含：
9.权利要求1至8中任一项所述的复合物，其中所述抗tfr1抗体不与转铁蛋白受体1的转铁蛋白结合位点特异性结合，和/或其中所述抗tfr1抗体不抑制转铁蛋白与转铁蛋白受体1的结合。
10.权利要求1至9中任一项所述的复合物，其中所述寡核苷酸包含所述dmd前体mrna的剪接特征的至少4个连续核苷酸的互补区。
11.权利要求10所述的复合物，其中所述剪接特征是所述dmd前体mrna的外显子45中的外显子剪接增强子(ese)，任选地其中所述ese包含seq id no:885至912中任一者的序列。
12.权利要求10所述的复合物，其中所述剪接特征是分支点、剪接供体位点或剪接受体位点，任选地其中所述剪接特征跨越所述dmd前体mrna的外显子44与内含子44的连接处、在内含子44中、跨越内含子44与外显子45的连接处、跨越外显子45与内含子45的连接处、在内含子45中或跨越内含子45与外显子46的连接处，并且还任选地其中所述剪接特征包含seqid no:880至884和913至916中任一者的序列...
【专利技术属性】
技术研发人员：科迪·A·德雅尔丹，基姆·唐，詹姆斯·麦克斯维根，罗梅什·R·苏布拉马尼亚，蒂莫西·威登，穆罕默德·T·卡塔纳尼，布伦丹·奎因，约翰·纳吉姆，
申请(专利权)人：达因疗法公司，
类型：发明
国别省市：
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